雷公藤甲素对类风湿关节炎滑膜新生血管中血管内皮生长因子、白细胞介素-6抑制机理的探讨

目的:了解雷公藤甲素对类风湿关节炎中血管内皮生长因子、白细胞介素-6的影响,探讨雷公藤对类风湿关节炎患者滑膜新生血管的抑制机理.方法:应用免疫组化技术检测血管内皮生长因子、白细胞介素-6在AA大鼠踝关节滑膜组织中的表达,并观察了雷公藤对其的影响.结果:雷公藤组可见少量的血管内皮生长因子阳性细胞,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).大鼠滑膜关节腔滑液中白细胞介素-6水平检测中,实验显示对照组滑膜组织中白细胞介素-6的水平明显高于空白组和雷公藤组(P＜0.01).结论:雷公藤甲素能降低滑膜组织血管内皮生长因子、白细胞介素-6的表达水平,抑制血管生成.     

雷公藤甲素单次及多次给药对大鼠肝药酶活性的影响

目的:研究雷公藤甲素对大鼠肝药酶活性的影响。方法:对SD大鼠以雷公藤甲素(150、300、450μg·kg-1)灌胃给药,每天1次,给药1d或14d,分别测定细胞色素P450、细胞色素b5含量及红霉素N-去甲基酶(ERD)、二甲基亚硝胺脱甲基酶(NDMA)、甲氧基异唑脱甲基酶(MROD)、乙氧基异唑脱乙基酶(EROD)和戊氧基异唑脱烷基酶(PROD)活性;CYP3A和CYP2E1蛋白含量采用Westernblotting法分析。结果:单次灌胃雷公藤甲素对肝药酶活性及CYP2E1、CYP3A蛋白表达基本无影响;多次给予雷公藤甲素(450μg·kg-1,14d)能诱导NDMA活性,抑制ERD活性,轻度升高CYP2E1蛋白表达,显著降低CYP3A蛋白表达。结论:长期较高剂量给予雷公藤甲素能抑制CYP3A活性,轻度诱导CYP2E1活性。     

中药提取物溶解性能的几种考察方法比较

目的以雷公藤提取物为研究对象,探讨中药提取物溶解性能的测定方法。方法运用沉淀法、指标成分溶解量法、粒径测定法对雷公藤提取物溶解性能进行考察。结果3种方法各有优缺点,但表达的药物溶解性能变化趋势基本相同。结论3种方法对中药提取物的溶解性能进行考察均具有一定的代表性。     

雾化吸入雷公藤内酯醇对豚鼠哮喘气道反应性的治疗作用

目的 探讨雾化吸入雷公藤内酯醇对哮喘豚鼠气道反应性的影响,观察它对于哮喘的治疗作用.方法 选择18只豚鼠,随机分为3组,每组6只.哮喘组:10%卵清蛋白诱喘制模.雷公藤组:诱喘同时予雷公藤内酯醇(8μg·ml-1×10m1)雾化吸入3 0分钟,1次/日×7天.以生理盐水雾化为对照组.7天后,测定气道反应性.结果 哮喘组气道反应性明显大于对照组(P<0.05),与哮喘组相比,雷公藤组气道内压明显减少(P<0.05),气道反应性没有明显差异.结论 雾化吸入雷公藤内酯醇对哮喘有一定治疗作用.     

雷公藤内酯醇联合奥沙利铂抗人结肠癌细胞SW480增殖的体外研究

目的观察雷公藤内酯醇（Triptolide,TPL）和奥沙利铂（Oxaliplatin,L-OHP）单用及联合应用对人结肠癌细胞SW480体外增殖的影响,初步探讨其作用机理。方法 MTT法检测L-OHP和TPL单用和联合对人结肠癌细胞株SW480增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期改变。结果 TPL和L-OHP联合应用对SW480细胞的增殖有协同抑制作用。流式细胞仪检测发现细胞阻滞于S期,G2/M期细胞减少及出现凋亡峰;结论实验证实TPL和L-OHP联合应用能协同抑制SW480细胞增殖,其作用机理有可能是通过阻滞细胞周期引起的。     

血清中雷公藤甲素的液相色谱/质谱联用法测定研究

目的:建立一种新型、灵敏、准确的人血清中雷公藤甲素的液相色谱/质谱联用测定方法。方法:血清经醋酸乙酯提取后,在Waters C18反相色谱柱(150 mm×3.9 mm i.d.,5μm)上,以醋酸-醋酸铵溶液(5 mmol/L)/乙腈/甲醇(60:30:10,v/v/v)为流动相,以泼尼松龙为内标,采用大气压化学电离(APCI)离子化方式在选择离子监测(SIM)模式下进行检测,定量检测离子为m/z[M-H]-359.1。结果:血清中雷公藤甲素测定的日内与日间精密度分别小于10.7%和11.3%,其在1.0～200.0 ng/ml范围具有良好的线性,检出限为1.0 ng/ml。结论:本方法可用于血清中痕量雷公藤甲素残留的测定。     

