上腭黏膜长期不愈溃疡1例

1临床资料邹XX,男性,43岁,2004年9月发现左腭咽部溃疡伴疼痛,渐增大,疼痛加重,于外院就诊,取活检,病理示“黏膜肉芽肿性炎”。经一般抗炎治疗无效,症状进行性加重,2004年12月来我院就诊。患者平素体健,否认系统性疾病及传染病史。检查:患者面部对称,开口度一指半,口内25—28缺失,上腭见大面积溃疡,前起上颌硬区,后达软腭后缘,外侧越过左牙槽嵴达颊黏膜咬合线处,内侧越过中线约1 cm,右侧翼下颌皱襞处见散在溃疡,溃疡暗红色,无分泌物。右侧颌下区扪及数枚直径约0.5 cm淋巴结,质软,可活动,无压痛。实验室及特殊检查:白细胞4.1×109个/L,中性…     

肺结核患者外周血腺苷脱氨酶活性与T淋巴细胞亚群定量检测的相关性及临床意义

目的探讨肺结核患者外周血淋巴细胞内腺苷脱氨酶(ADA)活性和T淋巴细胞亚群定量检测的关系及临床意义。方法应用全自动生化分析仪测定肺结核患者血清ADA的活性和用流式细胞仪(FCM)测定外周血中的T淋巴细胞亚群。结果肺结核患者外周血ADA活性显著高于正常人组,在化疗2个月及6个月后,其活性显著降低(P0.01),外周血CD4、CD8及CD4/CD8比值差异有统计学意义(P0.01),ADA与CD4/CD8之间存在相关性。结论肺结核患者淋巴细胞内ADA活性升高与T淋巴细胞亚群比例失调有关,检测患者外周血ADA、T淋巴细胞亚群的变化有助于临床病情监控、疗效判定及预后判断。     

耐药结核分枝杆菌基因突变分析

目的 探讨结核分枝杆菌耐药表型与基因突变位点之间的相互关系.方法 采用序列特异性引物分别扩增92株结核分枝杆菌利福平耐药基因rpoB,异烟肼耐药基因katG、inhA、ahpC,链霉素耐药基因rrs、rpsL,乙胺丁醇耐药基因embB及喹诺酮耐药基因gyrA,SSCP筛选出突变序列,DNA测序分析突变性质.结果 59株利福平耐药株rpoB基因突变检出率94.9%(56/59),以Ser450Trp突变最多;90株异烟肼耐药株中,katG基因突变检出率38.9%(35/90),以Ser315Thr最多,3株检出inhA基因突变,ahpC基因无突变检出;34株喹诺酮耐药株中gyrA基因突变检出率82.4%(28/34),主要为Asp94Gly,其次为Ala90Val;31株链霉素耐药株中,15株检出rrs突变,最常见为A514C和A1041G,10株发生rpsL Lys88Arg突变,总的链霉素基因突变检出率为77.4%(24/31);31株乙胺丁醇耐药株中embB 基因突变检出率19.4%(6/31),主要为Met306Val.结论 耐药结核分枝杆菌耐药情况较为严重,以DNA测序为基础的基因突变分析能快速有效地检测结核分枝杆菌的rpoB、katG、gyrA、rrs、rpsL、embB 等耐药分子标识,显示了西安地区耐药性结核分枝杆菌的突变特点,为结核病的临床诊断和合理用药提供了实验依据.     

支气管肺泡灌洗液的结核分枝杆菌快速培养对疑似肺结核的诊断价值

目的：评价支气管肺泡灌洗液的结核分枝杆菌快速培养在疑似肺结核患者中的诊断价值。方法：选不典型肺结核患者153例,行电子支气管镜检查。刷检涂片作抗酸染色镜检;支气管肺泡灌洗,支气管肺泡灌洗液（BALF）作分枝杆菌生长指示管（MGIT）快速培养福建卫生职业技术学院附属分枝杆菌。结果：BALF快速培养结核分枝杆菌、经支气管镜刷检涂片镜检分枝杆菌的的灵敏度、特异度分别为94．12％（32／34）、95．80oA（114／119）和52．94％（18／34）、96．64％（115／119）。前者灵敏度高于后者,经统计学检验显示有显著差异（P〈0．01）。结论：对于临床不典型的肺结核,经气管镜行支气管肺泡灌洗液的结核分枝杆菌快速培养,灵敏度高,快速及时,具有较高的诊断价值。分枝杆菌培养及鉴定有助于提高临床肺结核的确诊率。     

