哮喘大鼠TGF—β1／Smad3信号通路中黄芪与激素调控的对比研究

目的：观察黄芪、糖皮质激素对哮喘大鼠TGF-β1／Smad3信号通路及哮喘气道重塑的对比调控作用。方法SPF级雄性SD大鼠50只随机分为5组,分别为对照组（A组）、哮喘组（B组）、布地奈德组（C组）、地塞米松组（D组）、黄芪组（F组）,每组10只。用卵白蛋白（OVA）致敏与激发建立大鼠哮喘模型。应用图像分析技术测定肺内支气管壁厚度（Wat）及平滑肌厚度（Wam）等重塑指标;免疫组化法检测肺组织TGF—β1、P—Smad3蛋白的表达;酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中TGF—β1的浓度。结果：干预组大鼠Wat、Warn较哮喘组显著性降低（均P〈0．01）,C组、D组Wat比较无显著性差异,但均低于黄芪组（均P〈0．01）;C组、D组Wam比较无显著性差异,D组Wam较F组有降低;免疫组化染色阳性结果呈棕黄色,TGF-β1蛋白表达于胞浆,P—Smad3蛋白表达于胞浆和胞核,主要表达于支气管上皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞及散在的炎性细胞。干预组TGF-β1的蛋白表达均显著低于哮喘组（P〈0．05或P〈0．01）;C组、D组、F组比较无显著性差异,P—Smad3蛋白表达：各干预组均显著低于哮喘组（均P〈0．01）,C组、F组之间无显著性差异,D组较F组降低（P〈0．01）;干预组血清、BALF中TGF—β1浓度与哮喘组比较有降低（均P〈0．01）,BALF中C组、D组、F组比较无显著性差异,血清中C组、D组无显著性差异,但均低于F组（P〈0．05或P〈0．01）。结论糖皮质激素、黄芪可通过调控TGF-β1／Smad3信号通路而拮抗气道重塑,但黄芪效果比糖皮质激素稍差。     

不同剂量的黄芪桂枝五物汤加减治疗糖尿病周围神经病变患者的对比研究

目的比较不同药物剂量的黄芪桂枝五物汤加减治疗糖尿病周围神经病变(DPN)患者的临床疗效。方法将68例DPN患者随机分为观察组和对照组各34例,两组均给予基础治疗及黄芪桂枝五物汤加减,其中对照组药物剂量按1两等于9g计算;观察组药物剂量按1两等于15g,两组均每日1剂,连用8周。于治疗前后分别检测肝肾功能及腓神经传导速度(NCV)变化,并判定临床疗效。结果观察组总有效率为91.2%,对照组总有效率为70.6%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);两组患者治疗后NCV均较治疗前明显提高,差异有统计学意义(P<0.05),治疗后两组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗前后均无肝、肾功能异常及其他不良反应。结论药物剂量按1两等于15g换算的黄芪桂枝五物汤加减可明显提高DPN的临床疗效,并优于药物剂量按1两视为9g计算,而且未见明显毒副作用。     

四种中药煎剂和雪莲花醇提液对骨髓间充质干细胞增殖活性的影响

背景：中药可能具有促进骨髓间充质干细胞增殖的作用。 目的：观察单味中药黄芪、丹参、仙灵脾和复方右归饮煎剂及雪莲花醇提液对大鼠骨髓间充质干细胞体外培养增殖活性的影响。 方法：雪莲花乙醇浸泡后定容,其他单味和复方中药水煎定容,高压灭菌。取大鼠股骨和肱骨,分离骨髓间充质干细胞,常规培养传代3次后,加入煎剂及雪莲花醇提液。其浓度分为10-2,10-3,10-4及10-5,作用3 d后用四甲基偶氮唑盐法测定细胞活力。 结果与结论：黄芪煎剂和右归饮煎剂及雪莲花醇提液4个浓度组均可促进骨髓间充质干细胞增殖(P < 0.05)。提示雪莲花醇提液、右归饮煎剂和黄芪煎剂均具有促进大鼠骨髓间充质干细胞体外培养增殖活性的作用。     

