Central leptin suppresses splenic lymphocyte functions through activation of the corticotropin-releasing hormone-sympathetic nervous system

Leptin is one of the key afferent signals that regulate food intake and energy expenditure by acting on specific receptors in the hypothalamus. Recently, leptin was reported to activate the peripheral immune system by acting directly on lymphocytes. To elucidate the brain-mediated participation of leptin in the modulation of peripheral immune functions, we examined the effects of intracerebroventricular (icv) injection of murine recombinant leptin on the proliferative response to Concanavalin A (ConA response) of splenic lymphocytes in rats. The ConA response of splenic lymphocytes was markedly reduced 30 min after icv injection of leptin. The suppressive effect of leptin was abolished completely either by surgical severing of the splenic nerves or by icv injection of an antibody against corticotropin-releasing hormone (CRH), but only partially by an anti-urocortin antibody. Icv injection of CRH and urocortin also suppressed the ConA response of splenic lymphocytes, and the effect of urocortin was prevented by the anti-CRH antibody, while that of CRH was not prevented by the anti-urocortin antibody. These results suggest that leptin suppresses peripheral lymphocyte functions, in contrast to the direct activating effects, indirectly through the activation of the CRH (urocortin)-sympathetic nervous system.     

原发性肺部恶性肿瘤与COPD患者外周血淋巴细胞亚群和NK细胞水平测定的临床探讨

目的　探讨原发性肺部恶性肿瘤与慢性阻塞性肺部疾病 (COPD)患者外周血淋巴细胞亚群及NK细胞水平测定的临床价值。方法　应用单克隆抗体 -碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法 (APAAP法 )测定 60例COPD病人 ,5 0例原发性肺部恶性肿瘤病人和 40例正常对照组CD3 + ,CD4+ ,CD8+ ,CD19+ 及NK细胞的百分数 ,计算CD4+ /CD8+ 比值。结果　原发性肺部恶性肿瘤组、COPD组的CD3 + ,CD4+ ,CD4+ /CD8+ ,CD19+ 明显降低 ,而CD8明显增高 ,与对照组比较均有显著差异 (P <0 0 1) ;原发性肺部恶性肿瘤组的NK细胞的百分数降低 ,与对照组比较有显著差异 (P <0 0 1) ,COPD组NK表达与对照组比较无显著差异 (P >0 0 5 )。原发性肺部恶性肿瘤组与COPD组的CD3 + ,CD4+ ,CD8+ 均无明显差异 (P >0 0 5 ) ,而NK ,CD19+ 有差异 (P <0 0 1)。结论　原发性肺部恶性肿瘤组和COPD组存在细胞免疫功能紊乱和失调 ,临床上应不失时机的应用免疫调节剂     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞活化的研究

目的 :探讨HBV感染不同的临床结果以及HBV -DNA的复制与其外周血中淋巴细胞活化状况的关系。方法 :应用流式细胞技术检测187例乙型肝炎患者及16例健康对照外周血中淋巴细胞的活化 ,同时利用实时荧光定量PCR测定其体内HBV -DNA载量。结果 :以HLA -DR作为各T淋巴细胞的活化指标 ,急性肝炎恢复期和慢性肝炎患者活化的CD3 、CD4 和CD8 淋巴细胞明显高于健康对照和慢性病携带者 (P<0.05或P<0.01)。而在慢性肝炎中。病程越严重 ,其外周血淋巴细胞的活化率亦越高。但乙型肝炎患者体内的病毒载量与其外周血淋巴细胞的活化无明显相关性 (P>0.5)。结论 :乙型肝炎患者所致的肝细胞损坏以及其体内病毒的清除与机体的免疫状况明显相关 ,但体内乙型肝炎病毒的复制与机体的免疫功能有关。     

