快速检测耐异烟肼结核分支杆菌方法的研究

目的 应用多重聚合酶链反应-单链构象多态性分析（multiple—Polymerase Chain Reaction—Single Strand Conformation Polymorphism,multi—PCR—SSCP）方法,快速、特异地同时检出耐异烟肼（isoniazid,INH）结核分支杆菌aphC启动子、inhA、katG基因的突变情况,并与直接测序（derictsequencing,DS）结果相比较,参照药敏试验,探讨该方法的可行性。 方法 根据结核分支杆菌的aphC启动子序列、inhA序列、katG序列,分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物,采用multi—PCR-SSCP技术,同时检测对结核分支杆菌耐INH起作用的这三个基因的突变情况;同时进行耐药株的测序分析。 结果 对H37Rv标准株、临床分离INH敏感株（23株）及INH耐药株（35株）进行multi—PCR—SSCP分析,突变检出率82．9％（29／35）;耐药株测序分析突变检出率为85．7（30／35）。两种方法的符合率为97．1％E（29＋5／）／35]。 结论 耐药基因检测指导治疗是一种新探索,multi—PCR—SSCP方法敏感、特异,能同时快速有效地检测结核分支杆菌aphC启动子、inhA、katG三个INH耐药基因的突变,提高检验效率,有望成为临床指导用药的好方法。     

肺癌等不同疾病出现阴虚综合征时细胞因子基因表达谱的实验研究

目的研究肺癌、淋巴瘤、肺结核出现阴虚综合征时是否具有相同或相似的细胞因子基因表达变化规律,验证阴虚综合征的发病学机理是由于白细胞介素1（101）、肿瘤坏死因子（TNF）等炎性细胞因子的基因表达增强、生物学活性相对升高引起细胞因子网络紊乱的理论研究结论。方法以外周血单个核细胞为材料,使用细胞因子基因芯片检测阴虚综合征细胞因子基因表达谱的改变。结果肺癌阴虚综合征时白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素8（IL-8）和肿瘤坏死因子a（TNFa）的基因表达水平上调;淋巴瘤阴虚综合征时IL-8的基因表达水平上调;肺结核阴虚综合征时IL-1β、白细胞介素18（IL-18）和TNFa的基因表达水平上调。结论肺癌、淋巴瘤和肺结核伴有阴虚综合征时炎性细胞因子的基因表达水平上调,从细胞因子网络的角度,初步验证了阴虚综合征的发病学机理的理论研究结论。     

Precision Nutrition Model Predicts Glucose Control of Overweight Females Following the Consumption of Potatoes High in Resistant Starch

Individual glycemic responses following dietary intake result from complex physiological processes, and can be influenced by physical properties of foods, such as increased resistant starch (RS) from starch retrogradation. Predictive equations are needed to provide personalized dietary recommendations to reduce chronic disease development. Therefore, a precision nutrition model predicting the postprandial glucose response (PPGR) in overweight women following the consumption of potatoes was formulated. Thirty overweight women participated in this randomized crossover trial. Participants consumed 250 g of hot (9.2 g RS) or cold (13.7 g RS) potatoes on two separate occasions. Baseline characteristics included demographics, 10-day dietary records, body composition, and the relative abundance (RA) and α-diversity of gut microbiota. Elastic net regression using 5-fold cross-validation predicted PPGR after potato intake. Most participants (70%) had a favorable PPGR to the cold potato. The model explained 32.2% of the variance in PPGR with the equation: 547.65 × (0 [if cold, high-RS potato], ×1, if hot, low-RS potato]) + (BMI [kg/m²] × 40.66)—(insoluble fiber [g] × 49.35) + (Bacteroides [RA] × 8.69)—(Faecalibacterium [RA] × 73.49)—(Parabacteroides [RA] × 42.08) + (α-diversity × 110.87) + 292.52. This model improves the understanding of baseline characteristics that explain interpersonal variation in PPGR following potato intake and offers a tool to optimize dietary recommendations for a commonly consumed food.     

陈旧性肺结核复燃的CT征象分析

目的 探讨陈旧性肺结核复燃患者的CT表现,为临床早期诊断提供依据.方法 收集广州市胸科医院2009年4月至2019年12月经临床及实验室确诊的陈旧性肺结核患者100例,其中复燃患者40例为复燃组,无复燃患者60例为无复燃组,对比分析两组患者的CT特征,总结陈旧性肺结核复燃患者的CT征象.结果 两组患者肺内病灶累及少于3...     