黄芪提取过程总皂苷质量浓度的在线监测

目的 利用近红外光谱分析技术对黄芪提取过程进行在线监测,实时反映药效成分的溶出信息.方法 利用远程光纤流通池在线采集黄芪提取过程中提取液的近红外光谱,同时采集提取液样品,利用HPLC-MS方法测得提取液中黄芪皂苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅰ和黄芪甲苷4种成分的质量浓度作为对照值,利用偏最小二乘法建立4种成分及黄芪总皂苷的定量分析模型,将所建的黄芪总皂苷定量分析模型用于黄芪提取过程的在线分析,实时反映提取液中黄芪总皂苷的质量浓度信息.结果 黄芪提取液中4种皂苷的近红外定量分析模型相关系数分别达到0.9876、0.9640、0.8571、0.9816,黄芪总皂苷定量分析模型的相关系数为0.9932,校正均方差(RMSEC)为5.94,内部交叉验证的相关系数为0.9766,交叉验证均方差(RMSECV)为11.1.将黄芪总皂苷定量分析模型用于3个批次提取过程的在线监测,能够及时准确地反映提取液中黄芪总皂苷的质量浓度信息.结论 利用本实验所建立的方法,可以实现以黄芪总皂苷为检测指标,对黄芪提取过程的在线监测,为黄芪提取过程的终点判断和工艺优化提供参考.     

Synergistic interaction between Astragali Radix and Rehmanniae Radix in a Chinese herbal formula to promote diabetic wound healing

Ethnopharmacological relevance

Astragali Radix (AR) and Rehmanniae Radix (RR) are two traditional Chinese medicines widely used in China for treating diabetes mellitus and its complications, such as diabetic foot ulcer.

Aim of study

In our previous study, a herbal formula NF3 comprising AR and RR in the ratio of 2:1 was found effective in enhancing diabetic wound healing in rats through the actions of tissue regeneration, angiogenesis promotion and inflammation inhibition. The aims of the present study were to investigate the herb–herb interaction (or the possible synergistic effect) between AR and RR in NF3 to promote diabetic wound healing and to identify the principal herb in the formula by evaluating the potencies of individual AR and RR in different mechanistic studies.

Materials and methods

A chemically induced diabetic foot ulcer rat model was used to examine the wound healing effect of NF3 and its individual herbs AR and RR. For mechanistic studies, murine macrophage cell (RAW 264.7) inflammation, human fibroblast (Hs27) proliferation and human endothelial cell (HMEC-1) migration assays were adopted to investigate the anti-inflammatory, granulation formation and angiogenesis-promoting activities of the herbal extracts, respectively.

Results

In the foot ulcer animal model, neither AR nor RR at clinical relevant dose (0.98 g/kg) promoted diabetic wound healing. However, when they were used in combination as NF3, synergistic interaction was demonstrated, of which NF3 could significantly reduce the wound area of rats when compared to water group (p < 0.01). For anti-inflammation and granulation formation, AR was more effective than RR in inhibiting lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide production from RAW 264.7 cells and promoting Hs27 fibroblast proliferation. In the aspect of angiogenesis promotion, only NF3 promoted cell migration of HMEC-1 cells.

Conclusions

AR plays a preeminent role in the anti-inflammatory and fibroblast-proliferating activities of NF3. The inclusion of RR, however, is crucial for NF3 to exert its overall wound-healing as well as the underlying angiogenesis-promoting effects. The results of present study justified the combined usage of AR and RR in the ratio of 2:1 as NF3 to treat diabetic foot ulcer and illustrated that AR is the principal herb in this herbal formula.     

