肝病患者血清诱导间充质干细胞表达肝细胞特异性标志物的实验研究

目的：观察重型肝病患者血清对人骨髓间充质干细胞（MSCs）的诱导分化作用，探讨人MSCs分离培养、体外扩增的条件和方法。方法：从肋骨分离、培养人骨髓MSCs、体外扩增培养、鉴定，并采用重型肝病患者血清诱导培养，分别在诱导培养0、7、14、21、28天时留取细胞，并采用免疫细胞化学方法检测肝特异性标志物（AFP、Alb、CK-18）、用PAS进行糖原染色实验。结果：诱导后5天、MSCs表现为肝细胞样细胞，随着诱导培养时间的延长，肝特异性标志物逐渐出现和成熟。AFP在7天时表达水平最高，培养14、21、28天时表达逐渐减弱；Alb、CK- 18和糖原随着诱导时间的延长，表达逐渐增强。结论：密度梯度离心，贴壁培养和消化时间控制相结合，是一种较为有效的分离纯化方法。重型肝病患者血清能诱导骨髓MSCs表达肝细胞的特异性标志物。     

开放性骨质疏松性股骨远端骨折的治疗和伤害控制论的应用

目的 总结治疗开放性骨质疏松性股骨远端骨折的治疗和应用伤害控制观念的体会。方法 回顾性分析2002年1月～2003年12月60岁以上股骨远端开放性骨折住院治疗的病例21例。应用伤害控制学的原则：全面评价其外伤程度，条件允许则急诊手术，危重患者就临时固定，监护患者的生理指标，限期施行骨折固定手术。结果 17例患者获得超过4个月以上的随访，平均随访7．3个月。17例患者在术后平均15周内(79～168d)达到临床愈合。参照Shelbourne疗效评定标准，膝关节功能优良率达到78％。结论 治疗开放性股骨远端骨质疏松性骨折需要应用伤害控制的观念，兼顾患者全面情况，同时治疗骨质疏松和其它并存疾病。手术固定以股骨髁上逆行交锁髓内钉为主，早期功能锻炼。     

氯氮平对51例精神病患者骨髓象的影响

精神病女性患者５１例，服用氯氮平１００－３５０ｍｇ／ｄ，共４２ｄ。２２例骨髓象由用药前的增生活跃变为增生明显活跃，骨髓粒细胞系统所占比例明显增多；２９例无变化。未见骨髓抑制者。     

骨髓炎与恶性骨肿瘤软组织改变的影像比较

目的 探讨软组织影像改变对骨髓炎和恶性骨肿瘤的鉴别诊断价值。方法 通过回顾性分析。对57例骨髓炎和70例恶性骨肿瘤患者软组织异常CT和MRI征象进行界定、观察、记录和统计学比较。结果57例骨髓炎患者中，CT检查54例，MR检查14例。CT检查的54例中，软组织肿胀52例（Ⅰ度19例、Ⅱ度16例、Ⅲ度17例），脓肿样囊腔6例，软组织肿块5例，软组织内气体、脂液平面和窦道各1例。MR检查的14例骨髓炎中，软组织肿胀14例（Ⅰ度2例、Ⅱ度6例、Ⅲ度6例），脓肿样囊腔（扩散加权成像均呈明显高信号）3例，软组织肿块和脂液平面各1例。70例恶性骨肿瘤患者中，CT检查54例，MR检查49例。CT检查的54例中，软组织肿胀44例（Ⅰ度29例、Ⅱ度12例、Ⅲ度3例），软组织肿块49例，软组织肿块边缘残留骨壳或壳样钙化16例，软组织肿块内肿瘤骨或瘤软骨钙化25例。MR检查的49例恶性骨肿瘤中，软组织肿胀46例（Ⅰ度21例、Ⅱ度17例、Ⅲ度8例），软组织肿块43例。骨髓炎组和恶性骨肿瘤组CT图像显示的软组织肿胀程度（Uc=4．1066，P〈0．01）以及脓肿样囊腔（X^2=4．4118，P〈0．05）、肿块（X^2=71．7037，P〈0．01）、肿块边缘残留骨壳或壳样钙化（X^2=18．7826，P〈0．01）和肿块内肿瘤骨或瘤软骨钙化（X^2=32．5301，P〈0．01）出现比例差异具有统计学意义。MR图像所示的软组织肿胀程度（Uc=2．5997，P〈0．01）以及脓肿样囊腔（四格表确切概率P=0．0092）和肿块（X^2=29．8757，P〈0．01）出现比例差异亦有统计学意义。结论 软组织肿胀程度和软组织肿块对骨髓炎和恶性骨肿瘤鉴别具有一定价值。软组织肿块边缘残留骨壳或壳样钙化以及软组织肿块内肿瘤骨或瘤软骨钙化是恶性骨肿瘤的特异性征象。脓肿样囊腔、软组织内气体、脂液征和窦道是骨髓炎的可靠征象。     