CD4^＋CD25^high Regulatory Cells in Peripheral Blood of NSCLC Patients

The proportion and changes of CD4 CD25high regulatory T cells (Trs) in peripheral blood of non-small cell lung cancer (NSCLC) patients were analyzed and their clinical significance explored. The peripheral blood was collected from 61 patients with NSCLC and 15 healthy controls. By using monoclonal antibodies, the blood samples were evaluated with the flow cytometry for lymphocyte subsets (CD3 , CD4 and CD8 ) and CD4 CD25high Tr cells. The results showed that the proportion of CD4 CD25high Tr cells in NSCLC group was significantly higher than in control group [(4.36±2.07) % vs (2.04±1.03) %, P<0.01]. The proportion of CD4 CD25 high Tr cells in late stage was higher than that in early stage [stages I II (2.26 0.6) %; stage III (3.28 1.38) %; stage IV (6.06±4.08) %] (P<0.05). Kaplan-Meier survival analysis revealed that the prognosis of the patients who had higher proportion of CD4 CD25high Tr cells in peripheral blood was worse (P=0.0026). In conclusion, the relative increase in CD4 CD25high Tr cells in peripheral blood may be related to im-munosuppression and tumor progression in patients with NSCLC. This finding suggests that CD4 CD25 high Tr cells in peripheral blood of NSCLC may be positive for prognosis analysis. The use of depletion of the CD4 CD25high Tr cell therapy to treat NSCLC patients may be an effective strategy.     

高分压氧处理对体外培养大鼠脾淋巴细胞增殖及杀伤能力的影响

目的观察大鼠体外脾淋巴细胞经不同压力—时程的高分压氧处理后淋巴细胞增殖及细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤能力的变化。方法分离成年大鼠脾淋巴细胞,置于高压细胞培养舱内,以不同压力—时程的高分压氧(含CO25 kPa)处理,W ST-8比色法测定经刀豆球蛋白(ConA)刺激后淋巴细胞的增殖率和对肿瘤细胞株P815的杀伤能力。以常压空气(含5%CO2)处理作为对照组。结果一定压力—时程的高分压氧处理对体外培养的大鼠脾淋巴细胞增殖及杀伤能力具有促进作用,但随暴露剂量的增加则逐渐表现为抑制效应。结论高分压氧对离体大鼠脾淋巴细胞增殖及杀伤能力存在一个从适度暴露促进功能发挥至过量暴露抑制功能发挥的过程。     

STAg和霍乱毒素滴鼻免疫小鼠诱导的鼻相关淋巴组织细胞免疫应答

目的研究可溶性速殖子抗原(solubletachyzoiteantigen,STAg)和霍乱毒素(choleratoxin,CT)佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠后鼻相关淋巴组织(nasal-associatedlymphoidtissue,NALT)的免疫效应及持续时间。方法BALB/c小鼠96只随机分为实验组和对照组,实验组以免疫原性好的STAg(20μg/只)为抗原,CT(1μg/只)为佐剂滴鼻免疫,对照组以PBS滴鼻。滴鼻2次(间隔2周)后分别于第1、2、3、4、6、8、10、12周处死6只小鼠。分离NALT的淋巴细胞,计数并涂片,用免疫细胞化学法(immunocytochemistry,ICC)检测其CD4 、CD8 T细胞亚群水平。结果小鼠免疫后,NALT淋巴细胞第1、2、6、8、12(P<0.05)周显著增生,可持续至免疫后第12周;CD4 T细胞第1周至第6周(P<0.05)持续显著增高,CD8 T细胞在第1周至第4周持续增高(P<0.01),CD4 /CD8 比值第2、3周显著降低(P<0.05)。结论STAg和CT佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠能够有效诱导NALT的免疫效应,并可持续较长时间。     

