手足口病密切接触儿童预防用药后病原体阳性检出率分析

目的：分析手足口病（HFMD）密切接触儿童预防用药后病原体阳性检出率的变化,为HFMD的预防提供科学依据。方法：将HFMD密切接触儿童1106例分为预防1组（用中药）、预防2组（用中药加干扰素）、预防3组（用干扰素）、对照组（空白对照）,统计各组HFMD发病率,并从中随机抽取282例儿童采集大便标本,进行EV71和CoxA16病毒PCR检测。结果：（1）发病率各预防组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．001）,各预防组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）各组间、各组内发病与未发病儿童大便标本Ev71和CoxA16病毒PCR总阳性率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论：预防用药能显著降低HFMD发病率,但不能降低EV71和CoxA16病毒PCR总阳性检出率,其原因可能与投药剂量或其他因素有关。     

OVCA1在宫颈病变中表达的意义及与CyclinD1、p16的相关性

目的:探讨宫颈病变中OVCA1与CyclinD1、p16蛋白表达的意义、相关性及与高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)感染的关系.方法:免疫组化法检测89例宫颈癌、30例宫颈鳞状上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)、21例正常宫颈组织中OVCA1、CyclinD1、p16的蛋白表达情况.结果:OVCA1在正常宫颈、CIN及宫颈癌中蛋白表达的阳性率分别为28.57%、60.00%、84.27%,差异有统计学意义(P<0.01).OVCA1的蛋白表达在低/高级别CIN、早/中晚期宫颈癌中均有统计学差异(P<0.05).OVCA1的蛋白表达与宫颈癌病理分型、分级及有无淋巴结转移无关(P>0.05).OVCA1与Cy-clinD1、p16的蛋白表达均存在正相关(P<0.01).OVCA1的蛋白表达在HR-HPV(+)组高于HR-HPV(-)组(P<0.05).结论:OVCA1蛋白表达异常参与了宫颈病变发生的全过程.OVCA1在宫颈病变发生中的作用机制与CyclinD1、p16的异常表达及HR-HPV感染相关.     

喉鳞状细胞癌P16和增殖细胞核抗原表达

目的探讨p16基因及增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学技术SP法检测抑癌基因p16蛋白及PCNA在40例喉鳞状细胞癌中的表达,并与癌旁组织和正常喉组织对比,结合喉鳞状细胞癌的临床病理特征进行分析。结果在喉鳞状细胞癌中p16阳性率(50.0%)明显低于癌旁组织(76.0%)和正常组织(100.0%,P<0.05);Ⅰ、Ⅱ期喉癌中p16阳性率明显高于Ⅲ、Ⅳ期。喉鳞状细胞癌中PCNA阳性率为55.0%,明显高于癌旁组织(32.0%)和正常组织(10.0%,P<0.05);Ⅰ、Ⅱ期喉鳞状细胞癌中PCNA表达明显低于Ⅲ、Ⅳ期(P<0.05)。p16阳性与阴性患者生存期≥5年的比率分别为66.7%和33.3%,P<0.05;PCNA阳性与阴性患者生存期≥5年的比率分别为37.5%和62.5%,P<0.05。结论p16和PCNA分别是喉鳞状细胞癌进展及预后判断的独立指标;p16和PCNA联合检测对喉鳞状细胞癌的预后评估可能更有价值。     

外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率对血小板减少性疾病鉴别诊断的价值

目的探讨外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率对不同血小板减少性疾病鉴别诊断的价值。方法应用流式细胞术检N28例正常对照者、47例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者、16例再生障碍性贫血（AA）患者、18例骨髓增生异常综合征（MDS）患者、13例急性淋巴细胞白血病（ALL）患者、37例急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患者、11例慢性粒细胞白血病（CML）患者、6例慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者和12例自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率。结果ITP组外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率低于正常对照组（P〈0．05）;AA组低于正常对照组（P〈0．05）,高于MDS（P〈0．05）;白血病组较正常对照组明显降低（P〈0．05）,ALL组、ANLL组、CML组、CLL组之间无明显差异,白血病患者外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率随病情发展、复发而降低,病情控制缓解而上升;AIHA组与正常对照组相比无明显差异。结论外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率的检测对鉴别血小板减少性疾病有重要意义,对患者的疗效及预后判断有一定的参考价值。     

HPV16 主要衣壳蛋白L1在昆虫细胞中的表达及免疫学活性分析

目的 在昆虫细胞中表达HPV16L1（曲02）蛋白，并分析其免疫学活性。方法 构建表达载体pEASTBACTHb-L1(m202)，用重组病毒感染sf9细胞表达HPV16L1（m202)蛋白，SDS-PAGE，western-blot鉴定其表达，亲和层析和离子交换层析纯化后的产物经鼻腔免疫Balb/c小鼠，竞争抑制ELISA分析免疫血清的中和活性。结果 SDS-PAGE，western-blot结果证明HPV16L1（m202)蛋白的表达，纯化复性后产率约为17%，免疫血清具有竞争抑制HPV中和单抗与HPV16L1（m202)相结合的能力，结论 昆虫细胞表达的HPV16L1（m202)蛋白具有作为预防疫苗的潜力。     