复合珊瑚羟基磷灰石人工骨的研制及其成骨效应

目的 自行研制复合珊瑚羟基磷灰石人工骨并评估其成骨效应。方法 取南海澄黄滨珊瑚碳酸钙在特定条件下经过“热液交换反应”，制成单纯珊瑚羟基磷灰石(coralline Hydroxyapatite，CHA)人工骨，并将其与基因重组骨形态发生蛋白(rhBMP2)和几丁糖复合制成了三种复合珊瑚羟基磷灰石(composite Coralline Hydroxyapatite，CCHA)人工骨，将此三种不同配型的复合人工骨和单纯CHA人工骨分别植入四组24只SD大白鼠肌肉内。手术后2、4、6、8周取材进行组织学观察，计数高倍单位视野内的成骨细胞数量和炎性细胞数量。采用SPSS8.0统计软件处理系统分析。结果 术后各时期取材结果显示：B组(CHA rhBMP2)和D组(CHA rhBM2P 几丁糖)的单位视野内成骨细胞数量明显多于A组(单纯CHA)和C组(CHA 几丁糖)：而C组和D组的单位视野内炎性细胞数量明显少于A组和B组。即D组人工骨的单位视野内的成骨细胞数量多、炎性细胞少。结论 rhBMP2-几丁糖／CHA复合人工骨不但具有显著的成骨诱导作用，还具有炎症反应轻及持续的诱导成骨作用，是一良好的骨移植替代物。     

人参皂苷Rg1诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞的作用

目的研究人参皂苷Rg1在体外能否诱导Wistar大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞。方法通过贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞,体外培养扩增,人参皂苷Rg1诱导分化,光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）和神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达,RT-PCR检测细胞NGF mRNA的表达。结果大鼠骨髓间充质干细胞可通过贴壁法成功分离并可以在体外大量扩增。人参皂苷Rg1诱导72h后,部分骨髓间充质干细胞（35．57％±3．59％）转变为神经元样细胞,免疫细胞化学染色NSE呈阳性,分化的神经元样细胞可能表达NGF mRNA。结论人参皂苷Rg1可以在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞,并且可能表达NGF mRNA。     

Monitoring island flap for fibular graft in 30 patients with long bone defects

To study the effect of vascularized fibulargraft on large defects of long bones and the monitoringmethod for the vascular status of the grafted fibula.     

螺旋CT多功能重建在骨关节外伤中的应用

目的 探讨螺旋cT功能重建在骨与关节外伤中的应用，提高重建技术的使用能力和诊断水平。方法 对使用双层螺旋CT，SSD，MPR，MIP等多种方式重建检查的49例复杂的骨与关节外伤病例进行回顾性分析。结果 49例骨关节外伤重建成像，其中，颅底3例，颌面部7例，颈、胸、腰、骶椎共17例，肩胛骨3例，髋关节8例，膝关节11例。SSD在显示碎骨片明显移位的空间关系方面较MIP，MPR为佳，它可以直观地、立体地、清晰地、多角度显示骨关节损伤，而MIP在显示骨折细节方面较优，尤其在外伤中颅窝观察有关神经孔方面。结论 螺旋CT的SSD，MPR和MIP技术的综合应用，对复杂的骨折、关节损伤的显示效果良好，具有较高的临床应用价值。     

大鼠骨髓间充质干细胞静脉移植对脊髓损伤的修复作用

目的初步探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）静脉移植对脊髓损伤后神经功能恢复和神经修复的影响。方法体外培养BMSCs，改良Allen法制备大鼠脊髓损伤模型，经尾静脉移植Brdu标记的BMSCs，损伤后24h、移植后1、3、5周评价实验动物的神经功能状况，并检测BMSCs在体内迁移、存活以及分化情况，电子显微镜观察组织形态学变化。结果移植的BMSCs在宿主损伤脊髓中聚集并存活，3～5周后有部分移植细胞表达神经元特异性烯醇化酶（NSE）、神经丝蛋白（NF）、微管相关蛋白（MAP2）；BMSCs静脉移植组大鼠运动功能改善，BBB评分高于对照组（P〈0．05）；5周后组织学观察，与对照组相比移植组损伤区脊髓结构较完整。结论BMSCs经静脉移植后可向脊髓损伤处聚集并存活分化，促进神经修复及神经功能的恢复。     

维生素D衍生物联合供者骨髓细胞输注诱导异基因大鼠心脏移植免疫耐受

目的 探讨同种异基因心脏移植后免疫耐受的诱导。方法 建立大鼠颈部异位心脏移植模型，按分组分别给予门静脉输注供者骨髓细胞(DBMC)(B组)、骨化三醇灌胃(C组)、输注DBMC及骨化三醇灌胃(D组)以及环孢素A(CsA)灌胃(E组)。观察移植心脏的存活时间及心肌组织病理改变，测定心肌组织中肿瘤坏死因子及细胞间粘附分子-1 mRNA的表达以及血清钙、磷浓度，进行受者与供者及无关第三品系大鼠脾细胞混合淋巴细胞培养(MLR)。结果 D组移植心脏的存活时间较其它各组显著延长(P＜0．05)；术后7d，C组、D组、E组受者脾细胞均能显著抑制供者及第三方无关供者脾细胞作为刺激细胞引起的MLR；D组手术前后血磷、血钙浓度的差异无显著性(P＞0．05)；各组急性排斥反应的程度，D组最轻；D组肿瘤坏死因子及细胞间粘附分子-1 mRNA的表达受到显著抑制，与对照组(A组)、B、C组比较，差异有显著性(P＜0．05)。结论 骨化三醇灌胃联合DBMC输注可显著延长移植心脏的存活时间，二者具有协同作用。