大剂量丙种球蛋白联合纳洛酮治疗乙型脑炎疗效分析

目的：观察大剂量丙种球蛋白联合纳洛酮治疗乙型脑炎的疗效。方法安康市中心医院2012年6月至2014年9月收治的95例乙型脑炎患儿随机分成两组。对照组47例,给予常规综合治疗(抗病毒治疗+营养支持+对症治疗);研究组48例,在常规综合治疗的基础上,给予丙种球蛋白静脉输注1g·kg-1·d-1联合纳洛酮(0.01~0.02)mg/kg治疗。结果研究组患儿平均退热时间、抽搐时间及意识障碍持续时间较对照组明显缩短(t值分别为4.526、3.371、4.487,均P<0.01);研究组较对照组呼吸衰竭发生率明显降低(χ2=14.341,P<0.05);研究组治愈率显著高于对照组(χ2=19.234,P<0.01)。结论丙种球蛋白联合纳洛酮治疗乙型脑炎较单纯综合治疗更为有效,能够显著降低死亡率,提高治愈率,减少后遗症的发生,应在临床治疗中普遍推广及应用。     

哮喘患儿体内EOS、IgE、IL-4及IFN-γ水平的检测及临床意义

目的：探讨哮喘患儿体内嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)、免疫球蛋白E(IgE)、白介素4(IL-4)及γ干扰素(IFN-γ)水平的检测及临床意义,为临床疾病的诊断和治疗提供依据。方法抽选湖北省鄂州市鄂钢医院2012年11月至2013年6月收治的95例哮喘患儿(哮喘组,其中急性发作期47例、缓解期48例),并抽选同期在本院体检的79例健康患者为对照研究(健康组),采用肺功能仪测定两组的肺功能,并采用痰液诱导、酶联免疫吸附法( ELISA)分别测定患儿痰液中的EOS百分率及血清中IgE、IL-4、IFN-γ水平。结果哮喘组患儿的1秒用力呼气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC)的比值(FEV1%)为(69.67±6.63)%,明显低于健康组的(102.27±11.93)%,差异具有统计学意义(t=22.750,P<0.001);哮喘组患儿的FEV1占预计值百分比为(70.45±9.62),明显低于健康组的(90.13±6.34),差异有统计学意义(t=15.582,P<0.001)。哮喘组患儿的痰EOS百分率、血清中IgE、IL-4水平均高于健康组(t值分别为321.962、82.644、76.913,均P<0.05),哮喘组患儿的IFN-γ水平明显低于健康组(t=30.207,P<0.001)。急性发作期哮喘患儿的痰EOS百分率及血清中IgE、IL-4水平均高于缓解期哮喘患儿的(t值分别为15.752、40.762、31.162,均P<0.05),急性发作期哮喘患儿的IFN-γ水平明显低于缓解期哮喘患儿的(t=35.892,P<0.05)。结论血清中IL-4、IgE水平及痰液中EOS百分率升高、血清IFN-γ水平降低,与哮喘的发生、发展密切相关,对其治疗及病情判断具有重要价值。     

反式白藜芦醇对β－淀粉样肽致痴呆大鼠的保护作用

目的：观察反式白藜芦醇（ TR）对β－淀粉样肽（Aβ25－35）致痴呆大鼠海马旁回的保护作用。方法先将SD大鼠分为3,20月龄2大组,然后再分为假手术组、模型组、低与高剂量实验组。用Aβ25－35制痴呆模型后,实验组灌胃给TR 10,40 mg? kg－1? d－1,假手术组、模型组均给予0．9％NaCl（1 mL／100 g）,连续10 d。用实时定量PCR法检测8组大鼠海马及皮质半胱氨酸蛋白酶－3（caspase－3）、DNA聚合酶γ的表达。结果模型组与假手术组的caspase－3、DNA聚合酶γ表达水平比较差异有统计学意义（ P＜0．01）,说明造模成功。 TR对caspase－3、DNA聚合酶γ表达水平的下调非常显著（ P＜0．01）。模型组3月龄较20月龄大鼠的caspase－3表达量明显增高（ P＜0．05）。实验组3月龄与20月龄大鼠caspase－3表达量差别有统计学意义（ P＜0．05）。结论 TR对损伤的大鼠海马周围皮层神经元有保护作用。     

