Conductimetric titrimetry for assay of selected antibiotics in non-aqueous media

In this study, a conductimetric titration method is proposed for the determination of some commonly used antibiotics. The conductimetric titration of three antibiotics, namely ampicillin, amoxycillin trihydrate and rifampin, was carried out in acetic acid using perchloric acid as titrant. Ciproflaxacin hydrochloride, however, was titrated after being dissolved in acetic acid containing an excess of mercury(II) acetate. For the titration of netilmicin sulphate, barium acetate prepared in acetic acid was used as titrant. The method was found to be highly accurate and precise, having a relative standard deviation of less than 1.0% for all antibiotics studied. It was also shown that the conductimetric titrimetry could be successfully applied to the assay of commercial preparations containing the above-mentioned antibiotics. The validity of the method was tested by the recovery studies of standard addition to pharmaceuticals and the results were found to be satisfactory.     

结核分支杆菌rpoB基因套式PCR在利福平耐药和结核病辅助诊断中的应用

目的 分析耐利福平的结核分支杆菌(Mtb)rpoB基因突变状况。方法 对38株耐利福平Mtb菌株的rpoB基因突变高频区域进行套式PCR扩增，并进一步全自动测序。结果 38株耐利福平Mtb中有36株存在突变(包含5个密码子11种形式的突变)，突变率94．7％。结论 Mtb xpoB基因的突变与利福平耐药高度关联，rpoB基因套式PCR及测序能快速、正确鉴别耐利福平菌株。     

耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因序列研究

目的 研究杭州地区结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）对利福平（RFP）的耐受与rpoB基因突变的关系。方法 随机挑选了90例结核杆菌感染的病例。选择了利福平作为主要的药物进行药敏实验，PCR扩增39株耐RFP结核分支杆菌的rpoB基因片段（580bp）；测定扩增片段的序列。并与美国国立生物信息中心（www．ncbi．nlm．nih．gov／nucleotide）检索获得结核杆菌野生株（利福平敏感株）序列（登陆号：AJ749948）作对比分析。结果 结果显示PCR结核测序方法得到了39例结核杆菌耐药株。51例敏感株，与药敏实验的方法检测的结果完全一致。测定的11株临床分离的耐药株中，526位或531位有突变，其中526位有突变的有7株，占耐药测定株63．6%，531位突变的有4株。占耐药测定株36．4％。未见两位点同时突变。检测的11株敏感株，未见526位或531位有突变。结论 杭州地区结核分支杆菌耐利福平的发生与rpoB基因的526位或531位突变密切相关，与国外的报告基本相似。但526位突变占耐药测定株高达63．6％。如此高比例目前国内外未见相似报道。PCR扩增和产物测序将是临床检测结核分支杆菌耐利福平和耐多药的一种迅速、准确的方法。     

临床药师参与1例自身免疫病合并抗结核治疗患者的药学实践

目的探讨在接受他克莫司治疗的自身免疫病患者合并抗结核(含利福平)治疗时,保证他克莫司有效全血浓度的方案。方法临床药师通过查阅文献,了解患者治疗方案中存在的药物相互作用,建议医生调整治疗方案,在临床实践中定期随访患者,考察调整后治疗方案的可行性和有效性。结果本案例中患者在将利福平换为利福喷丁后,他克莫司血药浓度短暂升高后再次降低,后期加用五酯胶囊服用10 d后,他克莫司的血药浓度提升到有效范围。结论自身免疫病患者应用包含利福平的抗结核方案时,为控制自身免疫病,可适度上调他克莫司的剂量,但考虑他克莫司治疗剂量范围窄,因此可换用肝药酶诱导作用弱于利福平的其他利福霉素类药物,或加用五酯胶囊来提高他克莫司血药浓度,保证抗结核治疗的同时兼顾免疫治疗的疗效。     

双环醇对利福平大鼠体内药动学的影响

目的:研究双环醇对利福平血药浓度及药动学的影响。方法:12只Wistar大鼠随机分为利福平(对照)组和双环醇+利福平(实验)组共2组,双环醇与利福平的剂量分别为15.85、63.4mg.kg-1,每天1次,连续给药4d。在第4天给药前和给药后0.25、0.5、1、1.5、2、4、6、8、12、24h取血,应用高效液相色谱法测定2组利福平的血药浓度,并计算药动学参数。结果:2组各时间点利福平血药浓度及药动学参数之间比较均无显著性差异(P>0.05)。结论:双环醇与利福平合用于大鼠体内后对利福平药动学无显著影响。     

利福平和几丁糖对慢性骨髓炎的影响

目的 报告利福平（ＲＦＰ）和几丁糖治疗慢性骨髓炎的临床疗效。方法 根据患者年龄、肝脏功能、症状体征以及Ｘ线片改变来确定ＲＦＰ与几丁糖的日服量和治疗总量。结果 本组病例随访时间平均２７月,临床愈合２３例,有效２例,无效３例。结论 ＲＦＰ与几丁糖联合应用能增强抗菌效力,减少ＲＦＰ对肝脏和强化肝脏机能以及提高机体免疫力。     

