人部分正常与肿瘤细胞株中neuritin表达的检测

目的:筛选neuritin高表达及低表达细胞株,为进一步探讨neuritin在不同组织细胞生长发育过程中的作用奠定基础.方法和结果:分别利用RT-PCR与免疫组化技术在mRNA水平及蛋白水平,检测了11种人类细胞株中neuritin的表达情况,发现不仅在多种正常细胞中有表达,而且在部分肿瘤细胞中也有表达.结论:成功筛选出了neuritin高表达及低表达细胞株.     

Level IIb lymph nodes metastasis in elective supraomohyoid neck dissection for oral cavity squamous cell carcinoma: a molecular-based study

OBJECTIVES: To identify the incidence of level IIb lymph nodes metastasis in elective supraomohyoid neck dissection (SOHND) as a treatment for patients with squamous cell carcinoma (SCC) of the oral cavity. STUDY DESIGN: Prospective analysis of a case series. METHODS: Forty-eight patients with SCC of the oral cavity and with no palpable lymph nodes at the neck who underwent an elective SOHND were prospectively studied. The incidence of micrometastasis to level IIb lymph nodes after performing elective SOHND was evaluated by pathologic examination and molecular analysis. RESULTS: Of the 48 patients, 15 (31%) by pathologic analysis and 22 (46%) by molecular analysis had lymph nodes positive for metastatic SCC. By molecular analysis, 5 (10%) of the 48 patients had involvement of level IIb lymph nodes. All patients with metastasis to level IIb lymph nodes have their primary lesions in the tongue and constituted 22% of patients with tongue lesions. There was no instance of isolated metastasis to level IIb lymph nodes without involvement of other nodes in the SOHND specimens. CONCLUSIONS: In this study, level IIb lymph node metastasis was only found in association with tongue carcinoma. Although this region may be preserved in elective SOHND in patients with SCC of the oral cavity, it should be included whenever the tongue is the primary site.     

坐骨神经压迫性损伤大鼠背根神经节NaN/SNS2钠通道表达的变化

目的:观察电压门控钠通道NaN/SNS2在大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constrictioninjupy,CCI)14天后的变化,探讨慢性神经痛的发生机制.方法:以逆转录多聚酶链反应(RTPCR)半定量分析CCI后大鼠背根神经节(Dorsal root gamglion,DRG)钠通道NaN/SNS2转录物的变化,以及全细胞膜片钳技术记录CCI对急性分离大鼠背根神经节TTX-R钠电流的影响.结果:CCI术后14天,感觉神经元特异性的TIX-R钠通道转录物NaN/SNS2下调,与对照组相比,下降了大约30%,TTX-R钠电流密度明显减弱,但不影响其激活与稳态失活.其激活曲线的V1/2分别为-26.6378mV、-26.6306mV,k为6.7864mV、6.7323mV;失活曲线的V1/2分别为-35.5844mV、-37.2188mV,k为8.2792 mV、8.4647mV.结论:钠通道NaN/SNS2与慢性神经痛后初级感觉神经元过度兴奋有关.     

多药耐药基因mdr-1在肝门部胆管癌组织中的表达及其意义

目的：检测肝门部胆管癌新鲜组织中多药耐药基因（ｍｄｒ－１）ｍＲＮＡ表达,探讨其与肝门部胆管癌临床病理间的关系。方法应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对２６例术前未作治疗的肝门部胆管癌,１２例正常胆管组织的ｍｄｒ－１ ｍＲＮＡ表达进行了检测,并与癌组织的分化程度,病理类型、部位、浸润转移作对比研究。结果：２６例肝门部胆管癌组织中ｍｄｒ－１ ｍＲＮＡ的阳性表达率为６５．４％（１７／２６）,正常胆管     

大肠癌淋巴结微转移基因检测的意义

目的：应用反转录聚合酶链反应（ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ,ＲＴ－ＰＣＲ）法检测大肠癌的淋巴结微转移。方法：１７例行根治性手术的大肠癌患者,应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测切除的２０５个淋巴结中细胞角蛋白２０（ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ２０,ＣＫ２０）ｍＲＮＡ的表达,另取４例良性胃肠道疾病患者的３１个淋巴结作为阴性对照;并采用系列稀释试验检测本法     

多形性腺瘤中BMP的表达及作用机制分析

目的：检测多形性腺瘤中ＢＭＰ蛋白的表达及ＭＢＰ２ ｍＲＮＡ的扩增情况,以探讨多形性腺瘤的病理发生机制。方法：应用ＢＭＰ单克隆抗体检测ＢＭＰ在多形性腺瘤中的表达,并进一步应用ＭＢＰ２的特异性引物和ＲＴ－ＰＣＲ的方法,扩增６例多形性腺瘤组织中ＲＮＡ。结果：６例多形性腺瘤组织中可以检测到ＢＭＰ蛋白的扩增,其中５例有ＢＭＰ２ ｍＲＮＡ扩增。结论：ＢＭＰ可能参与了多形性腺瘤的病理机制,ＢＭＰ的存在可能是上皮     