替米沙坦诱导大鼠肝细胞自噬促进肝脏胆固醇代谢的机制研究

目的探讨替米沙坦诱导大鼠肝细胞自噬对肝脏胆固醇代谢的影响及作用机制。方法将肝脏原代细胞分为正常对照组(Con)、替米沙坦1μmol/L组(Tel 1组)、替米沙坦3μmol/L组(Tel 3组)、替米沙坦10μmol/L组(Tel 10组)、替米沙坦10μmol/L联合PPARγ抑制剂GW 9662组(Tel+G组)。Tel 1、Tel 3、Tel 10组分别按1、3、10μmol/L浓度加入替米沙坦,Tel+G组加入10μmol/L替米沙坦及PPARγ抑制剂GW9662,培养24 h。检测肝细胞胆固醇浓度,Western blot法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)、自噬蛋白区域(Beclin-1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、雷帕霉素靶分子(mTOR)表达水平。结果 Tel 3、Tel 10组胆固醇水平低于Con、Tel 1组(P<0.05)。Tel 1、Tel 3、Tel 10组LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Beclin-1蛋白水平依次升高(P<0.05)。与Con、Tel 1组比较,Tel 3、Tel 10组p-AMPK/AMPK蛋白比值升高(P<0.05),p-mTOR/mTOR蛋白比值降低(P<0.05)。与Tel 10组比较,Tel+G组胆固醇水平、p-mTOR/mTOR蛋白比值升高(P<0.05),LC3II/I比值、p-AMPK/AMPK蛋白水平降低(P<0.05)。结论替米沙坦可通过诱导大鼠肝细胞自噬影响肝脏细胞胆固醇代谢,其机制可能与激活AMPK/mTOR途径和上调PPARγ有关。     

CXCR3阻断剂Genistein对大鼠胰腺移植后排斥反应的影响

目的 探讨Genistein对大鼠移植胰腺急性排斥反应的影响以及作用机制.方法 以Wistar和SD大鼠为供体,SD大鼠为受体,建立胰腺移植模型.分成同种系移植组、异种系移植组和Genistein治疗组(在异种系移植后每天腹腔注射Genistein 10 mg/kg体重,共7 d),每组lO只.术后7 d切除移植物行病理学观察及CXCR3免疫组化染色,抽血检测血清IFN-γ、IL-2浓度.结果 同种系移植组移植物无急性排斥反应,无CXCR3表达.血清IFN-γ、IL-2浓度分别为(2.76±0.66)pg/ml和(11.83±1.86)pg/ml;异种系移植组的移植胰腺发生强烈的镜下排斥反应,CXCR3强阳性表达,血清IFN-γ、IL-2浓度分别为(32.64±2.52)PS/ml和(29.59±1.71)PS/ml,较同种系移植组显著升高(P<0.05);Genistein治疗组的移植胰腺排斥反应减轻,CXCR3弱阳性表达,血清IFN-γ、IL-2浓度分别为(15.94±1.95)Pg/ml和(22.62±1.76)ps/ml,较异种系移植组显著降低(P<0.05),但高于同种系移植组(P<0.05).结论 Genistein通过阻断CXCR3的表达,可有效减轻胰腺移植后急性排斥反应.     

猪囊尾蚴抗原cC1与γ-干扰素融合蛋白在大肠杆菌中的表达

目的： 构建含猪囊尾蚴抗原ｃ Ｃ１ ｃ Ｄ Ｎ Ａ 与猪γ 干扰素（ Ｉ Ｆ Ｎ γ） 的融合表达载体。方法： 从已克隆的含人猪囊尾蚴共通抗原ｃ Ｃ１ 的质粒中, 用 Ｐ Ｃ Ｒ 方法扩增出含酶切位点及接头的ｃ Ｃ１ 和 Ｉ Ｆ Ｎ γｃ Ｄ Ｎ Ａ, 两ｃ Ｄ Ｎ Ａ 经接头融合后构建成融合形式的原核表达载体转入大肠杆菌 Ｘ Ｌ Ｂｌｕｅ。结果： 经酶切分析, 表明重组载体中含１５ｋｂ 插入片段。 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 显示一５２ ｋ Ｄａ 的诱导产物。结论： 猪 Ｉ Ｆ Ｎ γ和猪囊尾蚴抗原ｃ Ｃ１ 融合ｃ Ｄ Ｎ Ａ 在大肠杆菌中获得表达。     

Innate immune system plays a critical role in determining the progression and severity of acetaminophen hepatotoxicity

BACKGROUND & AIMS: Inflammatory mediators released by nonparenchymal inflammatory cells in the liver have been implicated in the progression of acetaminophen (APAP) hepatotoxicity. Among hepatic nonparenchymal inflammatory cells, we examined the role of the abundant natural killer (NK) cells and NK cells with T-cell receptors (NKT cells) in APAP-induced liver injury. METHODS: C57BL/6 mice were administered a toxic dose of APAP intraperitoneally to cause liver injury with or without depletion of NK and NKT cells by anti-NK1.1 monoclonal antibody (MAb). Serum alanine transaminase (ALT) levels, liver histology, hepatic leukocyte accumulation, and cytokine/chemokine expression were assessed. RESULTS: Compared with APAP-treated control mice, depletion of both NK and NKT cells by anti-NK1.1 significantly protected mice from APAP-induced liver injury, as evidenced by decreased serum ALT level, improved survival of mice, decreased hepatic necrosis, inhibition of messenger RNA (mRNA) expression for interferon-gamma (IFN-gamma), Fas ligand (FasL), and chemokines including KC (Keratinocyte-derived chemokine); MIP-1 alpha (macrophage inflammatory protein-1 alpha); MCP-1 (monocyte chemoattractant protein-1); IP-10 (interferon-inducible protein); Mig (monokine induced by IFN-gamma) and decreased neutrophil accumulation in the liver. Hepatic NK and NKT cells were identified as the major source of IFN-gamma by intracellular cytokine staining. APAP induced much less liver injury in Fas-deficient (lpr) and FasL-deficient (gld) mice compared with that in wild-type mice. CONCLUSIONS: NK and NKT cells play a critical role in the progression of APAP-induced liver injury by secreting IFN-gamma, modulating chemokine production and accumulation of neutrophils, and up-regulating FasL expression in the liver, all of which may promote the inflammatory response of liver innate immune system, thus contributing to the severity and progression of liver injury downstream of the metabolism of APAP and depletion of reduced glutathione (GSH) in hepatocytes.     