利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术的诊断效果对比研究

目的 评价利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（GeneXpert Mtb/RIF）检测临床标本诊断结核病和耐利福平结核病的效能.方法 2011年1-5月从解放军第三○九医院、广州市胸科医院和河南省疾病预防控制中心3家单位,连续收集门诊就诊的1971例疑似结核病患者的痰标本,进行涂片、金标准培养和金标准比例法传统药敏试验和GeneXpert Mtb/RIF检测.应用SPSS 11.5统计软件对GeneXpert Mtb/RIF与不同检测方法进行敏感度和特异度分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 与涂片及培养比较,GeneXpert Mtb/RIF检测1968例（1971例中有3例污染排除）痰标本诊断结核病的敏感度和特异度分别为93.27％（748/802）、91.93％（797/867）和91.60％（1068/1166）、95.55％（1052/1101）;与临床诊断比较,GeneXpert Mtb/RIF检测1945例（1971例中有26例无法定诊）痰标本诊断结核病的敏感度和特异度分别为78.66％（822/1045）、98.67％（888/900）;与金标准传统药敏试验比较,GeneXpert Mtb/RIF检测797例标本诊断耐利福平结核病的敏感度和特异度分别为97.92％（188/192）、100.00％（595/595）.结论 GeneXpert Mtb/RIF是一种检测痰标本诊断结核病及耐利福平结核病的快速简便、自动化、敏感度和特异度较高的分子生物学方法,适用于结核病和耐利福平结核病的临床诊断.     

结核分枝杆菌对利福喷汀与利福平交叉耐药的实验研究

目的 观察利福喷汀对结核分枝杆菌的杀菌效力及其与利福平的交叉耐药性，探讨利福喷汀对结核分枝杆菌的实验室耐药界限，为临床应用利福喷汀治疗结核病，包括治疗对利福平耐药的结核病提供依据。方法 用7H9液体培养基、苏通液体培养基、改良罗氏固体培养基测定利福喷汀和利福平对结核分枝杆菌标准株(H37Rv)及临床分离的利福平敏感株、利福平耐药株的最低抑菌浓度(MIC)。结果 在7H9液体培养基上对临床分离的19株利福平敏感株分别测定利福平和利福喷汀的MIC，有80％利福平敏感株利福平的MIC≥0．32μg／ml，而利福喷汀的MIC多分布在0．02～0．32μg／ml之间(占84％)；无论标准株H37Rv、利福平敏感株(19株)或是利福平耐药株(45株)，利福喷汀对结核分枝杆菌的MIC普遍比利福平低2～4倍；利福喷汀敏感株和耐药株的MIC差别较大，在MIC为5～10μg／ml处能最大限度地区分敏感菌和耐药菌。结论 利福喷汀与利福平存在着交叉耐药，但利福喷汀比利福平有更强的杀菌效力，部分结核分枝杆菌对利福平达到临床耐药时，仍未达到利福喷汀临床耐药，对利福平耐药的部分结核分枝杆菌对利福喷汀仍具有一定程度的敏感性，提示临床上对利福平耐药的结核病患者使用利福喷汀可能有一定效果；实验结果对利福喷汀临界耐药界限进行了初步筛查，为利福喷汀常规药敏试验的开展提供了基本试验数据。     

二代线性探针技术在结核分枝杆菌耐药性检测中的价值

目的 评价二代线性探针技术(GenoType MTBDRplus VER 2.0,简称“GenoType 2.0”)快速检测结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对异烟肼与利福平耐药性的临床应用价值。方法 收集2017年4月至2019年4月天津市结核病控制中心参比实验室中疑似肺结核患者的痰标本共6315份,纳入涂阳、培阳且经菌群鉴定为MTB的349 株菌株为研究对象,分别采用表型药物敏感性试验(简称“比例法药敏试验”)和GenoType 2.0检测菌株对利福平、异烟肼的耐药性;并以比例法药敏试验结果为参考标准,评价GenoType 2.0的检测效能。结果 GenoType 2.0、比例法药敏试验和GenoType 2.0+比例法药敏试验检测349株MTB菌株对利福平敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株的检出率分别为86.53%(302/349)、87.97%(307/349)、86.25%(301/349),2.58%(9/349)、2.29%(8/349)、2.29%(8/349),10.89%(38/349)、9.74%(34/349)、11.46%(40/349),前者与后两者及后两者对敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株检出率差异均无统计学意义(χ²=0.322,P=0.851;χ²=0.112,P=0.946;χ²=0.546,P=0.761);对异烟肼敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株的检出率分别为79.94%(279/349)、80.23%(280/349)、79.65%(278/349),9.17%(32/349)、9.46%(33/349)、9.46%(33/349),10.89%(38/349)、10.32%(36/349)、10.89%(38/349),前者与后两者及后两者对敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株检出率差异均无统计学意义(χ²=0.071,P=0.965;χ²=0.017,P=0.991;χ²=0.061,P=0.970)。以比例法药敏试验为参考标准,GenoType 2.0对利福平和异烟肼耐药性检测的敏感度、特异度、符合率、Kappa值分别为91.67%(44/48)和95.89%(70/73)、99.00%(298/301)和100.00%(276/276)、97.99%(342/349)和99.14%(346/349)、0.91和0.97。结论 GenoType 2.0对于利福平和异烟肼的耐药性检测具有较高的敏感度和特异度,加上其检测周期较短,可以满足临床对结核病早期诊断和及时治疗的需求。