雷公藤甲素防治脉络膜新生血管形成的研究进展

目的:介绍脉络膜新生血管(CNV)的病理机制及一线抗VEGF药物的特点,探讨雷公藤甲素(TP)防治CNV形成的可行性。方法:通过对国内外相关文献资料的整理、对比和分析,总结TP在新生血管形成过程中的作用及分子机制,分析TP抑制CNV形成的可行性。结果与结论:我们认为TP具有防治CNV形成的功效,作用机制可能与其抑制HIF-1通路、VEGF通路及Dll4-Notch通路有关。笔者为评估TP是否可作为防治CNV形成的新药提供实验依据。     

雷公藤甲素对糖尿病大鼠肾组织RANTES的影响

目的探讨雷公藤甲素（triptolide,TPL）对糖尿病大鼠肾组织的影响及其机制。方法 SD大鼠随机分为正常对照组（正常组）、糖尿病模型组（模型组）、雷公藤甲素小剂量治疗组（TPL小剂量组,TPL0.2 mg/kg灌胃）、雷公藤甲素大剂量治疗组（TPL大剂量组,TPL 0.4 mg/kg灌胃）,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃。实验第4、8、12周,各组随机选5只大鼠检测体重、肾重、24 h尿白蛋白（24 hUAL）、FBG、TC、TG、ALT、AST、WBC、HbA1c;采用RT-PCR、ELISA法检测肾皮质调节活化正常T细胞表达与分泌因子（regulated upon activation normal T-cell expressed and secreted,RANTES）蛋白及mRNA表达;HE、PAS、Masson肾组织病理染色,观察各时间点肾小球、肾小管间质病变,PAS染色观察肾小球的硬化指数（glomerular sclerosis index,GSI）,计算肾间质纤维化指数（renal interstitial filrosis index,RIFI）。结果与本组4周比较,两个给药组12周24 hUAL、RANTES、GSI、RIFI降低（P〈0.01）。与本组8周比较,两个给药组12周24 hUAL、RANTES、GSI、RIFI较本组8周时降低（P〈0.05,P〈0.01）。与正常组比较,模型组4、8、12周大鼠体重、肾重明显降低（P〈0.01）,24 hUAL、FBG、TG、TC、HbA1c、RANTES、GSI及RIFI均明显升高（P〈0.01）。与模型组比较,两个给药组24 hUAL、RANTES、GSI、RIFI降低（P〈0.01）。与TPL小剂量组比较,大剂量组24 hUAL、RANTES、GSI、RIFI降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论雷公藤甲素能抑制糖尿病大鼠肾组织RANTES的过度表达,并可改善肾小球硬化及肾间质纤维化。     

雷公藤内酯醇对人肾小管上皮细胞抗原呈递功能的影响

目的：观察雷公藤内酯醇对炎症因子刺激下人肾近端小管上皮细胞（HKC细胞）抗原呈递能力和共刺激分子表达的影响。方法：以IFN－γ（200μg/L)和TNF－α（20μg/L)联合刺激HKC细胞或同时加入不同浓度的雷公藤内酯醇,采用流式细胞仪检测细胞表面主要组织相容性二类复合体（MHC－Ⅱ）,共刺激分子B7－1,B7－2及细胞间粘附分子1（ICAM－1）表达情况,细胞内ICAM－1mRNA 表达量采用半定量逆转录PCR法检测。结果：普能培养时HKC细胞低度表达MHC－II分子,大量表达ICAM－1分子,不表达B7－1和B7－2分子,IFN－γ（200μg/L)和TNF－α（20μg/L)联合刺激24h后,小管细胞表面MHC－Ⅱ,ICAM－1,B7分子表达均显著增强,其中MHC－Ⅱ变化最大,RTPCR显示ICAM－1 mRNA表达也明显增加,雷公藤内酯醇可以剂理依赖性地抑制炎症因子引起的细胞MHC－Ⅱ,B7－1以及B7－2分子表达上调,但对刺激引起的ICAM－1蛋白及mRNA表达上调无明显影响。结论：雷公藤内酯醇可以抑制炎症因子刺激下人肾近端小管上皮细胞MHC－Ⅱ及B7分子表达上调,减弱肾小管上皮细胞作为抗原呈递细胞活化T细胞的能力。     

雷公藤甲素对哮喘小鼠信号转导和转录激活因子6及eotaxin表达的影响

目的研究雷公藤甲素对哮喘小鼠信号转导和转录激活因子6(STAT6)、嗜酸粒细胞趋化因子(eotaxin)表达的影响,探讨其治疗哮喘的机制。方法建立小鼠卵蛋白哮喘模型,随机分为7组,分别为对照组、地塞米松治疗组及不同剂量雷公藤甲素治疗组,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸粒细胞(Eos)计数;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学法分别检测肺组织中STAT6、eotaxin mRNA及气道上皮STAT6、eotaxin蛋白表达水平。结果哮喘组STAT6、eotaxin mRNA及蛋白表达明显高于正常对照组(P<0.01),雷公藤甲素治疗组及地塞米松组明显低于哮喘组(P<0.01)。气道上皮STAT6的蛋白表达与BALF中白细胞数、Eos计数及气道上皮eotaxin蛋白表达呈正相关(r分别为0.528,0.612,0.682,P<0.01)。气道上皮eotaxin蛋白表达与白细胞总数、Eos计数呈正相关(r分别为0.79,0.88,P<0.01)。结论雷公藤甲素抑制哮喘气道炎症的机制可能与其抑制STAT6及eotaxin的表达活性有关。