低氧复合氰化钠中毒对兔动脉血超氧化物歧化酶、还原型谷胱甘肽和丙二醛的影响

目的探讨高原低氧复合氰化钠中毒对兔动脉血氧化应激的影响。方法以低压氧舱模拟4000m高原急性缺氧环境。20只家兔按随机数字表法分为4组，高原高、低剂量组，平原高、低剂量组，每组5只。高原缺氧组动物置于低压氧舱内预处理72h后进行实验，平原组动物于普通实验环境下进行。以戊巴比妥钠（40mg／kg，腹腔注射）麻醉动物后进行股动脉插管，注射氰化钠（1．5、2mg／kg，腹腔注射）。分别于中毒前10min和中毒后5、10、15、20、30、60、120、180min经插管采血并分离血浆，以生化方法测定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性、还原型谷胱甘肽（reduced glutathione，GSH）和丙二醛（malondildehyde，MDA）含量。结果平原动物NaCN中毒60min后血浆MDA含量增加（P〈0．01），SOD活力和GSH含量下降（P〈0．05，P〈0．01）。高原缺氧72h后也使MDA含量增加（P〈0．01），SOD活力和GSH含量下降（P〈0．05，P〈0．01），高原缺氧动物注射氰化钠30min后上述指标变化较平原动物更为显著（P〈0．01）。结论单纯缺氧和单纯氰化钠中毒均明显改变氧化应激指标，二者可能具有联合效应。     

低氧对鼠雪旺氏细胞增殖的影响

目的观察低氧对鼠雪旺氏细胞体外增殖的影响,为雪旺氏细胞扩增培养探索新方法。方法原代分离培养雪旺氏细胞并鉴定,将培养至第三代的细胞分为3组,分别为对照组,10%02组和3%O2组。对各组细胞记数;测定培养液中氧含量和乳酸浓度及各组细胞的增殖指数。结果随着环境氧浓度的下降,细胞培养液中的氧含量也逐渐下降(P<0.05),而乳酸浓度逐渐升高(P<0.05)。低氧组雪旺氏细胞数目比常氧组明显增加,尤以10%O2组更为明显(P<0.05),3%O2组在低氧1d和2d时增殖指数低于常氧组,低氧4时,增殖指数增加;而10%O2组增殖指数一直高于常氧组(P<0.05)。结论轻中度低氧有利于鼠雪旺氏细胞的体外增殖。     

被动吸烟与甲醛及通风不良对小白鼠影响的实验观察

目的分析三种有害室内因素:被动吸烟、甲醛及通风不良对小白鼠机体的影响。方法将32只小白鼠随机分为4组:被动吸烟组、甲醛组、通风不良组和空白对照组,每组8只,对前三组分别进行通香烟、通甲醛、不通风处理,空白组处于通风正常环境,实验持续4小时,过程中每隔1小时所有小鼠进行独木桥和通电迷宫试验及耐缺氧试验。结果t检验和方差分析显示,被动吸烟组过独木桥和穿行迷宫的时间比其他组显著延长,p<0.05,具有统计学意义。结论被动吸烟对中枢神经系统有严重的毒性作用。甲醛对中枢神经也有一定损伤作用。通风不良的环境,导致脑供氧不足而影响精神状态及平衡感下降。     

罗汉果皂苷抗疲劳及耐缺氧作用

目的:考察罗汉果皂苷的抗疲劳、耐缺氧作用.方法:将小鼠随机分为空白组,模型组,阳性对照组(红景天胶囊570 mg· kg-1),罗汉果皂苷高剂量( 300 mg· kg-1),中剂量(150 mg·kg-1)及低剂量组(75 mg·kg-1).连续灌胃给药21 d后采用力竭游泳实验和常压耐缺氧实验,考察罗汉果皂苷对小鼠的抗疲劳和耐缺氧能力的影响,并测定服用罗汉果皂苷后肝糖原和肌糖原的变化,及运动后血尿素氮、血乳酸含量和乳酸脱氢酶活力的变化.结果:罗汉果皂苷显著延长小鼠力竭游泳时间(P＜0.05),150,75 mg·kg-1组小鼠耐缺氧存活时间显著延长(P＜0.05).服用罗汉果皂苷后,小鼠肝糖原和肌糖原含量均显著增加(P ＜0.001),运动后血尿素氮和乳酸生成显著减少(P ＜0.001),乳酸脱氢酶活性显著增强(P＜0.05).结论:罗汉果皂苷能显著增强小鼠的抗疲劳和耐缺氧能力,其作用可能与增加机体糖原储备和加速乳酸代谢有关.     