结核杆菌耐药性调查与基因突变分析

目的了解结核分支杆菌耐药性与基因突变情况,分析耐药表型与基因突变的相关性。方法从临床标本中分离培养、鉴定结核分支杆菌;应用药敏试验、单链探针反向杂交试验技术(LiPA)和基因测序分析结核分支杆菌耐药性与基因突变情况。结果50株结核分支杆菌中,12株耐异烟肼(INH),7株耐利福平(RFP),15株耐链霉素(SM),2株耐乙胺丁醇(EMB)。LiPA检测耐RFP菌株,4株rpoB基因531位TCG→TTG突变;耐INH菌株中5株KatG基因315位AGC→ACC突变;耐SM菌株中6株、SM敏感株1株rpsl基因43位AAG→AGG突变,1株耐SM菌株rpsl基因88位AAG→AGG突变;rrs基因未检测到突变;1株耐EMB菌株与1株EMB敏感株的embB基因306位发生ATG→GTG突变。结论本市结核分支杆菌的耐药性增加的趋势显著,加强监测与综合干预非常必要。     

结核分枝杆菌临床分离株药敏结果与耐药程度的关联分析

目的 探讨结核分枝杆菌临床分离株对12种抗结核药物的MIC值及其药敏检测结果 与耐药程度的关联规律,从而为临床制定治疗方案提供借鉴依据.方法 采用液体培养基联合MTT技术进行抗结核药物的MIC检测.对上海市肺科医院2009年1-6月间的163株结核分枝杆菌临床分离株进行RFP、INH、SM、EMB、OFLX、LVFX、MOX、AMK、CPM、PTA、CLA和PAIN的MIC检测和Bactec MGIT快速培养仪药敏检测,并进行MIC与耐药程度的关联性分析.结果 67%(42/62)的SM耐药株MIC≥16 μg/ml,63%(51/81)的INH耐药株MIC≥8 μg/ml,77%(50/65)的RFP耐药株MIC≥8 μg/ml,20%(12/60)的EMB耐药株MIC≥4 μg/ml;43%(25/58)的OFLX耐药株MIC≥8 μg/ml;41%(15/37)的AMK耐药菌株MIC≥16 μg/ml,41%(12/29)的CPM耐药菌株MIC≥4 μg/ml.OFLX耐药株的3个氟喹诺酮类药物的MIC(OFLX、LVFX和MOX的MIC分别为2～128、1～32和0.0625～1 μg/ml)差异有统计学意义(F=16.874,P<0.01);SM、INH、RFP、EMB、OFLX、AMK和CPM在任6种及7种药物同时耐药株中的MIC值(分别为0.5～128、2～64、0.25～128、1～32、1～64、0.5～128和1～128μg/ml)明显高于任1种及2种药物耐药菌株的MIC值(MIC值分别为0.25～128、0.0625～64、0.25～32、0.25～2、0.125～2、0.5～4和1～4 μg/ml,F值分别为20.066、40.499、47.197、70.373、91.432、41.840和21.547,P均<0.05);SM、INH、RFP、EMB在4种药物同时耐药菌株中MIC值(分别为1～128、2～64、0.25～128和1～32μg/ml)显著高于任1种及2种药物耐药株(MIC值分别为0.25～128、0.0625～64、0.25～64和0.25～2 μg/ml,F值分别为26.242、23.563、31.541和64.469,P均<0.05);RFP在MDR酶株的MIC值(2～64 μg/ml)显著高于非MDR的耐药菌株的MIC值(0.25 μg/ml,F=5.613,P<0.05).结论 本研究揭示了常用的12种抗结核药物的耐药程度与常规药敏检测结果 之间的关联规律,为临床医生根据常规药敏结果 制定更加有效的抗结核治疗方案提供重要的借鉴.     

