生物信息学(2):基因工程技术简介

基因工程的特点与基本步骤 基因工程通常称为重组DNA技术（recombinant DNA technique），又称为基因克隆fgene cloning）或分子克隆fmolecular cloning），是用人工方法将外源基因与DNA载体结合形成重组DNA．然后引入某一受体细胞中，使外源基因复制并产生相应的基因产物，从而获得生物新品种的一种崭新育种技术。     

椎弓根螺钉内固定及植骨融合治疗退行性腰椎滑脱的临床疗效评价

目的　评价腰椎管减压、后外侧植骨和椎弓根螺钉内固定治疗退行性腰椎滑脱的临床疗效。方法　 1993年 1月～ 2 0 0 2年 9月对 74例腰椎退行性滑脱的患者行腰椎管减压、后外侧植骨和椎弓根螺钉内固定 ,采用的椎弓根内固定技术包括Dick 8例、Steffee 10例、RF 9例、Socon 2 5例、Tenor 2 0例、Moss Miami 2例。滑脱水平在L4的患者有 4 4例、L3 有 9例、L5有 16例 ,两节水平的滑脱有 5例。Ⅰ°滑脱 37例 ,Ⅱ°31例 ,Ⅲ°6例。患者平均年龄为 5 3.6岁 (30～ 79岁 )。根据手术前、后日本骨科协会 (TDA)评分评价临床症状改善的程度。结果　平均随访时间为 4 4个月 (12～ 10 4个月 ) ,所有患者最后随访的JOA评分中客观症状为 (6 .7± 1.0 )分 ,临床体征为 (4 .7± 1.1)分 ,日常活动为 (11.8± 1.9)分 ,总评分为 (2 3.0± 2 .5 )分。手术前、后的JOA评分比较 ,术后主观症状改善 70 % ,临床体征改善 6 8% ,日常活动改善 77%。根据患者的年龄分为A组 (30～ 39岁 )、B组 (4 0～ 4 9岁 )、C组 (5 0～ 5 9岁 )、D组 (≥ 6 0岁 ) ,以JOA的评分结果 >2 5分定为满意 ,A、B、C、D组的满意率分别为91%、75 %、6 9%、6 1%。结论　椎板减压、后外侧植骨融合和椎弓根螺钉内固定是治疗不稳定腰椎滑脱的一种有效方法 ,临床疗效     

利培酮治疗与细胞色素P4502D6/C188T酶基因多态性的关联分析

目的　研究利培酮临床效应的个体差异与其代谢酶细胞色素P4 5 0 2D6 (cytochromeP4 5 02D6 ,CYP2D6 )酶基因多态性的相关性。方法　对 88例符合CCMD 3精神分裂症诊断标准的患者和 96例健康对照者作病例 -对照分析。精神分裂症患者给予利培酮治疗 8周 ,用阳性和阴性症状量表 (posi tiveandnegativesymptomscale ,PANSS)评分评价利培酮疗效。采用聚合酶链反应扩增及限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术对CYP2D6exonⅠ的C188T位点突变进行检测 ,分析利培酮临床效应与其主要代谢酶CYP2D6 /C188T酶基因多态性的相关性。结果　中国上海地区人群的CYP2D6 /C188T突变率(弱代谢型 )为 36 .3% ,病例组和正常对照组间基因型频率总体分布比较无显著差异 (χ2 =1.15 ,df=2 ,P >0 .0 5 ) ,两组间的等位基因频率之间比较也无显著性差异 (χ2 =0 .78,df=1,P >0 .0 5 )。进行性别及有否家族史分组后分析 ,亦无差异存在 ,且CYP2D6 /C188T突变与利培酮临床效应之间并无相关性 (χ2 =1.12 ,df=2 ;χ2 =0 .0 3,df=1,P >0 .0 5 )。结论　未发现中国人CYP2D6 /C188T多态性与利培酮临床效应的个体差异有相关性。     

研究人员发现结肠癌的新线索

近日发表的一项研究结果表明,科学家已经获得人类结肠癌产生的奥秘。美国纽约Albert Einstein癌症中心的Anna Velcich及其同事们发现,Muc2基因(一种粘蛋白,可构成保持胃肠道粘膜上皮的粘液)缺乏小鼠可发生异常的肠道细胞增生,并可在肠道和直肠中发展成为腺瘤和癌肿。     

SSH技术及其在肿瘤研究中的应用

随着人类基因组计划的完成，人们已经把越来越多的目光投向不同细胞或者不同生理和病理状态下基因的差异性表达（differential display）。这些基因的选择性表达决定了机体的整个生命过程，基因表达的改变正是处于控制生物学调节机制的中心位置。对于肿瘤来说，其发生发展涉及多种基因的相互作用，这些基因的差异性表达也决定了肿瘤的多样性表型。目前分离并且克隆差异性表达基因成为了功能性基因研究的热点。对肿瘤差异基因的分离克隆不但有助于我们理解肿瘤发生发展的分子机制，而且对肿瘤的早期诊断、靶向治疗和有效预防都具有重要的生物学和临床意义。分离差异表达基因的方法有很多，我们比较熟悉的经典方法有：差异显示技术（DD-PCR）、在此基础上发展起来的代表性差异显示技术（RDA—PCR），     

由GJB2基因233delC突变所致重度语前聋日本患儿的成功耳蜗植入

已有研究表明 ,部分非综合征型遗传性耳聋患者是由于 GJB2基因突变引起 ,而基因突变的位点因种族血统而异。日本人群中 ,最常见的是 2 33del C遗传因子突变。为了了解此类患儿遗传类型及耳蜗植入的治疗效果 ,该作者对 1993年 10月至 2 0 0 0年 9月间行耳蜗植入的 33例患儿中 15例病因不明的先天性重度非综合征型耳聋患儿进行研究。 15例中 ,男性 5例(33.3% ) ,女性 10例 (6 6 .7% ) ,接受耳蜗植入的年龄36～ 70个月 (平均 4 5 .3个月 ) ,所有患儿 CT扫描未见耳蜗和其它畸形。研究内容包括对患儿血标本采用PCR直接测序法进行 DNA基因分…     

果蔬保藏技术的前景

综合了有关水果蔬菜保鲜方面的化学及物理手段的改进情况的基础上简要介绍了在国内外正在兴起并取得初步成果的生物基因工程方法。