结核分枝杆菌DNA两种提取方法比较

目的 :比较能够满足内切酶分析的结核分枝杆菌染色体DNA提取的两种方法 ,并结合实验室条件加以改进。方法 :称取结核分枝杆菌培养物 ,灭活后以溶菌酶和蛋白酶K消化后 ,分别以CTAB/NaCl和酚 /氯仿 /异戊醇 (2 5∶2 4∶1)抽提 ,无水乙醇沉淀 ,紫外分光光度计测定DNA的含量。结果 :酚抽提法和CTAB抽提法提取的基因组DNA的得率分别为0 47± 0 0 71,0 41± 0 10 (‰ ,W/W )。A2 60 /A2 80 的值分别为 1 83± 0 12 ,1 89± 0 0 72。结论 :用CTAB/NaCl抽提结核分枝杆菌基因组DNA均能满足内切酶及杂交操作的要求 ,酚抽提法得率稍高 ,但无统计学意义。CTAB法污染少 ,省时省材 ,可代替酚抽提DNA。     

T-cell signature cytokines distinguish pulmonary sarcoidosis from pulmonary tuberculosis

Sarcoidosis is a systemic inflammatory disorder characterized by tissue infiltration due to mononuclear phagocytes and lymphocytes and associated noncaseating granuloma formation. Pulmonary sarcoidosis (PS) shares a number of clinical, radiological, and histopathological characteristics with that of pulmonary tuberculosis (PTB). Due to this, clinicians face issues in differentiating between PS and PTB in a substantial number of cases. There is a lack of any specific biomarker that can diagnose PS distinctively from PTB. We compared T-cell-based signature cytokines in patients with PS and PTB. In this study, we proposed a serum biomarker panel consisting of cytokines from cells: T helper (Th) 1 [interferon-gamma (IFN-γ); tumor necrosis factor-alpha (TNF-α)], Th9 [interleukin (IL)-9], Th17 [IL-17], and T regulatory (Treg) [IL-10; transforming growth factor-beta (TGF-β)]. We performed the principal component analysis that demonstrated that our serum cytokine panel has a significant predictive ability to differentiate PS from PTB. Our results could aid clinicians to improve the diagnostic workflow for patients with PS in TB endemic settings where the diagnosis between PS and PTB is often ambiguous.     

原位聚合酶链反应检测结核分枝杆菌L型的初步研究

目的：建立一种不需提取ＤＮＡ的检测分枝结核杆菌Ｌ型的分子生物学方法。方法：采用原位聚合酶链反应（原位ＰＣＲ）技术,扩增结核杆菌Ｌ型及其感染的人和小鼠血标本中的结核杆菌ＩＳ６１１０基因,再用免疫组化技术显色。结果：结核杆菌Ｌ型菌株中的ＤＮＡ被扩增,血标本中,可见到红细胞和淋巴细胞周围粘附大量结核杆菌ＤＮＡ阳性颗粒。结论;红细胞和淋巴细胞具有免疫粘附功能,原位ＰＣＲ快速、简便,可用于检测稳定和不稳定分     

脊柱结核的CT诊断

目的：探讨脊柱结核的ＣＴ影像学特征。方法：回顾性分析７６例脊柱结核的ＣＴ表现,总结其影像学特征。结果：７６例脊柱结核均有不同程度的骨质破坏,６２例有高密度死骨块;椎体骨质密度增高５９例;椎间盘破坏４８例;椎旁、腰大肌脓肿６７例;椎管狭窄３５例;椎体压缩４７例。脊髓造影ＣＴ扫描（ＣＴＭ）３例中２例显示脊髓受压移位,蛛网膜下腔炎性粘连。结论：ＣＴ能够较好地显示脊柱结核的特征性表现,特别是在椎体及附件骨     

多重聚合酶链反应快速检测脑膜炎中的病原体

目的 建立脑膜炎多重PCR检测系统,以在一次扩增中快速、特异地同时检出新型隐球菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌,用于脑膜炎病原体感染的快速诊断。方法 根据新型隐球菌URA保守序列、脑膜炎双球菌基因组中特定的H.8外膜蛋白基因序列、结核分枝杆菌基因组中的IS986插入基因序列片段,分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物,采用多重PCR技术,同时检出脑脊液中的新型隐球菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌。结果 应用多重PCR反应体系,对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果：我重PCR扩增的预期结果为：单一菌感染出现一条特异性扩增区带;混合感染应出现2条或3条特异性扩增区带,经实验达到预期的扩增结果;对15份已明确诊断的脑脊液标本,分法均能扩增出预期的目的片段。符合率达100%,对20例临床脑脊液标本的PCR扩增结果分别为：新型隐球菌15%（3/20）、结核肝菌20%（5/20）、脑膜炎双球菌10%（2/20）。结论 多重PCR有效地为临床病原体的混合感染,以及原因不明的脑膜炎患的快速诊断,提供了快速、准确的诊断手段。有效地减少了脑膜炎的误诊和漏诊,更提高了检验效率。     