黄芪、生地黄配合糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮的临床研究

目的 观察黄芪、生地黄配合糖皮质激素(激素)治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的疗效及对相关实验室指标的影响.方法 按随机数字表法将72例SLE患者随机分为两组各36例,治疗组在常规治疗的基础上加用药对黄芪、生地黄治疗;对照组应用强的松、环磷酰胺为主治疗,均治疗6个月,比较两组患者相关临床、实验室指标的变化.结果 治疗组完成治疗27例、脱失9例,对照组完成治疗34例、脱失2例.至观察终点,治疗组强的松用量( 15.41±7.65) mg/d低于对照组( 17.25±8.83) mg/d,但差异无统计学意义(t=0.85,P＞0.05).治疗组激素撤减量总量为(50.12±12.53) mg,略高于对照组(48.96±13.71) mg,两组激素撤减量比较,差异无统计学意义(t=0.34,P＞0.05);治疗过程中,治疗组因病情反复需加量使用激素者(15.92％)明显低于对照组(38.24％),差异有统计学意义(x2=3.24,P＜0.05).两组不良反应柯兴氏征、感染、胃肠道出血、心血管异常的发生率比较,差异无统计学意义(x2分别为0.42,0.98,0.01,0.03,P均＞0.05),但失眠、潮热及虚汗等,治疗组明显低于对照组(x2=4.24,5.93,P＜0.05).两组患者治疗后SLEDAI积分、血沉、C-反应蛋白、血补体3、血免疫球蛋白G比较,差异无统计学意义(t值分别为2.16,1.04,1.18,0.26,1.61,P均＞0.05),治疗组24h尿蛋白定量(1.06±0.12) g/L低于对照组(1.42±0.54) g/L (t=3.78,P＜ 0.05).结论 药对黄芪、生地黄配合糖皮质激素治疗SLE,疗效增益不明显,但可减少激素的部分副作用,有利于激素的平稳撤减.     

基于代谢组学的苍耳子配伍黄芪后减毒作用研究

目的:利用代谢组学技术,研究苍耳子及其配伍黄芪后,大鼠肝脏组织病理、血浆生化指标、尿液代谢图谱的变化,探讨黄芪配伍苍耳子对肝脏的减毒作用。方法:大鼠30只随机分为正常对照组、苍耳子组(21.0g/kg)、黄芪配伍组(31.5g/kg),灌胃给药,连续给药28d,收集大鼠24h尿液,测定尿液UPLC-TOF-MS图谱;肝门取血做生化检测;取肝脏做组织病理学检查。结果:给药28d,苍耳子组及黄芪配伍组较对照组ALT、AST均升高,肝组织出现病理改变;黄芪配伍组较苍耳子组ALT、AST降低,肝组织病变明显减轻。苍耳子组、黄芪配伍组尿液代谢物表型的聚类分布均偏离对照组,但黄芪配伍组尿液代谢物表型的聚类分布位于对照组与苍耳子组之间。结论:苍耳子(21.0g/kg)长期给药可造成肝功能的明显损害,配伍黄芪后(31.5g/kg)具有一定的减毒作用。     

苍耳子配伍黄芪的HPLC-DAD指纹图谱研究

目的 建立苍耳子配伍黄芪的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法,研究配伍对各单味药主要特征峰的影响.方法采用HPLC分析苍耳子、黄芪单煎及苍耳子配伍黄芪合煎样品,选用Diamonsil C18色谱柱(5 μm,250 mm×4.6 mm),以甲醇-0.2%甲酸水为流动相进行线性梯度洗脱,流量为0.8 mL/min,检测波长为260 nm.结果 建立了苍耳子配伍黄芪的HPLC指纹图谱,基本为两单味药特征峰的加和,无明显新特征峰的增加,但配伍合煎对某些成分的溶出有明显的相互抑制作用.结论 本方法简便、快捷,为临床类方的配伍应用以及制定复方质量标准提供了参考.     

高效液相色谱梯度洗脱法同时测定复方间苯二酚乳膏中两组分含量

 目的 建立高效液相色谱梯度洗脱法同时测定复方间苯二酚乳膏中间苯二酚和醋酸曲安奈德含量的方法。方法 使用ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈（A）-0.5%醋酸铵溶液（B）,进行梯度洗脱,0～3 min (25% A),3～5 min (25% A～55% A),5～15 min (55% A),柱温40 ℃,流速1.0 mL·min^-1,检测波长240 nm。结果 间苯二酚和醋酸曲安奈德的线性范围分别为： 103.18~515.90 μg·mL^-1(r=1.000 0),1.336~6.680 μg·mL^-1(r=0.999 4);平均回收率分别为99.3%,99.1%;RSD分别为0.62%,0.73%。结论 该方法简便,快速,准确,用于实际样品的测定,结果满意。     

黄芪预处理对缺血再灌注大鼠肾脏缝隙连接蛋白43表达的影响

目的:观察黄芪对缺血再灌注大鼠肾脏缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响,探讨Cx43在抗缺血再灌注损伤中的作用及其意义.方法:30只SD大鼠平均分为假手术组、缺血再灌注(IR)组、黄芪干预组(RA组),于再灌注2 h后检测肾组织匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;同时进行肾组织切片,经HE染色后进行中...