尿转化生长因子-β1及Ⅳ型胶原与肾内微型癥积的相关性研究

目的：通过无创检测方法早期发现肾内微型癥积。方法：对98例肾活检的患者进行中医辨证分型;检测血／尿TGF-β1、尿ColⅣ、Scr、Ccr、24h尿蛋白排泄;对肾组织运用CMIAS计算机病理图像分析系统作半定量测定;观察尿TGF-β1、ColⅣ水平,与肾硬化程度、中医辨证间的相关性。结果：（1）肾病患者尿TGF-β1、ColⅣ明显高于健康人（P〈0．01）。（2）尿TGF-β1、ColⅣ与肾小球基质基底膜面密度、肾间质纤维化程度、间质浸润细胞数呈正相关（P〈0．05）,与尿ColⅣ呈负相关（P〈0．05）。随着硬化程度加重尿TGF-β1、ColⅣ水平逐级增高。（3）尿TGF-β1、ColⅣ分别与Scr正相关,与Ccr负相关（p〈0．01）;与血TGF-β1、24h尿蛋白定量无关。（4）在轻度肾硬化组,Scr和Ccr尚正常时尿TGF-β1、ColⅣ已高于正常组（P〈0．01）,尿ColⅣ敏感程度要高于尿TGF-β1和Ccr。（5）98例肾脏病患者的中医辨证以脾肾气虚型为主,占66．3％,以传统“四诊”辨为兼瘀血证者仅占8例（8．16％）,肾硬化均属于重度,肾功能已减退,尿TGF-β1、ColⅣ水平显著高于无瘀血证者。结论：尿TGF-β1、ColⅣ能早于Scr和Ccr的异常反映肾硬化及硬化程度,不受血TGF-β1和24h尿蛋白定量的影响,可以作为监测肾硬化及其进展的一项无创性早期标志性指标,以尿ColⅣ更为敏感;同时揭示肾微癥积的病因为正虚邪郁,中医传统的宏观辨证加上微观辨证可明显提高辨证的准确性,尿TGF-β1、ColⅣ可以作为中医微观辨证的一项量化指标早期诊断肾内微癥积,监测病情的动态变化,指导早期应用消瘕散积中药防治肾硬化。     

细胞因子及其受体基因多态性与Ⅲ型前列腺炎关系的初步探讨

目的:探讨细胞因子及其受体基因多态性与Ⅲ型前列腺炎发病的关系。方法:我院泌尿外科门诊Ⅲ型前列腺炎患者24例,年龄24~40岁,平均31岁,51例健康志愿者为正常对照组,年龄22~40岁,平均28岁。采用序列特异性引物聚合酶链反应(SSP-PCR)方法检测受试者外周血13种细胞因子和细胞因子受体22个位点的基因型。结果:患者和对照组比较,IL-10(-819 C/T)位点T/T基因型(62.5%vs31.3%)多见,IL-10(-592 C/A)位点A/A基因型(62.5%vs31.3%)多见;IL-10(-1082,-819,-592)位点ATA单倍体型多见(75.0%vs55.9%),ATA/ATA二倍体基因型多见(62.5%vs31.2%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:抗炎细胞因子IL-10基因多态性与Ⅲ型前列腺炎发病有关。     

重组人内皮型一氧化氮合酶基因转染对增生性瘢痕成纤维细胞的影响

目的 了解重组人内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因转染人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFb)的可行性,以及转染后一氧化氮(NO)的生成和Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成情况. 方法体外构建人eNOS真核表达载体.取体外培养的人HSFb进行转染实验,根据细胞培养液中所加质粒不同分为pcDNA3.0空载体组、pcDNA3.0-eNOS转染组.另设未转染组,细胞按常规培养.采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞eNOS及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达.硝酸还原酶法测定NO含量. 结果细胞转染后eNOS显著表达,pcDNA3.0-eNOS转染组eNOS mRNA相对表达量为5.92±0.21,明显高于pcDNA3.0空载体组(0.98±0.13,P<0.05);pcDNA3.0-eNOS转染组Ⅰ型胶原mRNA相对表达量为0.76±0.15,Ⅲ型胶原mRNA相对表达量为0.79±0.08,均明显低于pcDNA3.0空载体组(0.98±0.15、1.02±0.12,P<0.05).pcDNA3.0-eNOS转染组NO含量为(36.1±0.8)μmol/L,明显高于pcDNA3.0空载体组(28.4±1.0)μmol/L和未转染组[(27.7±1.3)μmol/L,P<0.01]. 结论 HSFb可作为eNOS基因转染的靶细胞,转染的细胞能表达eNOS并产生NO,并且对细胞的胶原合成功能有抑制作用.     

