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61.
激素性股骨头坏死机制的实验研究   总被引:6,自引:1,他引:6  
目的 探讨激素性股骨头坏死的发病机制。方法 激素对体外成骨细胞生长影响的细胞实验和激素性股骨头坏死的动物实验。结果 细胞培养显示,地塞米松抑制成骨细胞生长,使骨髓单个核4细胞向脂肪样细胞分化;动物实验显示,大剂量激素能造成股骨头坏死,表现为骨细胞死亡,骨髓内大量脂肪组织增生,软骨下区血管减少。结论 激素性股骨头坏死的发病机制可能是一方面激素直接抑制成骨细胞生长,造成成骨障碍;另一方面引起骨髓脂肪组织增生,髓腔内压增高,造成股骨头微循环紊乱,两者共同引起股骨头坏死。  相似文献   
62.
淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞的影响   总被引:40,自引:0,他引:40       下载免费PDF全文
目的:观察淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞的作用。方法:取新生1-3d SD大鼠头盖骨用酶消化法分离成骨细胞。第3代细胞经MTT法、茜素红染色法观察淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞增殖、矿化结节形成的影响。结果:淫羊藿总黄酮1-10μg/ml浓度具有显著的促进成骨细胞增殖及提高矿化结节形成数量的作用。结论:淫羊藿总黄酮具有促进体外成骨细胞增殖及分化成熟的作用。  相似文献   
63.
目的 比较改良贴壁组织块法与改良Ⅰ型胶原酶消法对SD大鼠颞下颌关节髁突软骨下骨成骨细胞的增殖效果.方法 取10只出生1 -3dSD乳鼠颞下颌关节髁突软骨下骨,将骨片平分成2份,分别采用改良贴壁组织块法和改良Ⅰ型胶原酶消法培养颞下颌关节髁突成骨细胞,并标记为Ⅰ组和Ⅱ组,通过细胞形态学观察、HE染色、ALP染色鉴定成骨细胞.取第4代成骨细胞进行细胞计数、MTT生长曲线及流式细胞仪周期分析,比较2种原代培养方法对成骨细胞增殖能力的异同.结果 (1)Ⅰ组和Ⅱ组培养的细胞经鉴定均为成骨细胞; (2) Ⅱ组成骨细胞总量约为Ⅰ组细胞总量的1.5倍; (3) Ⅱ组成骨细胞MTT生长曲线较Ⅰ组细胞提前2d进入对数生长期及达到生长高峰; (4)2组细胞在达到第4代时,细胞周期含量差异无统计学意义(P>0.05).结论 改良贴壁组织块法和改良Ⅰ型胶原酶消化法均适用于颞下颌关节软骨下骨成骨细胞的培养,但改良Ⅰ型胶原酶消化法可以更快速有效地获得大量成骨细胞.  相似文献   
64.
Calcium Mobilization is Required for Spreading in Human Osteoblasts   总被引:2,自引:0,他引:2  
Adhesion-induced changes in intracellular calcium concentration ([Ca2+]i) were measured in populations of human osteoblasts spreading on bone matrix proteins. In cells spreading on collagen type I, fibronectin, or laminin, average values for [Ca2+]i were found to increase approximately 2× over baseline and then decline. The speed with which [Ca2+]i increased and declined was dependent upon the matrix protein on which the cells were plated but was generally complete within 1 hour from the time of plating. Calcium mobilization was found to be due to influx of calcium across the osteoblast plasma membrane and was integrin dependent. Carboxyamido triazole (CAI), a specific inhibitor of nonvoltage-dependent calcium channels, or BAPTA-AM, a chelator of intracellular calcium, inhibited osteoblast adhesion and spreading on collagen type I, fibronectin and laminin in a dose-dependent manner. In conclusion, these results demonstrate that calcium mobilization is induced upon integrin-ligand contact and that calcium influx is required for cell adhesion and spreading. Received: 10 September 1999 / Accepted: 18 January 2000  相似文献   
65.