CD基因联合mIL-2/mGM-CSF基因治疗胃癌的研究

目的：观察ＣＤ基因联合ｍＩＬ－２／ｍＧＭ－ＣＳＦ基因对小鼠胃癌的治疗作用。方法：ＣＤ基因构建于逆转录病毒载体ｐＬｘＳＮ,ｍＩＬ－２和ｍＧＭ－ＣＳＦ基因构建于ｐＩＲＥＳ。先用ＣＤ／５－ＦＣ治疗胃癌细胞株,然后联合ｍＩＬ－２／ｍＧＭ－ＣＳＦ两种细胞因子基因治疗小鼠模型胃癌,以期产生显革的抗肿瘤作用。ＲＴ－ＰＣＲ检测基因表达。结果：体外结果显示２０％的转基因细胞即可杀灭７０％￣８０％的肿瘤细胞。动物实验     

用套式RT-PCR法检测肝细胞癌中丙型肝炎病毒基因型

目的　检测人肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型。方法　用ＲＴＰＣＲ法常规检测ＨＣＣ组织和部分患者血清ＨＣＶ,再以巢式ＲＴＰＣＲ法对ＨＣＶ阳性标本中５种ＨＣＶ基因型进行鉴别。对多数标本中ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ也进行了免疫组化和原位杂交检测。结果　ＨＣＣ组织中ＨＣＶ阳性率为５０％（３９／７８）,与ＨＢＶ者（６４．４％）差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）,两者重叠感染率３４％（２０／５９）。在１０例血清ＨＣＶ阴性ＨＣＣ患者中,３例ＨＣＣ冰冻组织检出ＨＣＶＲＮＡ。在ＨＣＣ组织中共检出３种ＨＣＶ基因型,其中２ａ、１ｂ、３ａ和混合型分别为１７例（４３．６％）、９例（２３．１％）、４例（１０．３％）和２例（５．１％）,各基因型间差异有极显著性意义（Ｐ＜０．０１）,但２ａ型与１ｂ型间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,２ａ型与ＨＢＶ的重叠感染明显较其他ＨＣＶ基因型者常见（Ｐ＜０．０５）。结论　２ａ型ＨＣＶ是ＨＣＣ组织中最常见的基因型并易与ＨＢＶ重叠感染率,ＨＣＣ患者血清ＨＣＶ检测不一定能准确反映ＨＣＣ组织中的ＨＣＶ感染率,其所示基因型也有所不同。     

喉鳞状细胞癌中肝细胞生长因子受体的表达及意义

目的研究肝细胞生长因子受体（c-Met）在喉鳞状细胞癌患者组织及血浆中的表达,探讨c—Met在喉鳞状细胞癌发生、发展所起的作用。方法喉鳞状细胞癌及喉乳头状瘤患者进行调查,并且设立正常对照组,应用酶联免疫吸附法检测各组血浆c—Met水平;应用半定量RT—PCR法和免疫组织化学法分别检测各组组织中c—MetmRNA及c—Met蛋白的表达。结果喉鳞状细胞癌患者血浆中的c—Met水平明显高于喉乳头状瘤患者和正常人群（均P〈0．05）。喉鳞状细胞癌组织中的c—Met水平明显高于喉乳头状瘤组织和正常组织（均P〈0．05）。结论c—Met在喉鳞状细胞癌组织及血浆中呈高表达,可能与喉鳞状细胞癌的发生、发展有关。     

RT-PCR法检测HNP1基因在气管上皮细胞转染后的表达

采用脂质体转染法将人中性粒细胞防御素（ Ｈ Ｎ Ｐ１ ）的 ｃ Ｄ Ｎ Ａ 重组真核表达质粒ｐ Ｂａｂｅ Ｎｅｏ Ｈ Ｎ Ｐ１导入无血清培养的人和兔的气管粘膜上皮细胞,利用逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ）法,在核酸水平检测 Ｈ Ｎ Ｐ１ 在气管上皮细胞的表达。结果：在人和兔的转染上皮细胞中均可检测到 Ｈ Ｎ Ｐ１ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的表达,而在未转染的上皮细胞中 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ检测结果呈阴性。这一结果与作者先前用免疫组化法在蛋白质水平上检测的结果一致,并证明ｐ Ｂａｂｅ Ｎｅｏ Ｈ Ｎ Ｐ１ 转染至气管粘膜上皮细胞后能得到有效表达。