慢性阻塞性肺疾病大鼠主要脏器γ-GCS活性及其mRNA表达变化

目的:研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠血浆、肺、心、肝、和肾组织中氧化/抗氧化水平,及γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)活性及其表达在各器官组织中的差异和变化。方法:健康雄性Wistar大鼠14只,随机分COPD模型组和对照组,每组7只。采用每日熏香烟和两次气管内滴入脂多糖(LPS)法制作COPD大鼠模型。检测大鼠血浆、肺、心、肝和肾组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、活性氧(ROS)、总抗氧化力(T-AOC)和γ-GCS活性。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺、心、肝和肾组织中γ-GCS mRNA的表达。结果:COPD组大鼠心、肝中GSH、ROS、T-AOC和γ-GCS活性均显著增高(P均<0.05),但未显示出明显氧化/抗氧化失衡。肺中GSH和ROS提高,而T-AOC下降明显(P均<0.05),表明提高的GSH不足以抵御氧化作用,明显存在氧化/抗氧化失衡。血清中ROS增高,GSH和T-AOC下降明显,显示系统性氧化/抗氧化失衡。COPD大鼠肺组织γ-GCS mRNA表达较对照组显著增高(P<0.05),而心、肝、肾组织中γ-GCS mRNA表达与对照组无明显差异(P>0.05)。结论:COPD大鼠肺内存在氧化/抗氧化失衡,肺组织是γ-GCS表达的主要部位,在抗氧化损伤中可能发挥重要作用。     

芹菜素γ-环糊精包合物的表征和抗氧化活性研究

目的研究芹菜素与γ-环糊精(γ-CD)包合物的制备、表征、包合机制及其抗氧化活性。方法采用加热回流共沉淀法制备芹菜素γ-环糊精包合物,红外光谱法(IR)对形成的包合物进行表征,荧光光谱法测定包合物的包合常数(K)和包合比(n);荧光光谱法和核磁共振法(NMR)研究芹菜素与γ-CD在溶液中形成的包合物;双倒数曲线法研究包合前后对自由基1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)的清除率。结果在不同的pH值溶液中,γ-CD对芹菜素具有不同的包合能力,γ-CD最适合在中性介质中与芹菜素形成包合物,在实验浓度范围内按1∶1形成包合物,包合比为1236,包合物对自由基DPPH·的清除活性更强;NMR确定包合物的结构。结论在实验条件下,芹菜素分子从γ-CD大口端进入到空腔内形成稳定的包合物,且抗氧化活性增加。     

Cafestol preconditioning attenuates apoptosis and autophagy during hepatic ischemia-reperfusion injury by inhibiting ERK/PPARγ pathway

ObjectiveThe study was aimed to explore the hepatocellular protective functions of cafestol during hepatic ischemia-reperfusion injury and the possible mechanisms.MethodsNinety male Balb/c mice were randomly divided into seven groups, including normal control group, L-cafestol(20mg/kg) group, H-cafestol(40mg/kg) group, sham group, IR group, L-cafestol(20mg/kg) + IR group, H-cafestol(40mg/kg) + IR group. Serum liver enzymes (ALT, AST), inflammation mediators, proteins associated with apoptosis and autophagy, indicators linked with ERK/PPARγ pathway, and liver histopathology were measured using ELISA, qRT-PCR, immunohistochemical staining, and western blotting at 2, 8, and 24 hours after reperfusion.ResultsOur findings confirmed that cafestol preconditioning groups could reduce the levels of ALT and AST, alleviate liver pathological damage, suppress the release of inflammation mediators, inhibit the production of pro-apoptosis protein including caspase-3, caspase-9 and Bax, decrease the expression of autophagy-linked protein including Beclin-1 and LC3, increase anti-apoptosis protein Bcl-2, and restrain the activation of ERK and PPARγ.ConclusionCafestol preconditioning could attenuate inflammatory response, apoptosis and autophagy on hepatic ischemia reperfusion injury by suppressing ERK/PPARγ pathway.