贝达喹啉治疗药物浓度监测方法的建立与应用

目的：建立贝达喹啉人体血药浓度的测定方法并应用。方法：血浆样本以舍曲林为内标经甲醇沉淀蛋白后,采用C₁₈色谱柱甲醇^-10 mmol·L^-1甲酸铵溶液梯度洗脱分离,电喷雾正离化,多反应监测模式(MRM)定量测定贝达喹啉和舍曲林的离子反应分别为m/z 555.2→229.0和m/z 306.2→159.0。结果：贝达喹啉检测质量浓度的线性范围为0.010～3.0μg·mL^-1(r=0.9995),定量下限为0.010μg·mL^-1;方法经验证符合生物样本分析要求。用于6例耐多药结核病(MDR-TB)患者贝达喹啉治疗血药浓度监测,患者在治疗第7天血浆中贝达喹啉血药峰浓度C_max为(3.48±0.70)μg·mL^-1,峰时间t_max为(5.33±1.03)h,半衰期t_1/2为(18.73±6.39)h;血药浓度曲线下面积AUC_last为(50.16±9.74)μg·h·mL     

活动性肺结核患者血清炎性因子变化特点及与免疫状态的关系

目的探讨活动性结核患者血清炎性因子水平特征及与患者免疫状态的关系.方法选择2003年2月至2005年10月本科住院的结核患者97例,其中活动型结核患者57例,静止期患者40例,对照组为41例健康成年体检者.ELISA法及碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)法检测活动性肺结核患者血清中炎性因子水平(TNF-α、IL-1和IL-6)及相关细胞免疫指标(CD4、CD8、CD4/CD8)的变化.结果正常对照组IL-1、IL-6、TNF-α水平分别为(15.3±1.3)、(80.5±7.3)、(77.2±9.8)ng /ml,活动性结核组为(33.7±3.6)、(293.6±30.5)和(190.7±25.2)ng/ml,显著高于正常对照组和静止性结核组.活动性结核组患者外周血CD4比例及CD4/CD8比值为(32.3±2.9)%和(0.83±0.17),显著低于正常对照组.结论炎性因子水平增高及免疫功能下降是活动型结核患者的临床特点之一,两者呈反向依赖关系.     

Diagnostic value of Lipoarabinomannan antigen for detecting Mycobacterium tuberculosis in adults and children with or without HIV infection

ObjectivesEven today, tuberculosis (TB) remains a leading public health problem; yet, the current diagnostic methods still have a few shortcomings. Lipoarabinomannan (LAM) provides an opportunity for TB diagnosis, and urine LAM detection seems to have a promising and widely applicable prospect.Design or methodsFour databases were systematically searched for eligible studies, and the quality of the studies was evaluated using the quality assessment of diagnostic accuracy studies‐2 (QUADAS‐2). Graphs and tables were created to show sensitivity, specificity, likelihood ratios, diagnostic odds ratio (DOR), the area under the curve (AUC), and so on.ResultsBased on the included 67 studies, the pooled sensitivity of urine LAM was 48% and specificity was 89%. In the subgroup analyses, the FujiLAM test had higher sensitivity (69%) and specificity (92%). Furthermore, among patients infected with human immunodeficiency virus (HIV), 50% of TB patients were diagnosed using a urine LAM test. Besides, the CD4+ cell count was inversely proportional to the sensitivity.ConclusionsUrine LAM is a promising diagnostic test for TB, particularly using the FujiLAM in HIV‐infected adults whose CD4+ cell count is ≤100 per μl. Besides, the urine LAM test shows various sensitivities and specificities in different subgroups in terms of age, HIV infection status, CD4+ cell count, and testing method.     

