促红细胞生成素放射免疫分析及临床应用

目的 :建立促红细胞生成素 ( EPO)的放免分析方法 ,并探讨血清 EPO浓度测定的临床意义。　方法 :用rh EPO免疫动物制备了高质量的抗血清 ,建立了 EPO放免分析方法 ,并测定了正常人和贫血、肾衰患者血清 EPO值。　结果 :灵敏度为 0 .2 2 μg/L,批内 CV为 6.9%～ 8.4% ,批间 CV为 8.0 %～ 9.6% ,回收率为 93 .8%～110 .4%。正常血清 EPO值为 ( 1.5 9± 0 .69) μg/L,贫血患者为 ( 3 .64± 1.2 8) μg/L,肾衰患者为 ( 0 .85± 0 .2 5 ) μg/L,与正常人之间有显著性差异 ( P<0 .0 0 1)。　结论 :EPO的放免分析方法是一种简单、灵敏、特异的分析方法 ,可满足临床的需要 ,测定血清 EPO浓度对许多疾病的诊断和治疗有重要的意义     

人类LAK细胞体外实验性扩增及生物学活性分析

由癌症患者外周血中分离出少量ＬＡＫ前体细胞。在ＬＡＫ细胞培养体系中加入重组人类白细胞介素２，植物血球凝集素及辅助细胞，明显提高了ＬＡＫ细胞的体外增殖能力并延长了ＬＡＫ细胞的存活时间。表型分析发现，ＬＡＫ－Ｌ细胞的ＩＬ－２受体（ＩＬ－２－Ｒ－）表达水平明显高于ＬＡＫ－Ｓ细胞，ＬＡＫ－Ｌ细胞的体外大量增殖具有以ＯｋＴ＾＋ ８表型为主的单亚群增殖特性。体外杀伤实验及裸小鼠体内成瘤抑制实验结果表明，用此法     

Efficient one-step direct labelling of recombinant antibodies with technetium-99m

High-affinity bacterially expressed antibody fragments can nowadays be cloned from established hybridomas or, more conveniently, isolated directly from antibody libraries displayed on filamentous phage. Such antibodies can be tagged with C-terminal peptide tags containing one cysteine residue, which represents a convenient functionalisation site for a number of applications, including technetium-99m labelling. Here we describe a simple one-step method for^99m-Tc labelling of cysteine-tagged recombinant antibodies with more than 50% radionuclide incorporation. The labelled antibodies displayed full retention of immuoreactivity and good stability.     

赖型钩体pDC38核酸序列测定及其与流感伤寒型钩体外膜蛋白基因ompL1核酸序列的类似性匹配

为了探讨赖型钩体 ｐ Ｄ Ｃ３８ 插入片段基因组 Ｄ Ｎ Ａ 编码、位置与ｏｍ ｐ Ｌ１ 基因的关系,作者采用在流感伤寒型钩体外膜蛋白基因ｏｍ ｐ Ｌ１ 首尾区段设计一对引物,以 ｐ Ｄ Ｃ３８ 插入片段作模板进行 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增、测定和类似性匹配（ａｌｉｇｎｍ ｅｎｔ）。结果发现：ｐ Ｄ Ｃ３８ 含有 ２．７ｋｂ 和３．０ｋｂ 两个插入片段,３．０ｋｂ 片段含有 １ 个ｏｍ ｐ Ｌ１ 基因全拷贝。结论：类似性匹配表明,ｐ Ｄ Ｃ３８ 和ｏｍ ｐ Ｌ１ 相同碱基８６４ 个（９０％ ）,碱基变异（不配对）９６（１０％ ）个, ｐ Ｄ Ｃ３８ 可用于钩体诊断、分类、鉴定、疫苗和发病机理的研究。     

The potential impact of increased recombinant zoster vaccine coverage on the burden of herpes zoster among adults aged 50–59 years