脉冲电磁场促进人骨髓间充质干细胞成骨的研究   总被引:12,自引:2,他引:12  
目的 :观察脉冲电磁场 (PEMFs)对人骨髓间充质干细胞 (hMSCs)成骨能力的影响。方法 :hMSCs受频率 12Hz、场强 1.1mT的PEMFs刺激 8h/d ,检测细胞增殖、细胞周期 ,观察细胞超微结构、骨钙素、Ⅰ型胶原免疫组化染色 ,碱性磷酸酶 (ALP)活性、核固红钙染色。结果 :脉冲电磁场作用后的细胞增殖能力提高 ,细胞形态发生变化 ,透射电镜观察提示细胞成熟 ,核固红钙染色、骨钙素、Ⅰ型胶原免疫组化染色均阳性 ,ALP活性增高。结论 :hMSCs经合理的PEMFs体外刺激后 ,细胞增殖加速 ,符合成骨细胞的形态特征和生物学特性。  相似文献   
66.
目的探索负载BMP-2掺锶磷酸钙复合材料对成骨细胞增殖及功能的影响。方法获取SD大鼠成骨细胞,随机分为空白对照组(Con组)、磷酸钙组(CPC组)和复合材料组(BSCPC组);培养基中分别添加安慰剂、磷酸钙和负载BMP-2掺锶磷酸钙共培养一段时间,通过CCK-8法检测成骨细胞的增殖情况,碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)及茜素红染色观察细胞的功能状态,蛋白电泳观察骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-KB,RANK)及核因子κB受体活化因子配体(ligand of receptor activator of nuclear factor-κB,RANKL)蛋白的表达情况。结果共培养1、3、5和7 d,和Con组比较,CPC组和BSCPC组的成骨细胞数目明显增加(P0.05),且以BSCPC组成骨细胞数目最多(P0.05);共培养14 d及21 d,和Con组比较,CPC组和BSCPC组的成骨细胞的矿化能力及ALP活性明显增加(P0.05),且以BSCPC组细胞钙化能力最强及ALP活性最高(P0.05);共培养7 d,和Con组比较,CPC组和BSCPC组的成骨细胞的OPG表达明显增加,而RANK及RANKL蛋白表达明显降低(P0.05),且以BSCPC组的成骨细胞蛋白OPG、RANK及RANKL蛋白表达量改善最为显著(P0.05)。结论负载BMP-2掺锶磷酸钙复合材料促进成骨细胞增殖分化和改善细胞活性和功能。  相似文献   
67.
Zhou HD  Huang QX  Xie H  Liu M  Guo LJ  Yuan LQ  Sui GL  Zhai MX  Peng YQ  Gu W  Ni JD  Zhang XS  Liao EY 《中华医学杂志》2005,85(19):1310-1314
目的探讨晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病(SEDT PA)患者WISP3基因突变所造成的软骨及周围骨组织病变和可能的发病机制。方法从SEDT PA患者及正常同龄个体的股骨头松质骨分离成骨细胞进行体外培养,对培养的成骨细胞进行细胞增殖、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、骨钙素、护骨素测定,利用cDNA表达芯片进行基因表达谱分析,并用免疫组织化学方法对基因芯片进行验证。比较SEDT PA患者及正常对照的成骨细胞在细胞增殖、分化及基因表达谱等方面的改变。同时采用Northern杂交检测成骨细胞的WISP3表达情况。结果与正常人成骨细胞相比,SEDT PA患者成骨细胞的增殖能力较强(0.86±0.04vs0.71±0.10),氚胸腺嘧啶(3H TDR)的掺入量明显较高(1363cpm±350cpmvs867cpm±128cpm)。SEDT PA患者的成骨细胞骨钙素的表达水平明显低于正常同龄人(3.62ng/μg蛋白±0.3ng/μg蛋白vs0.85ng/μg蛋白±0.06ng/μg蛋白),护骨素的表达明显低于正常同龄人(9.43pg/μg蛋白±0.41pg/μg蛋白vs1.98pg/μg蛋白±0.03pg/μg蛋白),而BAP的表达未发生明显改变;WISP3基因的表达极低。cDNA表达芯片分析结果发现,与正常对照比较,SEDT PA患者的成骨细胞有22个基因表达明显上调,16个基因表达明显下调,这些基因包括有成骨细胞的标记分子、细胞外基  相似文献   
68.
胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对成骨细胞的成骨影响   总被引:5,自引:1,他引:5  
目的:探讨不同浓度IGF-1对兔成骨细胞的成骨影响。方法:采用组织块细胞培养技术获得兔成骨细胞,第2代成骨细胞分别在含0.1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml,20ng/mlIGF-1的DMEM中培养,24,36h后行MTT法检测细胞增殖情况,72,108h收集培养上清进行骨钙素放射免疫法(RI)测定。结果:IGF-1与成骨细胞培养24,36h,经MTT法检测,不同浓度IGF-1与对照组比较,有显著性差异(P<0.001);IGF-1浓度为0.1、1、10ng/ml,各组之间相比存在显著性差异(P<0.05);IGF-1与成骨细胞培养72.108h,经RI检测,不同浓度IGF-1对成骨细胞合成骨钙素与对照组比较无显著性差异(P>0.05):结论:IGF-1对成骨细胞有明显促进增殖作用,在0.1-10ng/ml范围,存在浓度依赖性,未发现IGF-1对成骨细胞合成骨钙素有影响。  相似文献   
69.
目的:通过构建乳鼠颅盖骨成骨细胞分离培养与鉴定方法,研究胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)及IGF-1联合重组人甲状旁腺激素1-34(recombinant human parathyroid hormone 1-34,rhPTH1-34)对成骨细胞增殖及I型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法培养乳鼠成骨细胞,并观察其形态及功能,以原代培养乳鼠成骨细胞为实验模型,分空白组、PTH组、IGF-1组及不同浓度IGF-1作用的PTH介导的成骨细胞组(0、10、50、100 ng/L)。通过不同剂量的胰岛素样生长因子-1(0、10、50、100 ng/L)联合10-9 mol/L重组人甲状旁腺素刺激体外培养的成骨细胞,用噻唑蓝( MTT)法检测细胞的增殖能力,RT-PCR法检测成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达。结果 PTH和IGF-1均可促进成骨细胞增殖;IGF-1联合PTH可以促进成骨细胞增殖,且具有剂量依赖性。 PTH联合IGF-1使成骨细胞增殖能力增强、I型胶原蛋白mRNA表达增强。 IGF-1可以促进成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达,且具有剂量依赖性。 IGF-1可以促进成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达,且具有剂量依赖性。结论 PTH与IGF-1均可刺激成骨细胞增殖和分化,IGF-1可促进PTH对成骨细胞的分化、增殖。两者合用其作用增强,有协同促进作用。  相似文献   
70.
Voltage-sensitive calcium channels (VSCC) open in response to external stimuli, including calcitropic hormones, that alter plasma membrane calcium (Ca2+) permeability. Ca2+ that enters the cell through these channels serves a second messenger function, eliciting cellular responses that include secretion and changes in gene expression. In osteoblasts, VSCCs serve as key regulators of Ca2+ permeability and are a major class of calcitropic hormone-sensitive Ca2+ channels present in the plasma membrane. The members of the VSCC family exist as a complex of polypeptide subunits that are comprised of a pore-forming 1 subunit, an intracellular subunit, a dimer of disulfide-linked 2 and subunits, and in some tissues, a subunit. Previous studies in our laboratory have shown that the major functional 1 subunit present in osteoblasts is the 1C (CaV1.2). To determine the complement of auxiliary subunits present in rodent osteoblastic cells, we employed RT-PCR using a battery of subunit specific primers and appropriate tissue controls. Immunohistochemistry also was performed, using available subunit specific antibodies, to measure protein expression and localization. Cell types examined included MC3T3-E1 at various stages of differentiation, ROS 17/2.8 osteosarcoma, and primary cultures of rat calvarial osteoblasts. The results indicate that all cells expressed multiple subunit classes and 2 dimers, but no subunits, regardless of differentiation state. We propose a structure for the functional osteoblast VSCC that consists of 1, , 2 subunits and is devoid of a subunit.  相似文献   
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