金雀异黄素对缺氧诱导的人ARPE-19细胞VEGF表达的抑制作用

目的:研究长期缺氧对体外培养的人ARPE鄄19细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的诱导作用,以及金雀异黄素(genistein,Gen)对其表达的影响初步研究。方法:使用半定量RT鄄PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ARPE鄄19细胞中VEGFmRNA和蛋白的表达,分析不同浓度Gen以及PD98059、TyrphostinA25对ARPE鄄19细胞缺氧24h诱导的VEGF表达的影响。结果:①正常对照组有少量VEGF表达,缺氧24h可明显提高ARPE鄄19细胞VEGFmRNA和蛋白的表达,分别为9.566±1.528和2.636±0.499倍;②Gen可明显抑制缺氧诱导ARPE鄄19细胞中VEGFmRNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性(P<0.05);③PD98059、TyrphostinA25也可抑制低氧诱导的VEGF的产生,但抑制作用没有Gen(200μmol/L组)明显。结论:Gen可抑制长期缺氧诱导的ARPE鄄19细胞VEGF表达,并可能是通过抑制p42/p44MAPK途径和HIF鄄1途径共同抑制VEGF的产生,提示Gen对视网膜新生血管的形成具有预防和潜在的临床治疗价值。     

红景Ⅰ号方对低氧大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

目的:观察红景Ⅰ方对低氧状态下大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响。方法:将120只SD大鼠随机分为常氧组、低氧模型组、前列腺E1组、红景Ⅰ号方低剂量组、红景Ⅰ号方中剂量组、红景Ⅰ号方高剂量组,每组20只,分别测定各组大鼠勃起情况、RT-PCR测定α-actin、OPN的相对表达量。结果:造模6周后,与常氧组比较,模型组勃起次数明显降低(P0.01),低氧实验动物模型建立成功。与常氧组比较,低氧模型组的α-actin含量显著降低(P0.01),OPN含量明显升高(P0.01)。与低氧模型组比较,高中低剂量的红景Ⅰ号组α-actin含量上升(P0.05),其中高中剂量组含量上升明显(P0.01);OPN含量降低(P0.05),其中高中剂量组含量下降明显(P0.01)。结论:红景Ⅰ号方有抑制海绵体平滑肌细胞表型转化的作用。     

密蒙花方对缺氧状态下人血管内皮细胞细胞周期的影响

目的探讨密蒙花方对缺氧状态下人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vascular endothelialcell,HUVEC)细胞周期的影响。方法体外培养HUVEC,采用二氯化钴(CoCl2)建立细胞化学缺氧模型,采用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测不同浓度密蒙花方水提液(10、20、40 mg/ml)对缺氧状态下HUVEC细胞周期的影响。结果①缺氧组较正常组G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,差异具有统计学意义(P<0.01);②各密蒙花方组均较缺氧组G0/G1期细胞比例增高,S期细胞比例减少(P<0.01),组间具有浓度依赖关系(P<0.01);③密蒙花方组在G0/G1期前还出现了指示细胞凋亡的亚G1期凋亡峰,表明密蒙花方对缺氧状态下的HUVEC具有促凋亡作用。结论密蒙花方抑制HUVEC增殖的作用与阻滞细胞由G1期进入S期,促进细胞凋亡有关。     

山柰酚和槲皮素对乳鼠心肌缺氧复氧及过氧化损伤的保护作用

目的:观察山柰酚和槲皮素对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的干预作用并探讨其作用机理。方法:取大鼠新生乳鼠心肌细胞做原代培养,MTT法检测细胞活力,确定药物作用安全范围;考察药物对心肌细胞缺氧复氧损伤模型LDH漏出的改变;复制心肌细胞过氧化氢损伤模型,观察药物对细胞活力及上清液中LDH含量的影响。结果:山柰酚和槲皮素125μg/ml以下对心肌细胞活力无明显影响。山柰酚或槲皮素100、50、25、12.5μg/ml均可以降低缺氧复氧损伤后心肌细胞的LDH漏出率(P<0.01或P<0.05),其中山柰酚100、50、25μg/ml浓度,槲皮素以50、25、12.5μg/ml浓度作用较佳。山柰酚、槲皮素对心肌细胞过氧化氢损伤均有显著的抑制作用,均呈浓度依赖性,并可显著降低过氧化氢损伤所致的LDH释放。结论:山柰酚和槲皮素具有显著的抗心肌细胞缺氧损伤的能力,与其抗氧化的药理作用有关。     