IntroductionRecombinant zoster vaccine (RZV) is recommended in the US for prevention of herpes zoster (HZ) in adults aged ≥50 years. Vaccination rates remain suboptimal for adults 50–59 years compared with adults ≥50 years overall. The objective of this study was to model changes in outcomes associated with improved RZV vaccination coverage in US adults 50–59 years.MethodsA multicohort Markov model compared a scenario using real-world vaccination coverage for US adults 50–59 years in 2020 versus scenarios assuming higher coverage. Outcomes, based on a lifetime horizon, included HZ cases and complications avoided, quality-adjusted life-years (QALY), and costs. Model inputs included HZ epidemiology, RZV vaccine efficacy, coverage, adverse events, and costs, based on published literature and US sources. Some inputs were updated from previous models, including real-world estimates of RZV coverage, series completion, and reflecting longer-term data on waning of vaccine efficacy. The model utilized a cohort size of 42,756,488 individuals based on the 2020 US population census.ResultsThe model projected that increasing RZV coverage in adults 50–59 years from 7.3 % to 14.6 % (to coverage for adults 60–64 years in 2020) would avoid an additional 504,468 HZ cases, 42,077 postherpetic neuralgia cases, and 56,247 cases of other HZ-associated complications. The increase in vaccine coverage would result in higher vaccination-related costs of $1,172,411,566, but the avoided HZ cases and complications would be expected to result in direct cost savings of $721,973,386 and indirect cost savings of $593,497,480 from avoided productivity loss. Overall, a gain of 5,230 discounted QALYs and cost savings of $143,059,299 from a societal perspective would be realized.ConclusionModestly higher RZV coverage in US adults 50–59 years could reduce the clinical burden associated with HZ and may result in societal cost savings. These findings demonstrate the potential value of increasing RZV vaccination in this population.     

冻干重组人脑利钠肽治疗缺血性心肌病室性心律失常和急性心力衰竭的疗效和安全性评价

目的 评价治疗冻干重组人脑利钠肽治疗缺血性心肌病患者室性心律失常和急性心力衰竭的临床疗效和安全性.方法 选择心功能Ⅲ-Ⅳ级缺血性心肌病合并室性心律失常及急性心力衰竭患者110例,随机分成治疗组与对照组.治疗组58例,给予冻干重组人脑利钠肽和常规缺血性心肌病治疗,同时加用重组人脑利钠肽,首次负荷剂量1.5 μg/kg静脉注射,然后按0.0075 μg/(kg· min)剂量持续静脉泵入,持续72 h.对照组52例,常规缺血性心肌病药物治疗,观察2周;在实验开始和2周后进行心率、血压、动态心电图、超声心动图、心胸比率、肾功能以及心肌标志物及NT-pro-BNP水平的检查;并观察了2组不良反应和发生率死亡率.结果 两组控制室性心律失常的总有效率分别是70.28％和50.32％,差异有统计学意义(P＜0.05),左室舒张末容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)、左室射血分数(LVEF)和E/A(舒张早期血流速度峰值E峰/舒张晚期血流速度峰值A峰)改善治疗组优于对照组(P＜0.05);心率、血压、心胸比率在治疗前后以及两组之间比较有统计学意义(P＜0.05);同时治疗前和治疗后2周监测肾脏功能和心肌标志物水平,治疗前后以及两组之间比较无统计学意义(P＞0.05);同时治疗前和治疗后2周监测NT-pro-BNP水平,治疗前后以及两组之间比较无统计学意义(P＞0.05);不良反应无统计学意义(P＞0.05),死亡率有统计学意义(P＜0.05).结论 冻干重组人脑利钠肽治疗缺血性心肌病患者室性心律失常和急性心力衰竭有一定效果,可防止恶性心律失常的发生,使左室容积缩小,左室射血分数升高;心率和血压改善,心胸比例下降,NT-pro-BNP下降,降低缺血性心肌病患者的猝死率,不良反应小.     

重组人干扰素α1b抗肠道病毒71型的作用机制研究

目的 研究重组人干扰素α1b(IFN-α1b)体外对肠道病毒71型(EV71)复制的抑制作用,并初步探讨其抗病毒机制.方法 测定IFN-α1b对RD细胞的毒性和IFN-α1b在EV71感染前后给药对EV71感染所致的RD细胞病变的抑制作用,检测IFN-α1b对EV71 RNA和VP蛋白表达量以及病毒复制的影响,并通过构建瞬时表达干扰素诱导的跨膜蛋白3(IFITM3)的RD细胞探索IFN-α1b 通过促进IFITM3的表达,抑制EV71侵入的作用机制.结果 在EV71感染前12h和感染后1h给药,IFN-α1b 抑制EV71细胞病变的IC50值分别为258.53IU/ml和2113.58IU/ml,选择指数SI分别为>16497和>3271,提示IFN-α1b具有明显的抗EV71活性,且在EV71感染前给药效果更明显.机制研究显示,与对照组相比,IFN-α1b可显著抑制EV71的RNA复制、蛋白合成和子代病毒释放,且可能通过对IFITM3 的诱导表达阻止EV71侵入.结论 IFN-α1b具有抗EV71活性,可通过影响病毒生命周期的侵入、复制、装配和释放过程达到抗病毒作用.     