胶原Ⅲ肾小球病家系报道

目的 了解胶原Ⅲ肾小球病临床表现、病理特点和遗传方式。方法 总结分析2例通过肾脏病理确诊为胶原Ⅲ肾小球病的同胞兄弟临床、病理资料以及家系调查结果。 结果 2例患者分别为33、34岁男性，发病时为32、31岁，临床均表现为大量蛋白尿（１例为肾病综合征）、高血压、肾功能不全（Scr分别为128、313 μmol／Ｌ），均有左心室肥厚，无血尿、骨骼改变和其他肾外体征。血浆前胶原Ⅲ浓度均异常增高（＞50 ng／Ｌ）。光镜均表现为系膜区明显增宽，肾小球基底膜（GBM）增厚，部分呈假双轨改变，免疫荧光均为阴性。电镜下GBM弥漫增厚，内皮细胞侧及系膜区可见大量粗大的平行排列成束胶原纤维沉积，直径在60～100 ｎｍ之间。Ⅲ型胶原免疫荧光均为强阳性，沿GBM和系膜区沉积。家系调查显示该同胞兄弟父母为近亲婚配，其同胞妹妹无临床肾脏改变，但其血浆前胶原Ⅲ同样显著升高（＞50 ng／Ｌ）。 结论 家族性胶原Ⅲ肾病罕见，家系调查符合常染色体隐性遗传方式，国内目前尚无胶原Ⅲ肾小球病家系报道。     

两种方法治疗垂直不稳定型股骨颈骨折的近期疗效对比

目的评价单纯空心螺钉与3枚空心钉加内侧支撑钢板两种方式处理股骨颈Pauwels Ⅲ型骨折的近期治疗效果。方法选取锦州地区55例股骨颈Pauwels Ⅲ型骨折患者,随机分为空心加压螺钉组30例（A组）,3枚空心螺钉+支撑钢板组25例（B组）。记录术后髋关节Harris评分,对比各项手术指标、愈合时间、复位质量、股骨头坏死与骨不连等并发症的发生情况。结果A组手术时间（68.73±4.91）min,低于B组（110.76±5.85）min;A组术中出血量（69.47±5.15）mL,低于B组（110.92±10.10）mL;A组的骨折愈合时间（5.03±0.47）个月,高于B组（4.37±0.56）个月;差异均有统计学意义（P<0.05）。两组内固定失效和复位情况的对比,B组优于A组（P<0.05）;在股骨头坏死和骨折不愈合方面的比较,A组高于B组（P>0.05）。术后第1、3个月的Harris分值,A组为（70.67±1.88）分、（74.83±3.69）分,低于B组（71.60±1.78）分、（76.60±3.10）分,差异无统计学意义（P>0.05）;术后第6、12个月的Harris分值,A组为（78.97±1.88）分、（88.17±3.36）分,低于B组（80.08±1.93）分、（92.04±3.72）分,差异有统计学意义（P<0.05）。结论采用空心钉+支撑钢板治疗骨折线较垂直的股骨颈Pauwels Ⅲ型骨折的效果优于单纯3枚空心钉,拥有骨折复位质量好、更加牢靠的固定、有效抵抗垂直剪切力、缩短愈合时间,患髋功能恢复好等优点。     

知母饮片炮制前后黄酮类和皂苷类成分变化研究

目的:测定知母饮片炮制前后3个黄酮类和2个皂苷类成分变化。方法:采用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)测定3个黄酮类成分,色谱柱为岛津Intetsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%冰醋酸,梯度洗脱,进样量20μL,流速1.0 mL/min,柱温30℃;采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定2个皂苷类成分,色谱柱为岛津Intetsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%冰醋酸,梯度洗脱,进样量10μL,流速1.0 mL/min,氮气流量2.5 mL/min,蒸发温度80℃。结果:知母饮片炮制后知母皂苷BⅡ、新芒果苷、芒果苷含量下降,知母皂苷AⅢ含量上升,异芒果苷含量相对稳定。结论:知母饮片炮制后部分知母皂苷BⅡ会转化成知母皂苷AⅢ,新芒果苷、芒果苷会转化成其他成分,异芒果苷结构相对稳定,不易转化成其他成分。     

The relationship between plasma apolipoprotein A-Ⅳ levels and coronary heart disease

