抗肿瘤生物活性肽研究进展

 生物活性肽（bioactive peptide）是指具有特殊生理功能的肽类物质。生物活性肽的结构可以从简单的二肽到较大分子的多肽[1]。1902 年，伦敦大学医学院的 Bayliss 和 Startling从动物的胃肠中发现了一种能引起胰腺分泌活动的物质，称为分泌素，这是人类第一次发现生物活性肽类物质[2]。此后，随着现代生物技术和化学技术的应用，反相高效液相色谱、快速原子轰击质谱测定法（fast atom bombardment mass spectromentry）、二维核磁共振（two dimension nuclear magnetic resonance）等技术的发展，对生物活性肽，特别是抗肿瘤活性肽的研究取得了很大进展，本文对此予以综述，并展望抗肿瘤生物活性肽开发利用的前景。     

Renal transport of amino acids

Summary According to recent experimental data the renal transport of amino acids (AA) is characterized as follows. 1.Kinetics: Several reabsorption systems remove AA from the tubular fluid by active transport with Michaelis-Menten type kinetics. Passive diffusion does play only a relatively small role in reabsorption, but determines the pump leak steady state concentration at the end of the tubule. 2.Stereospecificity: Except for aspartate the naturally occurring L-analogs show a much larger affinity to the transport carriers than the D-isomers do. 3.Specificity: Separate transport mechanisms exist for a) the acidic AA (Glu and Asp); b) the dibasic AA (Arg, Lys, Orn); c) cystine/cysteine; d) the imino acids (Pro, OH-Pro and other N-substituted AA); e) the - and -AA (-Ala, GABA, Taurine); f) all other neutral AA. For the group (d) and maybe also for (b) and glycine additional low capacity/high affinity systems exist. 4.Localization: Except for glycine and taurine under normal conditions more than 80% of the filtered load are reabsorbed within the first third of the proximal tubule. At an elevated load the rest of the proximal tubule (including pars recta) but not the distal nephron is included into the reabsorptive process. AA are also taken up from the peritubular blood. 5.Energy sources: At least the main part of AA uptake at the brushborder membrane is dependent from a transmembranal Na⁺-gradient which in turn is established by the ATP driven Na⁺-pumps at the basolateral side of the cell (Secondary active transport or co-transport of AA). 6.Biochemistry: The biochemical nature of the AA-carriers is unknown. The recent hypothesis that a -glutamyl cycle plays a major role in this context has been disproved to great extent. 7.Peptides: Oligopeptides (Angiotensin, Glutathion) filtered at the glomerulum are hydrolyzed by brushborder peptidases within the tubule lumen. The splitting products, the free constituent amino acids, are reabsorbed subsequently by their respective transport systems.

---

Zusammenfassung Der renale Transport von Aminosäuren (AS) läßt sich heute folgendermaßen charakterisieren:1. Kinetik: AS werden durch aktive Transportmechanismen aus dem Tubulus resorbiert. Passive Diffusion spielt dabei nur insofern eine Rolle, daß sie entscheidend die Gleichgewichtskonzentration, bei der Resorption gleich Rückdiffusion ist, am Ende des proximalen Tubulus bestimmt.2. Stereospezifität: Ausgenommen die Asparaginsäure haben die natürlich vorkommenden L-AS eine höhere Affinität zum Transportsystem als die jeweiligen D-Formen.3. Spezifität: Getrennte Transportsysteme existieren für a) die sauren AS (Glu, Asp), b) die dibasischen AS (Arg, Lys, Orn), c) Cystin/Cystein, d) die sog. Iminosäuren (Pro, OH-Pro und andere, N-substituierte AS), e) die - und -AS (-Ala, GABA, Taurin), f) alle anderen neutralen AS. Für die Gruppe (d) und evtl. auch für (b) und Glyzin gibt es zusätzliche Systeme mit niedriger Kapazität, aber hoher Affinität.4. Lokalisation: Normalerweise werden mehr als 80% der filtrierten AS-Menge innerhalb des ersten Drittels des proximalen Tubulus resorbiert (Ausnahme: Glyzin, Taurin). Erhöht sich die filtrierte AS-Menge, kann der Rest des proximalen Tubulus (incl. pars recta), nicht jedoch das distale Nephron, zur Resorption herangezogen werden. Die Tubuluszelle nimmt AS auch aus dem peritubulären Kapillarblut auf.5. Energiebereitstellung: Der Bergauf-Transport der AS in die Tubuluszelle wird durch das einströmende Na⁺ getrieben (Co-Transport), dessen Gradient wiederum durch die ATP-getriebenen, peritubulären Na⁺-Pumpen aufrechterhalten wird (Sekundär-aktiver Transport).6. Biochemie: Die chemische Natur der AS-Transportsysteme ist unbekannt. Die Hypothese, daß ein sog. -Glutamyl-Zyklus dabei eine wesentliche Rolle spielt, ist nicht mehr haltbar.7. Peptide: Oligopeptide (Angiotensin, Glutathion u.a.) werden nach der glomerulären Filtration innerhalb des Tubuluslumens durch Bürstensaum-Peptidasen hydrolysiert. Die dabei freigesetzten AS werden gleich anschließend durch ihre jeweiligen Transportsysteme resorbiert.

