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101.
102.
为研究肿瘤特异性凋亡基因(apoptin gene)在诱导人黑素瘤细胞A375发生凋亡时,c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在细胞发生凋亡中的作用,用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑素瘤细胞A375;采用流式细胞仪、蛋白印迹法(Western blot)、锥虫蓝染色法及RT-PCR等方法研究其在不同时间对人黑素瘤细胞A375诱导凋亡的作用。结果表明,apoptin基因瞬间转染的人黑素瘤细胞A375可出现明显的细胞凋亡;而且凋亡细胞的数量与apoptin的转染时间有关;凋亡细胞内磷酸化型JNK蛋白随凋亡细胞数量的增加而增多,而非磷酸化型JNK蛋白表达无明显变化。结论:JNK信号通路的活化可能在apoptin诱导肿瘤细胞凋亡过程中发挥作用。 相似文献
103.
目的:探讨姜黄素(Curcumin,Cur)对Aβ25—35诱导体外去血清培养PC12细胞周期异常与细胞凋亡的可能影响机制。方法种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期,每次实验分对照组(0)、诱导组和保护组;流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系;通过RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测cyclin D1、cdk4、pRb、E2F1、bax等基因表达水平的变化。结果:(1)去血清培养24h.PC12细胞大约90%同步于G0/G1期;(2)25μmoL/L Aβ25-35处理8、16h。 相似文献
104.
目的 探讨周期蛋白基因D1(CyclinD1)和核转录因子-κB(NF -κB)在5 氟脲嘧啶(5 - Fu)诱导肝癌细胞凋亡过程中的表达及其对细胞周期的影响。方法 体外培养人肝癌细胞株SMMC- 772 1,应用流式细胞术检测5 Fu对SMMC -772 1细胞周期和凋亡的影响;免疫印迹分析cyclinD1表达差异;用TransAM核转录因子活性检测试剂盒检测NF κB活性;细胞免疫组织化学检测NF κBp65入核情况。结果 5 Fu可诱导SMMC -772 1细胞凋亡,5 0、10 0、2 0 0 μg/ml 5 Fu分别作用2 4h后,其诱导细胞凋亡率分别为13 .2 % ,2 1.7%和3 5 .9% ,与对照组相比有显著性差异(P <0 .0 5 )。随着5- Fu浓度的增加,S期细胞比例和细胞增殖指数增加,CyclinD1蛋白的表达逐渐增强,NF -κBp65被激活并入核。结论 5 -Fu可诱导肝癌SMMC 772 1细胞凋亡;NF- κB在5 - Fu诱导肝癌细胞凋亡同时被激活;其下调基因CyclinD1过度表达可能是促进细胞增殖、对抗细胞凋亡的重要因素之一。 相似文献
105.
MRP在非小细胞肺癌和正常肺组织中表达及其预后意义的研究 总被引:5,自引:2,他引:5
背景与目的 肿瘤多药耐药是导致肿瘤化疗失败的主要原因。多药耐药相关蛋白(MRP)在非 小细胞肺癌中的表达意义和导致耐药的机制倍受关注,其研究结果对逆转多药耐药、提高化疗疗效意义重大。 本研究旨在探讨正常肺组织和非小细胞肺癌中MRP的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法 采用SP免疫组织化学法检测62例具有完整随访资料的非小细胞肺癌组织标本中MRP的表达,并联合应 用Westernblot对30例新鲜非小细胞肺癌和相应正常肺组织中MRP的表达进行了研究。结果 正常肺组 织MRP表达水平明显低于肺癌组织(P<0.05)。MRP表达与患者性别、组织分型、细胞分化程度、淋巴结转 移均无明显关系(P>0.05)。MRP阴性表达的非小细胞肺癌患者术后生存期为69.81月±17.41月,阳性者 为25.38月±4.46月(P=0.0156)。MRP阴性的鳞癌患者术后生存期为79.86月±20.35月,阳性者为 23.41月±4.48月(P=0.015);腺癌中MRP表达与生存期无相关性。COX模型分析表明,术后生存期与淋 巴结转移(P=0.038)、MRP表达(P=0.035)呈显著负相关。结论 非小细胞肺癌的MRP表达明显高于正 常肺组织,MRP阴性的患者术后生存期明显长于阳性者,MRP表达可能是影响非小细胞肺癌预后的独立因 素。 相似文献
106.
