灯盏细辛黄酮类成分对压力诱导的视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的考察灯盏细辛中黄酮类成分(总黄酮、灯盏花素)对体外高压诱导的视网膜神经节细胞(retinal gan-glion cells,RGCs)凋亡的影响,探讨其视神经保护作用的物质基础。方法采用胰酶消化法将24只出生2~3d的SD(Sprague-Dawley)乳鼠视网膜制成细胞悬液,接种于经多聚鸟氨酸(HA)和层粘连蛋白(LN)包被的盖玻片中。培养72h后,将覆有细胞的血盖片转入加压装置中,加入黄酮类成分,继续培养48h,采用Fas蛋白免疫组化染色法及原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(Tunel-POD)法进行检测,每天观察细胞形态,同时对部分细胞行NSE染色检查。结果细胞生长良好,NSE染色表明,85%以上的细胞为RGCs。给药组的Fas蛋白阳性表达指数和凋亡指数均明显低于模型组(P<0.05~0.01)。结论黄酮类成分均能对抗压力诱导的RGCs凋亡,为灯盏细辛视神经保护的有效组分。     

枸杞多糖对氧化损伤大鼠晶状体上皮细胞凋亡的调控

目的 :研究枸杞多糖 (lyciumbarbarumpolysaccha rides,LBP)对实验性晶状体氧化损伤所致晶状体上皮细胞(lensepithelialcell,LEC)凋亡的影响。方法 :复制大鼠晶状体LEC凋亡模型 ,将 2 4只透明晶状体随机分为 4组 ,空白组、H2 O2 组、白内停组、枸杞多糖组。枸杞多糖组加入终浓度为1g/L的枸杞多糖共同孵育 2 4h ,采用TUNEL法检测LEC凋亡率 ,用透射电子显微镜观察LEC超微结构改变。结果H2 O2 组LEC凋亡率 (92 .0± 2 .5 5 )显著高于空白组 (3.5± 1.84 ) ,(t=6 2 .97,P <0 .0 1) ;枸杞多糖组LEC凋亡率 (16 .6±8.11)与白内停组比较 ,差异有非常显著性 (t=15 .5 0 ,P <0 .0 1)。透射电镜观察 ,H2 O2 组胞浆明显浓缩 ,核内染色质凝聚或成块 ,枸杞多糖组多数LEC形态改变轻微 ,表现为胞浆基质密度轻度升高 ,部分线粒体水肿 ,细胞间间隙增宽。结论 :枸杞多糖可明显抑制LEC凋亡 ,从祖国医药中寻求防治白内障的有效药物具有广阔前景。     

Involvement of programmed cell death in preimplantation embryo demise

Fragmentation is frequently observed in animal and human embryosobtained via in-vitro fertilization (IVF), and is known to beassociated with decreased pregnancy rates and poor survivalfollowing cryopreservation. We postulate that embryo fragmentationis a consequence of activated programmed cell death (PCD) andsubsequent apoptosis and discuss evidence of morphological,histological and biochemical features compatible with the occurrenceof PCD in preimplantation embryos. If PCD is an underlying causeof the high incidence of the fragmentation seen in human pre-embryos,it remains to be determined whether this is reflective of thenatural incidence of lethal chromo somes in the human populationor due to the IVF procedure and culture conditions.     

结肠肿瘤细胞株体外培养过程中的自发性凋亡的观察

研究了Ｖ２３５Ｅ、Ｖ２３５Ｌ、Ｖ４１１三个结肠肿瘤细胞株的细胞凋亡现象。ＤＮＡ电泳分析和ＡＯ／ＥＢ荧光染色形态学检查表明，这三个肿瘤细胞株均存在自发性凋亡。提示肿瘤细胞，包括恶变的癌细胞仍可保留与增殖相对立的凋亡过程。肿瘤细胞存在自发性细胞凋亡的观察，有助于更好地认识肿瘤的发生和发展过程。此外，这些细胞株也为进一步研究细胞凋亡的诱导及其调控提供了有用的细胞模型。     