低氧对大鼠颏舌肌成肌细胞分化的影响

目的:通过观测低氧环境对体外培养大鼠颏舌肌成肌细胞分化及低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响,探讨低氧引起颏舌肌损伤的机制以及HIF-1α在其中的作用。方法:根据环境氧浓度不同,将体外培养的原代大鼠颏舌肌成肌细胞分为正常氧浓度组(NC)(21%)和低氧组(HG)(1%),分别诱导分化0 d、1 d、3 d、6 d。采用RT-PCR及Western blotting检测生肌调节因子(MyoD)、肌源性决定因子(myogenin)、肌球蛋白重链(MHC)以及HIF-1α的mRNA及蛋白表达;倒置显微镜下观察成肌细胞分化的形态变化。结果:在颏舌肌成肌细胞分化过程中,两种氧状态下HIF-1αmRNA表达均没有显著变化(P>0.05),但蛋白表达逐渐上调;低氧对MyoD、myogenin、MHC的mRNA(P<0.05)和蛋白表达有显著的抑制作用,致肌管形成延迟;低氧使HIF-1αmRNA(P<0.05)和蛋白显著上调。结论:低氧环境可能是通过上调HIF-1α表达抑制大鼠颏舌肌成肌细胞的分化,从而抑制颏舌肌损伤的修复。     

Nicotine and lipopolysaccharide stimulate the production of MMPs and prostaglandin E(2) by hypoxia-inducible factor-1α up-regulation in human periodontal ligament cells

Kim Y‐S, Shin S‐I, Kang K‐L, Herr Y, Bae W‐J, Kim E‐C. Nicotine and lipopolysaccharide stimulate the production of MMPs and prostaglandin E₂ by hypoxia‐inducible factor‐1α up‐regulation in human periodontal ligament cells. J Periodont Res 2012; 47: 719–728. © 2012 John Wiley & Sons A/S Background and Objective: Although hypoxia‐inducible factor 1α (HIF‐1α) is up‐regulated in the periodontal pockets of periodontitis patients, the expression and precise molecular mechanisms of HIF‐1α remain unknown in human periodontal ligament cells (PDLCs). The aim of this study was to explore the effects, as well as the signaling pathway, of nicotine and lipopolysaccharide (LPS) on the expression of HIF‐1α and on the production of its target genes, including cyclooxygenase‐2 (COX‐2)‐derived prostaglandin E₂ (PGE₂), MMP‐2 and MMP‐9 in PDLCs. Material and Methods: The expression of COX‐2 and HIF‐1α proteins was evaluated using western blotting. The production of PGE₂ and MMPs was evaluated using enzyme immunoassays and zymography, respectively. Results: LPS and nicotine synergistically induced the production of PGE₂, MMP‐2 and MMP‐9, and increased the expression of MMP‐2, MMP‐9, COX‐2 and HIF‐1α proteins. Inhibition of HIF‐1α activity by chetomin or knockdown of HIF1α gene expression by small interfering RNA markedly attenuated the production of LPS‐ and nicotine‐stimulated PGE₂ and MMPs, as well as the expression of COX‐2 and HIF‐1α. Furthermore, pretreatment with inhibitors of COX‐2, p38, extracellular signal‐regulated kinase, Jun N‐terminal kinase, protein kinase C, phosphatidylinositol 3‐kinase and nuclear factor‐kappaB decreased the expression of nicotine‐ and LPS‐induced HIF‐1α and COX‐2, as well as the activity of PGE₂ and MMPs. Conclusion: These data demonstrate novel mechanisms by which nicotine and LPS promote periodontal tissue destruction, and provide further evidence that HIF‐1α is a potential target in periodontal disease associated with smoking and dental plaque.