反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌抑制作用的研究

目的 研究反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌牛长的抑制作用,探讨其潜在的抗结核作用.方法 在7H9培养基中接种5×10~5 CFU耻垢分枝杆菌MC~2155,同时加入20μmol/L针对结核分枝杆菌中必须基因Rv3806c在耻垢分枝杆菌中的同源基因MSMEG_6401的反义寡脱氧核苷酸.以耻垢分枝杆菌MC~2155单独培养作为对照.观察和绘制细菌生长曲线;测定细胞膜MSMEG_6401编码的磷酸核糖转移酶的生物活性;应用高压气相色谱测定耻垢分枝杆菌细胞壁中糖的含量.结果 anti-ODNs作用6 d后的耻垢分枝杆菌平均吸光度值(A值)为0.84±0.09;而野生型耻垢分枝杆菌平均,4值为1.27±0.01,试验组耻垢分枝杆菌较对照组增殖速度平均降低0.45(P<0.01);anti-ODNs作用6 d后耻垢分枝杆菌平均CFU计数的对数值为8.27±0.19;而野生型耻垢分枝杆菌平均CFU对数值为8.89±0.14,试验组耻垢分枝杆菌较对照组增殖速度平均降低0.62个log单位;在应用等量的膜蛋白的情况下,实验组磷酸核糖转移酶的生物活性降低约40%;试验组和对照组细菌反映细胞壁糖含量的指标甘露糖-半乳糖/阿拉伯糖比值没有明显差异(2组实验组分别为0.63和0.69;2组对照组分别为0.67和0.69).结论 针对MSMEG_6401的反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌的增殖有一定程度的抑制作用,推测反义寡脱氧核苷酸技术有一定抗结核价值;结核分枝杆菌的Rv3806c基因或是其编码产物可能是一个好的抗结核药物作用靶位.     

噬菌体生物扩增法检测涂阴肺结核患者痰标本的临床应用价值

目的探讨噬菌体生物扩增法对涂阴肺结核临床诊断的应用价值。方法对110例涂阴肺结核和20例非结核性其他肺部疾病患者的痰标本进行噬菌体生物扩增法检测,并同时进行分枝杆菌罗氏培养。结果110例涂阴痰标本中46例噬菌体生物扩增法阳性（41．82％）;27例罗氏培养阳性（24．55％）。结论噬菌体生物扩增法检测涂阴痰标本中结核分枝杆菌只需2天时间,操作简便、灵敏度高、特异性强,可作为诊断涂阴肺结核的一种检测方法。     

DNA芯片快速检测结核分枝杆菌利福平耐药rpoB基因突变

目的建立快速检测结核分枝杆菌利福平（RFP）耐药rpoB基因突变的DNA芯片。方法从34株临床痰样本中提取结核分枝杆菌的基因组DNA，采用聚合酶链反应（PCR）扩增含有rpoB基因突变位点的特异DNA片段，荧光标记后与芯片上含有特异突变位点的寡核苷酸探针进行杂交，同时与DNA测序法比较。结果用DNA芯片检测出19株耐药株和15株敏感株，且结果与DNA测序相同，准确率可达88．2％，敏感性为78．9％，特异性为100．0％。结论DNA芯片快速检测结核分枝杆菌对RFP的耐药rpoB基因突变是一种操作简便、准确性、敏感性和特异性较高，且易于开展的方法。     

PCR—SSCP快速检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因的研究

目的探讨PCR—SSCP技术检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因作为新的分子药敏试验方法的价值。方法应用PCR—SSCP技术检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因核心区的突变，同时对片段长度为215bp的PCR扩增产物进行测序分析。受试菌为23株利福平敏感结核分枝杆菌以72．35株利福平抗性结核分枝杆菌。结果23株利福平敏感结核分枝杆菌分别用PCR—SSCP和PCR扩增片段测序均没有检测到巾0B碱基突变。而在35株利福平抗性菌株中，PCR—SSCP检测到31株与H37Rv标准株不同的带谱，PCR—SSCP检测基因突变的敏感度和特异度分别为88．6％（31／35）和100％（23／23）。对35株利福平抗性菌株PCR扩增产物进行测序分析，在其中32株中检出了基因突变。测序分析检测基因突变的敏感度和特异度分别为91．4％（32／35）和100％（23／23）。卡方检验，PCR—SSCP和PCR扩增片段测序两种方法的敏感度之间没有显著性差异（P〉0．05）。若以DNA测序为标准，则PCR—SSCP检测基因突变的准确度、敏感度和特异度分别为93．1％（54／58），96．9％（31／32）和100％（23／23）。结论PCR—SSCP检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变可用于利福平药物敏感度的快速测定。