59例老年人肺结核临床特点分析

目的 探讨老年人肺结核病的临床特点,方法 回顾性分析了５９例６０岁以上老年肺结核的临床表现、肺Ｘ线特征、诊断及效果。结果 ①５９例患以肺结核诊断入院２１例（３５．６％）,其他疾病（非结核病）入院３８例（６４．４％）,其中１４例为复发性肺结核;②５４例（９１．５％）合并有不同脏器疾病;③４４例经抗结核治疗后治愈或好转,总有效率为７４．６％;④死亡７例（１３．４％）,其中因确诊晚未及治疗的３例,     

结核分支杆菌耐多药株katG突变SSCP技术检测的研究

目的 建立并评价ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测结核分支杆菌耐药性基因突变的方法。方法 根据ｋａｔＧ基因易变区设计一对引物,ＰＣＲ扩增,产物经沸点断裂成单链,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,比较电泳的位置。结果 ＰＣＲ检测结核菌ＤＮＡ的灵敏度达到１００个细菌／ｍｌ,与其它细菌和其他分支杆菌无交叉反应。３０株敏感株和Ｈ３７Ｒｖ的ＰＣＲ产物经ＳＳＣＰ检测正常,２０株耐异烟肼结核菌中,１９株的ＰＣＲ产物ＳＳＣＰ检测游异常电泳带     

综合医院确诊的39例肺结核患者转诊结果随访调查

目的;了解并评价综合医院内科确诊的活动性肺结核病例转诊结果。方法：对我院呼吸内科１９９５年８月－１９９８年８月确认的３９例活动性肺结核患者（不包括结核性胸膜炎）转往结构防治专业机构的结果进行信访和电话随访。结果：仍的３９例活动性肺结核患者中有３５例在确诊后１周内结核病接受０．５ａ－１ａ的全地化疗,３３例获得良好效果,２例死亡,死因分别为肺间质纤维化合并感染肺心病及呼吸衰竭。３例慢性纤维空洞型肺结核     

单链构象多态性分析技术检测结核杆菌利福平耐药基因

目的：研究本地区临床分离结核杆菌ｒｐｏＢ基因突变与利福平（ＲＦＰ）耐药性的关系。方法：对３６株ＲＦＰ敏感株和４４株ＲＦＰ耐药株ｒｐｏＢ基因的３２８ｂｐ的ＰＣＲ扩增产物进行单链构象多态性（Ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄ ｃｏｍｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＳＳＣＰ）分析。结果：３６株ＲＦＰ敏感株的ＳＳＣＰ带谱均与参考株Ｈ３７Ｒｖ相同,４４株ＲＦＰ耐药株中,２５株高度ＲＦＰ耐药株和１１株低度ＲＦＰ耐药株的ＳＳＣＰ带谱与Ｈ３７Ｒｖ带谱有差异;另８株低度ＲＦＰ耐药株的ＳＳＣＰ带谱与Ｈ３７Ｒｖ带谱相同。结论：ＳＳＣＰ分析可检测出ｒｐｏＢ基因突变,该基因突变与本地区临床分离结核杆菌对ＲＦＰ耐药有关。     

泸州某医院手术室多重耐药菌感染现状研究

目的分析某医院手术室患者多重耐药菌(MDRO)感染现状,找出相关因素。方法选择2020年2月至2021年1月泸州某医院手术室12619例成年患者作为研究对象,调查患者资料,进行病原菌检测和细菌药敏试验,统计手术室MDRO感染发生情况,分析MDRO感染的菌种、科室分布、耐药情况和MDRO感染发生的相关因素。结果医院手术室患者MDRO感染发生率为2.10%。MDRO感染占比较大的科室是普外科(34.28%)、骨科(23.78%)、泌尿外科(15.22%)。手术室患者MDRO感染中较常见的菌种是鲍曼不动杆菌(46.99%)、金黄色葡萄球菌(19.91%)、铜绿假单胞菌(12.04%)。鲍曼不动杆菌对头孢曲松完全耐药,对氨苄青霉素、环丙沙星、头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素、妥布霉素耐药率超过80.00%,仅对左氧氟沙星耐药率不超过30.00%;金黄色葡萄球菌对青霉素、苯唑西林完全耐药,对红霉素、氯林可霉素的耐药率超过80.00%;铜绿假单胞菌对头孢曲松、氨苄青霉素完全耐药,对头孢他啶、环丙沙星、复方新诺明耐药率超过80.00%,仅对阿米卡星耐药率不超过30.00%。Logistic回归分析结果显示,入住ICU(OR=5.943)、侵入性操作(OR=2.704)、抗菌药物使用时间长(OR=2.244)、合并糖尿病(OR=1.955)是医院手术室患者MDRO感染的影响因素。结论泸州某医院手术室患者MDRO感染发生率较高,可能受入住ICU、侵入性操作、抗菌药物使用时间长、合并糖尿病的影响。