目的建立金黄色葡萄球菌耐药转运蛋白NorA免疫检测方法。方法利用琼脂稀释法测定诺氟沙星(NFLX)对临床分离的6株金葡菌和标准菌株ATCC25923的MIC。对norA基因进行克隆、表达,提取表达产物包涵体,并进行了纯化。将纯化的表达蛋白作为免疫原免疫家兔,获取NorA蛋白的抗体血清。利用制得的抗体通过Western blotting检测临床分离的6株金葡菌的NorA蛋白表达水平。结果氟喹诺酮类药物耐药水平较高的临床分离金葡菌菌株的NorA蛋白表达水平一般较高,敏感菌株的耐药水平较低且接近。结论免疫检测方法可用于检测金葡萄菌耐药转运蛋白NorA的表达水平。 相似文献
107.
1426例幽门螺杆菌抗体检测的临床价值探讨 总被引:2,自引:0,他引:2
李鑫 《安徽卫生职业技术学院学报》2004,3(3):15-16
目的:探讨I型和II型幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,简称 HP)与小儿腹痛的关系.方法:对1426例腹痛患儿,用免疫印迹法进行分型检测.结果:检出HP阳性590例,占41.37%;其中I型HP感染342例,占57.97%;II型248例,占42.03%.结论:免疫印迹法分型检测HP对临床诊治具有重要的指导意义. 相似文献
108.
大肠杆菌脂多糖诱导大鼠Kupffer细胞NF-κB激活及其意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨大肠杆菌脂多糖(LPS)诱导大鼠Kupffer细胞NF-κB激活及其意义。方法将Kupffer细胞随机分为A、B、C三组。A组为对照组,B组将LPS加入Kupffer细胞培养基共同培养,C组将PDTC和LPS加Kupffer细胞培养基共同培养。用EMSA法检测NF-κB活性,用Western blot法检测I-κB蛋白含量,用RT-PCR法检测TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达。结果培养液中加入LPS后Kupffer细胞NF-κB活性增加,I-κB水平下降,TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达增加;含有LPS的培养液中加入PDTC后Kupffer细胞NF-κB活性减少,I-κB水平上升,TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达减少。结论LPS可诱导NF-κB激活,并促进KCs源性细胞损害递质的表达从而促进细胞损伤。 相似文献
109.
罗格列酮及饮食干预对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌GLUT4转位的影响 总被引:2,自引:1,他引:2
目的 探讨罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白 4(GLUT4)转位的影响。方法 利用高脂饲料喂养 ,使Sprague -Dawley(SD)大鼠产生胰岛素抵抗 ,用罗格列酮及饮食干预治疗 4周后 ,取骨骼肌组织 ,应用Western -bloting印迹法分析骨骼细胞膜GLUT4表达量。结果 在胰岛素刺激下 ,胰岛素抵抗大鼠骨骼肌细胞膜GLUT4表达较正常大鼠下降 5 2 72 %(P <0 0 0 1) ,罗格列酮及饮食干预组 ,细胞膜GLUT4表达较未干预胰岛素抵抗大鼠分别增加 49 5 3 %、5 0 3 4%(P <0 0 0 1)。结论 罗格列酮可促进胰岛素刺激的GLUT4转位 ,从而改善高脂喂养所引起的骨骼肌组织胰岛素抵抗 相似文献
110.
偏头痛大鼠脑干组织G蛋白亚基Gsa和Gia含量的变化 总被引:11,自引:1,他引:11
目的 观察实验性偏头痛大鼠脑干组织 (Gsa和Gia)G蛋白两个亚基含量的变化 ,探讨其在偏头痛发作时的作用。方法 皮下注射硝酸甘油 ( 10mg/Kg)建立实验性偏头痛大鼠模型 ,将动物随机分成正常对照、生理盐水对照和模型组 ,运用免疫印迹法 (Westernblot)检测脑干组织Gia和Gsa含量。结果 皮下注射硝酸甘油 4h后脑干组织Gsa蛋白含量明显升高 (P <0 0 1) ,Gia蛋白含量明显降低 (P <0 0 1) ,Gsa/Gia蛋白比值升高。结论 偏头痛发作可能与大鼠脑干组织G蛋白信号传导系统功能障碍有关。 相似文献