     

组织多肽抗原在卵巢癌诊断及监测中的应用

目的评价组织多肽抗原（ＴＰＡ）在卵巢癌诊断和监测中的临床价值。方法应用放射免疫方法测定了２４例正常妇女、２７例妇科良性疾患及６０例卵巢癌患者的血清ＴＰＡ及ＣＡ１２５值并进行比较分析。结果ＴＰＡ在卵巢上皮性癌患者中的异常检出率为８２％,ＣＡ１２５为７０％,二者总的异常检出率为９２％。在绝大多数正常妇女和卵巢良性肿瘤患者中,ＣＡ１２５和ＴＰＡ在正常范围。作为卵巢癌相关标志物,ＴＰＡ与ＣＡ１２５具有相似敏感性。１９例动态观察结果显示,ＴＰＡ和ＣＡ１２５二者与病情转归是一致的。结论ＴＰＡ和ＣＡ１２５联合应用对卵巢癌的鉴别诊断及提高总的异常检出率具有价值。     

胎盘多肽在晚期恶性肿瘤化疗中的作用

[目的]探讨胎盘多肽注射液应用于晚期恶性肿瘤化疗的临床效果及对患者免疫功能的影响.[方法]将本院肿瘤内科收治的90例不能接受手术治疗的晚期恶性肿瘤患者分为观察组和对照组两组,每组各45例,两组患者均给予常规化疗方案,观察组加用胎盘多肽注射液治疗,21 d为一个周期,连续用药治疗4个周期,观察两组患者的临床疗效及免疫学指标差异.[结果]观察组的缓解率为40%(18/45)显著高于对照组的20%(9/45),且两组相比较差异有显著性(P<0.05),两组患者的有效率比较差异无显著性(P>0.05).化疗前两组患者的KPS评分相比较差异无显著性(P>0.05),治疗后两组患者的KPS评分均较治疗前显著提高(P<0.05),观察组较对照组提高更加显著(P<0.05).化疗前两组患者的T淋巴细胞亚群值比较差异无显著性(P>0.05),治疗后对照组的CD4+细胞水平、CD4+/CD8+显著低于观察组(P<0.05).化疗前两组患者的体液免疫指标比较差异无显著性(P>0.05),治疗后对照组的IgG、IgM显著低于观察组(P<0.05).观察组的恶心、呕吐(60%)、口腔黏膜炎(11.11%)、外周神经毒性(13.33%)发生率显著低于对照组,且差异具有显著性(P<0.05).[结论]胎盘多肽注射液应用于晚期恶性肿瘤化疗能够改善患者近期疗效、提高患者体能状况、改善患者的免疫水平,降低不良反应发生率.     

结缔组织生长因子在胃癌组织中的表达及其与预后的关系

目的：检测结缔组织生长因子（CTGF）在胃癌组织中的表达并探讨CTGF表达在患者预后判断中的意义。方法：应用免疫组织化学染色方法检测108例胃癌组织中CTGF的表达情况,分析CTGF表达与患者临床病理特征、术后生存时间之间的关系。结果：CTGF高表达常见于发生淋巴结转移的病例（P=0.038）,CTGF表达水平低的患者术后五年生存率（48.4%）显著高于表达水平高的患者（23.9%,双侧log-rank检验,P=0.003 5）。Cox回归分析证明患者TNM分期（P〈0.001）、肿瘤分化（P=0.027）和CTGF表达水平（P=0.016）是胃癌的独立预后因子。结论：胃癌组织中CTGF高表达与发生淋巴结转移和患者预后不良显著相关。     