CO作用后大鼠肺血管细胞增殖和凋亡状况的研究

目的：通过研究CO和低氧作用后大鼠肺血管细胞增殖和凋亡状况，探讨低氧肺动脉高压的发病机制及防治措施。方法：应用免疫组织化学，原位末端标记及Western杂交等方法检测常压低氧大鼠肺血管壁细胞增殖，凋亡及c-myc基因的表达状况。结果：正常组，低氧和锡原卟啉组，低浓度CO和血晶素组大鼠肺动脉均存在增殖和凋亡的阳性细胞，两类细胞在肺内呈不均匀散在分布，低氧和锡原卟啉组大鼠肺血管增殖细胞数显著升高而凋亡细胞数显著减少，细胞增殖凋亡比值分别为对照组的5倍或4倍，而低浓度CO和血晶素组肺血管增殖细胞和凋亡细胞系数均显著增加，细胞增殖凋亡比值均为1．2，c-myc在低氧和锡原卟啉组大鼠肺内表达显著增加，在低浓度CO和血晶素组大鼠肺内表达减少。结论：增殖和凋亡现象共存在于正常和处理大鼠的肺血管细胞中，也许c-myc等基因的异常表达导致了细胞增殖和凋亡的失衡，进而调节了慢性低氧肺血管结构的改建。     

API2对黏膜相关淋巴瘤凋亡及凋亡相关蛋白的影响

目的：了解黏膜相关淋巴瘤的凋亡水平及其所涉及到的信号传导通路。方法：收集33例胃肠黏膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤病例，通过TUNEL技术原位检测MALT淋巴瘤肿瘤细胞的凋亡水平，通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学染色检测肿瘤的凋亡抑制蛋白2编码基因(API2)和Caspase3 mRNA及蛋白，对API2和Caspase3水平作半定量和定量分析。根据凋亡检测结果将全部病例分为两组，即凋亡细胞数每50个高倍视野小于或等于2的病例组和大于2的病例组，比较2组的API2和Caspase3 mRNA及蛋白。结果：半数以上的MALT淋巴瘤中存在凋亡抑制；凋亡抑制的MALT淋巴瘤病例中API2 mRNA及蛋白水平明显高于没有明显凋亡抑制的病例，但Caspase3 mRNA及蛋白水平在两组病例中表达没有明显的差异。结论：MALT淋巴瘤中存在明显的凋亡抑制，其发生与凋亡抑制因子API2的表达上调有关，但API2对凋亡的调节与Caspase3有关的信号传导通路无明显相关。     

周期性区域阻断大剂量动脉灌注化疗近期疗效探析

目的 探讨周期性区域阻断大剂量动脉灌注化疗的可行性及其临床应用价值。方法 对19例骨肉瘤患者周期性区域阻断大剂量动脉灌注化疗前活检病理标本和化疗后手术切除的病理标本分别应用DNA原位末端标记法、免疫组化S-P法检测骨肉瘤细胞凋亡及Survivin蛋白表达，同时记录患者化疗前后的临床疼痛症状、邻近关节功能及患肢瘤体的最大周径。结果 化疗后骨肉瘤细胞凋亡指数为15．47％，明显高于化疗前的7．21％。化疗后Survivin阳性表达率(42．1％)较化疗前(78．95％)明显减少，患者疼痛症状明显减轻，邻近关节功能改善。瘤体最大周径缩小。结论 周期性区域阻断大剂量动脉灌注化疗可以诱导骨肉瘤细胞凋亡的增加。降低骨肉瘤组织Survivin蛋白的表达，是骨肉瘤综合治疗的有效措施之一。     

子宫肌瘤与细胞凋亡的研究

目的:探讨子宫平滑肌瘤的发生与细胞凋亡的关系.方法:采用凝胶电泳技术对子宫平滑肌瘤患者的肌瘤核组织(实验组)及其周围的正常肌组织(对照组)进行DNA片段分析;采用碘化丙啶(PI)对DNA染色,流式细胞仪检测两组细胞的凋亡率,进行细胞凋亡的定量分析.结果:实验组有9例出现DNA断裂的梯形条带(9/30,30.0%),对照组有20例出现DNA梯形条带(20/30,66.7%),二者比较有明显差异;实验组凋亡率明显低于对照组.结论:子宫肌瘤的发生与细胞凋亡异常有关.     

脂质体介导的c-myc反义硫代寡核苷酸诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡

目的　探讨c myc反义硫代寡核苷酸 (antisensephosphorothioateoligodeoxynucleotide ,APSODN)对胃癌SGC 790 1细胞凋亡的影响。方法　人工合成c mycAPSODN ,通过脂质体转染法处理人胃癌细胞系SGC 790 1后 ,于不同时间收集细胞 ,采用Northernblot、Westernblot检测c myc基因mRNA及蛋白表达 ,采用TUNEL方法检测凋亡指数 ,以流式细胞仪检测细胞周期。结果　TUNEL显示c mycAPSODN可诱导胃癌SGC 790 1细胞凋亡 ,并与APSODN的浓度和处理时间有关。流式细胞仪检测显示细胞阻滞于G0 /G1期。结论　c mycAP SODN可诱导胃癌细胞凋亡。