弓形虫可溶性速殖子抗原和霍乱毒素滴鼻免疫小鼠诱导的鼻通道细胞免疫应答

目的研究弓形虫可溶性速殖子抗原(solubletachyzoiteantigen,STAg)和霍乱毒素(choleratoxin,CT)佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠后鼻通道(nasalcavity,NC)的免疫效应及持续时间。方法BALB/c小鼠96只随机分为实验组和对照组,实验组以STAg(20!g/只)为抗原,CT(1!g/只)为佐剂滴鼻免疫,对照组以PBS滴鼻。滴鼻2次(间隔2周)后分别于第1、2、3、4、6、8、10、12周处死6只小鼠。分离NC的淋巴细胞,计数并涂片,用免疫细胞化学法检测其CD4 T、CD8 T细胞亚群水平。结果小鼠免疫后,NC淋巴细胞第1周至第10周持续显著增生(P<0.05);NC中CD4 T细胞水平第1周至第8周持续显著增高(P<0.05),CD8 T细胞在第1、2、3周(P<0.05)显著增高,持续至免疫后第3周,CD4 /CD8 比值无明显变化。结论STAg和CT佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导NC的免疫应答,并可持续较长时间。     

麻醉对腰椎间盘突出症手术病人T淋巴细胞亚群的影响

目的研究不同麻醉方法对围手术期腰椎间盘突出症病人细胞免疫功能的影响。方法应用流式细胞仪,对58例采用局麻和硬膜外麻醉方法接受腰椎间盘髓核摘除术病人术前、术后第1天以及术后第3天的T淋巴细胞亚群进行测定及比较分析。结果术后第1天,采用两种不同麻醉方法的手术病人CD4 亚群数量下降,CD4 /CD8 比值下降(t=2.220~3.450,P<0.05);术后第3天恢复到术前水平;两组病人在同一时段的CD4 、CD8 水平差别无统计学意义(P>0.05)。结论两种麻醉方法都能获得满意的手术效果,对手术病人的细胞免疫功能影响没有差别。     

甘草酸对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓造血功能的影响

目的:探讨甘草酸对免疫诱导再生障碍性贫血(再障)小鼠骨髓造血功能的影响,寻求治疗免疫诱导再障的方法。方法:BALB/c小鼠72只,适应性喂养1周后,随机分为实验组(64只)及正常对照组(8只)。实验组小鼠首先制造再障模型。将制模后小鼠再分为模型对照组(40只)及甘草酸组(24只)。将甘草酸组再分为低、中、高剂量组,每组8只,低、中、高剂量组小鼠每天经灌胃分别给予10、20、30mg/(kg.d)甘草酸,连续14 d,于第15天脱臼处死小鼠,分别检测血象、骨髓单个核细胞(BMNC)、CFU-GM、BFU-E,用原位末端标记法(TUNEL)测定胸腺淋巴结混合细胞、骨髓单个核细胞、外周血单个核细胞凋亡率。其余40只模型对照组小鼠每天经灌胃给予等体积生理盐水,并分别于第3、5、7、10、15天各处死一批次小鼠。8只正常对照组小鼠只给予等体积生理盐水。检测指标同上。结果:甘草酸组WBC、Hb、BMNC、CFU-GM、BFU-E明显高于模型对照组(P<0.05,P<0.01),且具有剂量-效应关系。模型对照组骨髓单个核细胞凋亡率、胸腺淋巴结混合细胞凋亡率、外周血单个核细胞凋亡率均高于正常对照组(P<0.01)。甘草酸组骨髓单个核细胞凋亡率高于正常对照组(P<0.01)而低于模型对照组(P<0.01),外周血单个核细胞凋亡率高于正常对照组及模型对照组(P<0.05,P<0.01),胸腺淋巴结混合细胞凋亡率高于正常对照组(P<0.01)。结论:甘草酸通过促进成熟淋巴细胞凋亡而有助于免疫诱导再障小鼠骨髓造血功能的恢复。     

复发性流产患者蜕膜中T淋巴细胞及其亚群变化的研究

目的:探讨复发性流产(RSA)与T淋巴细胞免疫功能的关系。方法:采用流式细胞仪与免疫荧光技术相结合,对20例RSA患者和16例正常早孕妇女蜕膜中T淋巴细胞及其亚群进行检测。结果:与对照组相比,RSA组患者蜕膜中总T淋巴细胞及CD4+T淋巴细胞百分率均升高(P(0.05),CD8+T淋巴细胞变化无显著性(P(0.05)。结论:蜕膜中T淋巴细胞亚群失衡可导致复发性流产。