血清脂联素和抵抗素与初诊2型糖尿病的相关性研究

目的：探讨脂联素和抵抗素与2型糖尿病（T2DM）的关系。方法：对39例初诊T2DM患者做研究对象，选37例健康人做对照。采用酶联免疫测定法测定空腹血清脂联素和抵抗素浓度，并测定各组的空腹血糖、胰岛素、尿酸和血脂水平等；用HOMA—IR评价胰岛素抵抗，分析各指标间的相关性。结果：DM组血清脂联素浓度（3．66±0．91）ng／ml低于正常对照组（5．26±0．78）ng／ml，差异有显著性（P〈0．01）。DM组血清抵抗素浓度（6．10±0．43）μg／ml与正常对照组（6．09±0．47）μg／ml差异无显著性。在DM组，采用相关分析发现，血清脂联素浓度与患者收缩压、舒张压、年龄、病程、空腹胰岛素、体重指数、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、HOMAIR呈负相关，与脂蛋白A1正相关；血清抵抗素与年龄、病程、收缩压、舒张压、甘油三酯呈正相关；与脂蛋白A1呈负相关，与体重指数、HOMAIR等不相关。结论：脂联素水平的下降与DM发病有关，而抵抗素与之无关。     

循环激素、细胞阳离子转运和环核苷酸在原发性高血压左室肥厚中的作用

目的 从整体水平探讨血流动力学、多种循环激素、细胞阳离子转运和环核苷酸在高血压左室肥厚（LVH）发生中的作用。方法 采用30例正常人和45例高血压非LVH病人双重同期对照。观察45例高血压LVH病人（向心型12型、离心型33例）的血压,外周阻力（TPR）,血浆5种激素,淋巴细胞离子泵、阳离子和环核苷酸变化;并对左心室重量指数（LVMI）与22个相关预选因子进行逐步回归分析。结果 （1）LVH病人收缩压和平均动态压、血浆去甲肾上腺素（NE）、内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、内源性洋地黄物质（EDLS）和心钠素（ANP）水平增高,细胞Na^ 、Ca^2 、cAMP含量和cAMP/cGMP比值升高,细胞钠泵、钙泵活性、K^ 和Mg^2 含量降低。（2）5种激素分别与离子泵、Na^ 、Ca^2 和环核苷酸相关。（3）LVMI与NE、ET、AngⅡ和EDLS,钙泵、Na^ 、cAMP和cAMP/cGMP比值相关。（4）LVMI与NE、ET、钙泵、Mg^2 和cAMP之间有独立的相关关系。（5）向心型LVH病人TPR、AngⅡ高于离心型LVH病人,而K^ 低于离心型LVH病人。结论 血流动力学、循环激素、细胞离子转运和环核苷酸多个环节改变及其相互作用参与高血压LVH的发病过程,其中循环NE、ET、细胞钙泵、Mg^2 和cAMP可能起重要作用。TRP、AngⅡ和细胞K^ 可能与向心型LVH形成有关。     

小分子多肽与人类免疫缺陷病毒感染的关系

目的 探讨人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染者体内可能存在的保护性中和抗体。方法 方法 应用ELISA等方法检测正常对照人群，HIV-1感染无症状组，长期生存组和艾滋病患者体内小分子多肽抗体（抗-R7V）分布状况。结果 抗R7V在无症状组和长期存活组中检出率较高，而在进展者和艾滋病患者中存在较低，并发现抗-R7V能中和HIVRNA。结论 抗-R7V的存在与病情进展有密切关系。能够使HIV感染者长期处于无进展状态，延缓或者阻止感染者发展为艾滋病。     

重组肝细胞再生增强因子丹参及苦参对大鼠纤维细胞的作用

目的观察重组肝再生增强因子(rALR)、丹参及苦参对大鼠纤维细胞增殖及细胞外基质(ECM)合成的影响.方法利用 DNA 重组技术构建大鼠肝再生增强因子原核表达质粒 PGEX2T-alr,转导 XL-1,IPTG 诱导肝再生增强因子蛋白表达,用 SDS/PAGE 纯化获得 rALR.利用胶原酶灌注梯密度离心分离肝星状细胞,用有限稀释法建立大鼠肝星状细胞株IG12.于体外观察了 rALR、丹参及苦参对 IG12及大鼠成纤维细胞株 WFB 增殖及 ECM 合成的影响.结果用酸性磷酸酶法测定细胞增殖表明 rALR、丹参及苦参均可显著抑制 IG12的增殖(培养48h,GST 组A:2.207±0.234,苦参组A:1.797±0.158,丹参组A:1.808±0.176,rALR组A:1.779±0.294),丹参及苦参可显著抑制 WFB 的增殖而rALR 对 WFB 的增殖无明显影响(培养72h,GST 组 A:0.940±0.030,苦参组 A:0.797±0.036,丹参组 A:0.821±0.052,rALR 组 A:0.897±0.050).rALR、丹参及苦参可不同程度地抑制 IG12、WFB 合成细胞外基质,但以 rALR 的抑制作用较好.结论原核细胞产生的 rALR 具有生物学活性,rALR、丹参及苦参对 IG12及 WFB 的增殖及 ECM 合成具有不同程度的抑制作用,最佳的联合用药方式有待进一步研究.