黄芪联合抗结核药对肺结核合并糖尿病患者细胞免疫炎性反应、凝血功能的影响

目的观察黄芪联合抗结核药对肺结核合并糖尿病(PTB-DM)患者细胞免疫炎性反应、凝血功能的影响。方法将2016年1月—2017年12月中国人民解放军联勤保障部队第九八〇医院收治的80例PTB-DM患者患者随机分为对照组和观察组,每组40例。2组均给予常规四联抗结核治疗和胰岛素皮下注射,观察组在此基础上给予中药黄芪治疗,疗程为6个月。分别于治疗前后根据肺结核症状积分标准对患者咳嗽、咳痰、乏力、盗汗和食欲情况进行评分,观察2组治疗后痰液结核杆菌涂片转阴情况、空腹血糖(FPG)、细胞免疫指标(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及Th1、Th2细胞水平和Th17、Treg细胞表达率)、炎性指标[单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β(TGF-β)]、凝血指标[凝血酶原时间(APTT)、血浆凝血酶原时间(PT)、血浆凝血酶时间(TT)、血小板(Plt)、纤维蛋白原(FIB)和D-二聚体(D-D)]的变化,比较2组治疗期间不良反应发生情况。结果治疗后2组咳嗽、咳痰、乏力、盗汗和发热评分均明显降低(P均<0.05),且观察组均明显低于对照组(P均<0.05)。治疗2个月和6个月观察组痰涂片结核杆菌转阴率均明显高于对照组(P均<0.05)。治疗2个月、6个月2组FPG均明显降低(P均<0.05),且观察组在治疗6个月时明显低于对照组(P<0.05)。治疗后2组CD3+、CD4+、Th1和Th17水平和CD4+/CD8+均升高(P均<0.05),且观察组明显高于对照组(P均<0.05);2组Th2、Treg水平及MCP-1、IL-6、TNF-α、TGF-β均明显下降(P均<0.05),且观察组明显低于对照组(P均<0.05)。治疗后2组APTT、PT、TT均明显缩短(P均<0.05),Plt、FIB、D-D水平明显降低(P均<0.05),且观察组缩短及降低程度明显大于对照组(P均<0.05)。治疗期间观察组胃肠道反应、肝功能受损、皮疹和白细胞降低发生率均明显低于对照组(P均<0.05)。结论黄芪联合抗结核药可以有效改善PTB-DM患者的临床症状,提高痰涂片转阴率,且不良反应少,可能与改善患者的细胞免疫状态和凝血功能、减轻炎性反应有关。     

月华胶囊对耐多药结核分支杆菌感染自噬的影响

目的:以月华胶囊含药血清对耐多药结核分支杆菌感染小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)进行干预,探讨其对耐多药结核分支杆菌感染巨噬细胞自噬的作用及其机制。方法:低温冷冻干燥法制备月华胶囊,大鼠按3.02 g·kg^-1灌胃给药7 d,制备月华胶囊含药血清。体外培养RAW264.7,耐多药结核分子杆菌。以细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测含药血清对RAW264.7的增殖能力并选定其有效浓度。细胞分为模型组(10%胎牛血清);月华胶囊含药血清组(10%月华胶囊);自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)+月华胶囊含药血清组(5 mg·L^-1的3-MA+10%月华胶囊含药血清);雷帕霉素(Rap)组(200 mg·L^-1的Rap+10%胎牛血清);正常组(10%胎牛血清)。除正常组外,各组细胞培养24 h后,按细胞-细菌1∶10感染4 h。透射电镜观察细胞自噬体的出现和形成;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中I型微管相关蛋白轻链3(LC-3Ⅰ),Ⅱ型微管相关蛋白轻链3/I型微管相关蛋白1轻链3(LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ),Beclin-1蛋白的表达;间接免疫荧光染色法观察细胞中LC3B荧光颗粒、斑点及亮度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞中LC3,Beclin-1 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组细胞未见自噬体,细胞中LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量均无显著变化,细胞无荧光颗粒、斑点,无荧光亮度。与模型组比较,月华胶囊含药血清组及Rap组细胞,均可观察到自噬体的形成,细胞LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量值均明显升高(P<0.05),月华胶囊含药血清组细胞荧光颗粒和荧光斑点明显增多,Rap组细胞荧光颗粒和荧光斑点增多非常明显,荧光闪亮,可判定细胞荧光呈现为阳性;自噬抑制剂3-MA+月华胶囊含药血清组细胞未见自噬体,细胞中LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量值均无明显升高。结论:月华胶囊含药血清能使耐多药结核分支杆菌感染细胞产生自噬而发挥抗结核的免疫效应,其机制是通过调控自噬相关蛋白LC3,Beclin-1蛋白及其mRNA的表达水平,促使LC3-I趋向LC3-Ⅱ的转化加快而实现的。     

血栓弹力图参数联合D-二聚体对胸腰椎结核术后并发深静脉血栓形成的预测作用

目的 分析血栓弹力图参数联合D-二聚体(D-D)对胸腰椎结核术后并发下肢深静脉血栓形成(DVT)的预测作用.方法 选取2017年3月—2020年4月三二〇一医院创伤关节外科收治胸腰椎结核术后患者132例的临床资料进行回顾性分析,根据术后1个月内是否发生DVT分为DVT组22例和无DVT组110例.比较2组患者抗凝治疗前...