Objective To evaluate the relationship between plasma apoA-Ⅳ levels and coronary atheros clerosis and to explore its relation to other risk factors.Methods Using ELISA techniques, plasma apoA-Ⅳ levels were quantified in 181 patients w ho underwent coronary angiography (CAG).Patients were divided according to the ir coronary status into a coronary heart disease (CHD) group (stenotic lesion on CAG, n=118) and a control group (normal CAG, n=63).The severity of athero sclerosis was assessed by stenosis scoring of the different lesions.Other para meters, including apoA-Ⅰ,apoB, Lp(a), HDL-C, LDL-C, TG, and T C, were measured as well.Univariate, logistic regression analyses were used to define the relationship between coronary atherosclerosis and plasma apoA-Ⅳ levels.Results When compared with the control group, plasma apoA-Ⅳ levels were found to be lo wer in the CHD group.There was a weak negative correlation between plasma apoA -Ⅳ levels and the severity of coronary atherosclerosis.ApoA-Ⅳ was found to be a relatively independent risk factor for CHD.We also found a positive corr elation between apoA-Ⅳ and triglyceride levels.Conclusions ApoA-Ⅳ may be important in the prediction of CHD and coronary atherosclerosis severity.It may also play an important role in the metabolism of triglycerides .     

尾加压素Ⅱ和转化生长因子β1在糖尿病大鼠肾脏的表达及其意义

目的：观察尾加压素Ⅱ（UⅡ）和转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白在糖尿病大鼠肾小管上皮细胞和肾小球的动态表达规律及其在糖尿病肾病发病中的作用。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组及糖尿病2、4、8和12周组。糖尿病大鼠模型用单次腹腔注射链脲菌素（55 mg•kg^-1）诱发。生化法测定血糖、血和尿肌酐、尿白蛋白和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）含量。免疫组织化学法检测肾脏UⅡ、TGF-β1、纤连蛋白（FN）和Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）的表达。结果：糖尿病各组大鼠的生化指标均明显高于对照组（P<0.05）。糖尿病大鼠肾小管上皮细胞和肾小球可见UⅡ和TGF-β1阳性染色颗粒,对照组未见该阳性染色颗粒。与糖尿病2周时比较,糖尿病4、8和12周组UⅡ和TGF-β1表达（阳性染色肾小管数和细胞数）随着病程进展进行性增加(P<0.05),肾小管上皮细胞UⅡ的表达水平与尿NAG含量呈正相关（r=0.895,P<0.01）。糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞UⅡ与TGF-β1的表达水平呈正相关（r=0.769,P<0.01）。糖尿病8和12周组大鼠肾脏FN和ColⅣ表达明显高于对照组（P<0.05）。结论：糖尿病大鼠肾小管上皮细胞和肾小球UⅡ及TGF-β1蛋白表达均明显增加,提示其在糖尿病肾病的肾小管损害及细胞外基质积聚中可能起一定作用。     

肌性斜颈中基质金属蛋白酶-1与Ⅲ型胶原的表达关系

目的观察先天性肌性斜颈胸锁乳突肌Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的表达情况,探讨先天性肌性斜颈胸锁乳突肌纤维化的发生机制。方法免疫组织化学染色法观察先天性肌性斜颈病变组和正常对照组胸锁乳突肌细胞外基质中Ⅲ型胶原及MMP-1的表达情况。结果免疫组织化学染色法显示Ⅲ型胶原在对照组表达极少,在肌肉型组和纤维型组中表达明显增加,有显著性差异(P<0.01)。MMP-1在对照组中有少量的表达,在肌肉型组中表达略有增加,相比无统计学意义(P>0.05);MMP-1在纤维型组中表达极少,与对照组相比有统计学意义(P<0.05),与肌肉型组相比有显著性差异(P<0.01)。结论先天性肌性斜颈胸锁乳突肌的纤维化的程度与Ⅲ型胶原增生的量有关,而Ⅲ型胶原增生的程度与MMP-1减少有一定关系。     

一种新的GPⅡb基因540A缺失移码突变引起的血小板无力症

目的:为了明确1例血小板无力症患者发生的分子机制.方法:用40对引物对血小板无力症患者GPⅡ/皿a (αⅡbβ3)基因的45个外显子序列及其剪切点进行全长扩增,用SSCP-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对扩增产物进行基因突变筛选,将筛选出的PCR产物进行直接测序.结果:患者GPⅡb基因Exon4的PCR产物经SSCP-聚丙烯酰胺凝胶电泳后出现异常条带,PCR产物直接测序显示GPⅡb基因540A缺失导致后面的氨基酸编码发生移码突变.结论:GP Ⅱb基因540A缺失发生移码突变是GP Ⅱb基因的一种新突变,是血小板无力症发病的分子基础之一.