宫颈病变中HPV16感染状况、微卫星不稳定性及错配修复基因表达的研究

目的通过检测HPV16、微卫星不稳定性（microsatellitein stability,MSI）和错配修复基因（hMLH1、hMSH2）的表达,探讨三者在宫颈病变进展中的作用及意义。方法将宫颈病变组织分为宫颈炎、宫颈上皮内瘤变（cervicalintraepithelialneoplasia,CIN）CIN1、CIN2～CIN3、宫颈癌4组。用PCR方法检测HPV16感染状况,用聚合酶链-单链构象多态性分析方法检测宫颈组织中MSI的表达,采用免疫组织化学SP法来检测宫颈组织中的hMLH1和hMSH2的表达,并分析三者的相关性。结果CIN120例中25.0%（5/20）检测到HPV16,CIN2～CIN331中54.8%（17/31）检测到HPV16,二者比较χ2=4.413,P=0.034;宫颈癌中各期HPV16感染比较,差异均无统计学意义。选取的三个微卫星位点D3S2832E、RH91127和SHGC-56838均在宫颈炎中未检测到MSI,在CIN和宫颈癌中均检测到MSI的存在。但总体的表达率较低,最高只有46.7%。错配修复基因的低表达检测结果和MSI的检测结果一致,唯一不同的是前者的总体表达率较高,最高的低表达率为80%;宫颈病变中MSI与错配修复基因（本文即hMLH1、hMSH2）蛋白低表达及HPV16为正相关。结论HPV16的感染导致错配修复基因的低表达,进一步引起微卫星不稳定性,可能是宫颈癌发生、发展的重要机制,HPV16、微卫星不稳定性和错配修复基因有望作为宫颈癌高危人群的检测指标。     

藻类及陆生高等植物叶绿体16S rRNA基因进化谱系及同源性分析

目的：了解杜氏盐藻与其他藻类和高等植物间的亲缘关系。方法：将杜氏盐藻的叶绿体16S rRNA序列与一些藻类和陆生植物叶绿体的16S rRNA序列资料进行同源性比较与分析,并构建进化树。结果：进化树显示整个植物界明显分为3个大的类群：蓝藻门、红藻门、隐藻门、金藻门、褐藻门、硅藻门和甲藻门形成一个类群,裸藻门单独形成一个类群,而绿藻门和陆生高等植物共同形成一个大的类群。陆生高等植物间的亲缘关系非常近,拥有一个共同的绿藻祖先,而杜氏盐藻、莱菌衣藻等所归属的团藻目则与其他绿藻及高等植物分离,独立形成一个极为分散的类群。结论：杜氏盐藻所隶属的团藻目属于较为原始的绿藻,彼此之间亲缘关系较远,而且与进化主干上的其他绿藻及高等植物较早分离。     

大鼠肺癌癌变过程中Rb肿瘤抑制途径失控的意义

目的 :探讨大鼠肺癌癌变过程中Rb肿瘤抑制途径的主要成员p16、CyclinD1和CDK4基因的动态表达和肺癌发生发展及侵袭转移的关系。方法 :用 3 甲基胆蒽 (3 methylcholanthrene,MCA)及二乙基亚硝胺 (diethylnitrosa mine,DEN)碘油溶液在 80只大鼠诱发大鼠肺癌 ,12只作为对照组。应用免疫组织化学及原位杂交技术检测大鼠肺癌癌变各阶段组织的p16、CyclinD1和CDK4基因的改变。结果 :随大鼠肺癌的发生发展 ,p16基因呈不同程度的缺失或低表达 ,其中p16蛋白在 6 0 .75 % (6 5 10 7)的大鼠肺癌中缺失表达 ;p16蛋白表达的阳性率在对照组及癌前病变与肺癌相比差异有极显著性 (P <0 .0 1) ;浸润癌与原位癌相比 ,p16蛋白阳性率的差异有显著性 (P <0 .0 5 )。CyclinD1、CDK4的表达在对照组较弱或阴性 ,而在实验组有不同程度的过表达 ,阳性率范围分别为 10 .0 0 %～ 79.0 7%、15 .0 0 %～ 72 .0 9% ;在不典型增生与原位癌、原位癌与浸润癌之间 ,cyclinD1和CDK4表达的升高有显著性 (P <0 .0 5 )。大鼠肺癌癌变中p16与cyclinD1呈负相关 (P <0 .0 1) ,Pearson列联系数为 0 .5 30 7;CDK4与CyclinD1呈正相关(P <0 .0 1) ,Pearson列联系数为 0 .5 782 ;p16与CDK4无明显相关性 (P >0 .0 5 )。p16、CyclinD1、CDK4与大鼠肺癌发?     

丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响

目的:探讨丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养PC-3细胞,给予不同浓度的YB16(0.125~16μmol·L-1),以噻唑蓝(MTT)比色法检测YB16对PC-3的细胞毒性,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,吖啶橙(AO)染色、流式细胞术检测YB16对PC-3的凋亡影响,逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)检测YB16对PC-3细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),B细胞淋巴瘤-xl(Bcl-xl),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2,Bcl-xl,Bax,激活型Caspase-3(cleaved-Caspase-3)蛋白表达,并对结果进行分析。结果:YB16能显著抑制PC-3细胞的生长,具有剂量依赖性(P0.05);YB16能促进细胞的凋亡,相差显微镜,AO染色法观察可见细胞具凋亡特征性改变;YB16能下调Bcl-2,Bcl-xl,上调Bax,Caspase-3 mRNA和蛋白的表达(P0.05)。结论:YB16能抑制PC-3细胞增殖,促进PC-3发生凋亡,其机制可能与促进Caspase-3表达有关,具有良好的抗肿瘤作用。