人硫氧还蛋白1在大肠杆菌中的重组表达及其对高糖导致的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的 克隆人硫氧还蛋白1(hTRX1)基因并构建其原核表达载体,获得重组人硫氧还蛋白1(rhTRX1),评价rhTRX1对高糖导致的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用.方法 采用逆转录PCR方法扩增hTRX1基因片段,插入pET22b(+)质粒并转化大肠杆菌Rosetta-gami(2),获得工程菌Rosetta-gami(2)-pET22ab(+)/hTRX1.用SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定重组蛋白的正确性,用镍亲和层析纯化重组蛋白.采用高糖制备HUVEC损伤模型,MTT比色法检测HUVEC的存活率,生化方法测定HUVEC中乳酸脱氢酶(LDH)的外漏率以及细胞上清液中一氧化氮(NO)的水平.结果 构建的工程菌及其产生的重组蛋白rhTRX1正确.与正常对照组比较,高糖损伤组HUVEC的存活率降低、LDH外漏率明显升高,NO的水平明显地降低.不同剂量rhTRX1处理组HUVEC的存活率升高、LDH的外漏率明显降低,NO的水平明显地升高.结论 成功克隆并在大肠杆菌中表达rhTRX1、获得结构正确的rhTRX1,rhTRX1对高糖诱导的HUVEC损伤具有保护作用.     

磷酸化cAMP反应元件结合蛋白对发育期人牙乳头细胞增殖和分化的影响

目的 构建CBP抑制表达慢病毒载体,探讨CBP有效表达沉默后对体外培养人牙乳头细胞(human dental papilla cells,HDPC)的增殖及分化影响.方法 利用基因重组技术构建重组慢病毒建立牙乳头细胞沉默稳转细胞,采用CCK-8检测细胞增殖的变化,采用检测分化相关蛋白的表达评价CBP对HDPC分化能力的影响.结果 测序结果提示成功构建四组人CBP基因的重组慢病毒;转染HDPC后,通过RT-PCR和蛋白质印迹法筛选获得有效靶点的重组慢病毒;CCK-8检测结果表明HDPC在CBP表达下调后增殖活性受到抑制;慢病毒介导CBP沉默后影响了HDPCs相关分化蛋白ColI、OCN、OPN的表达,较对照组显著下调(P＜0.05);牙乳头细胞的ALP活性在转染重组慢病毒后5,7,14 d后显著降低(P＜0.05);结论 成功构建了高效CBP抑制表达载体,CBP沉默可抑制HDPCs的增殖和分化.     

艾拉莫德联合重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白治疗类风湿关节炎的临床研究

目的探讨艾拉莫德片联合注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体–抗体融合蛋白治疗类风湿关节炎的临床疗效。方法选取2015年4月—2016年4月在邢台市人民医院进行治疗的类风湿关节炎患者96例为研究对象,根据入院先后将患者分为对照组和治疗组,每组各48例。对照组皮下注射注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体–抗体融合蛋白,25 mg/次,2次/周。治疗组在对照组基础上口服艾拉莫德片,25 mg/次,2次/d。两组患者均连续治疗12周。观察两组的临床疗效,比较两组的关节症状、类风湿关节炎患者病情评价(DAS-28)评分、健康评估问卷(HAQ)评分和血清学指标。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为79.17%、93.75%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组关节疼痛数、关节压痛数、关节肿胀数和晨僵时间均显著降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组这些观察指标明显低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组DAS-28评分、HAQ评分均显著降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组这些观察指标明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-37(IL-37)、类风湿因子(RF)和血沉(ESR)水平均显著降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组这些观察指标明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论艾拉莫德片联合注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体–抗体融合蛋白治疗类风湿关节炎具有较好的临床疗效,可改善患者临床症状,降低机体炎症反应,改善患者生活质量,具有一定的临床推广应用价值。