白藜芦醇对非小细胞肺癌细胞自噬和凋亡的影响

目的 探讨白藜芦醇（resveratrol,Res）对人非小细胞肺癌A549细胞自噬和凋亡的影响。方法 采用50 μmol/L白藜芦醇作用于非小细胞肺癌A549细胞（Res组）,对照组细胞用2% FBS的DMEM培养,培养24 h后采用倒置显微镜观察两组A549细胞形态的变化,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞自噬小体的形成,Western blot检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、活化caspase-3的表达。结果 A549细胞培养24 h后, 倒置显微镜下可见Res组细胞形状较对照组变圆,细胞排列稀疏;激光扫描共聚焦显微镜下可观察到Res组A549细胞胞浆内大量自噬体形成。Western blot检测结果显示,与对照组比较,Res组A549细胞自噬相关蛋白Beclin 1、LC3 Ⅱ/Ⅰ表达升高（0.151±0.032 vs 0.093±0.013,P=0.011;3.644±0.122 vs 1.903±0.054,P＜0.001）,p62蛋白表达下降（0.032±0.002 vs 0.061±0.005,P=0.021）;促凋亡相关蛋白Bax、活化caspase-3表达升高（0.633±0.061 vs 0.423±0.053,P=0.011;0.154±0.004 vs 0.111±0.011,P=0.002）,而抑制凋亡蛋白Bcl-2表达下降（2.437±0.055 vs 3.503±0.138,P＜0.001）。结论 白藜芦醇可通过促进非小细胞肺癌A549细胞过度自噬而诱导细胞凋亡。     

转小鼠TNFB基因大鼠脑缺血时细胞凋亡、c-JUN、p-JUN与p-JNK表达的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子B(TNFB)过度表达时对细胞凋亡、c-JUN、p-JUN与p-JNK表达的影响。方法:采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型,用TNFB、TUNEL、c-JUN、p-JUN与p-JNK免疫组化染色观察SD大鼠与转小鼠TNFB基因大鼠缺血1h再灌注24h时的细胞凋亡、c-JUN、p-JUN与p-JNK的表达。结果:与SD大鼠相比,转小鼠TNFB基因大鼠缺血1h再灌注24h后,脑组织凋亡细胞显著增多,c-JUN、p-JUN与p-JNK过度表达显著,以上指标变化均显著高于SD大鼠。结论:TNFB的过度表达加剧缺血性脑损伤,其机制可能为c-JUN、p-JUN与p-JNK的过度表达。     

P53和Bcl-2蛋白在喉鳞癌癌变过程中的表达及其临床病理意义

目的 :探讨喉鳞癌 (LSCC)癌变过程中P53和Bcl- 2表达的临床病理意义。方法 :用免疫组化S -P技术检测 2 0例喉正常粘膜 (LNM)、38例喉粘膜不典型增生 (LAH)和 50例LSCC中P53和Bcl- 2的表达情况。结果 :P53蛋白阳性染色局限于细胞核 ,Bcl- 2阳性表达定位于细胞浆。在LNM、LAH和LSCC中 ,P53阳性表达率分别为 0 0 % (0 / 2 0 )、52 6 % (2 0 / 38)和 62 0 % (31 / 50 ) ,组间比较有统计学意义 (χ2 =2 2 72 2　P =0 0 0 1 ) ;Bcl- 2阳性表达率分别为 5 0 % (1 / 2 0 )、76 3 % (2 9/ 38)和 50 0 %(2 5/ 50 ) ,组间比较亦有统计学意义 (χ2 =2 6 698　P =0 0 0 1 )。Bcl- 2在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级LSCC中阳性表达率分别为 1 1 1 % (1 / 9)、44 0 % (1 1 / 2 5)和 81 3 % (1 3/ 1 6) ,组间比较有统计学意义 (χ2 =1 2 0 54　P=0 0 0 2 ) ;在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组表达率分别为 66 7% (1 8/ 2 7)和 30 4% (7/ 2 3) ,组间比较亦有统计学意义 (χ2 =6 52 2　P =0 0 1 1 ) ,而P53与LSCC病理分级和淋巴结转移无关 (P >0 0 5)。在LAH和LSCC两组中 ,P53和Bcl- 2之间均呈负相关 (P <0 0 5)。结论 :P53和Bcl- 2异常表达是LSCC发生过程中的早期事件。Bcl- 2基因过表达与LSCC病理分级和淋巴结转移密切相关     

125I对脑胶质瘤P16基因的影响

目的 研究125I诱导人脑胶质瘤细胞SHG-44体内外凋亡的可能性及其对p16基因的影响.方法 体外培养SHG-44细胞,采用流式细胞仪法检测125I诱导SHG-44细胞凋亡及对细胞周期影响,采用免疫组化的办法,检测125I治疗前后的p16蛋白表达改变,采用立体定向的方法建立大鼠脑内人胶质瘤模型,1周后经MRI检测后,于肿瘤区接种125I,2周后复查MRI行接种前后肿瘤大小检测,3周后处死大鼠,取对照组及肿瘤周边组织及肿瘤组织行p16蛋白的免疫组化染色.结果 125I接种1周后核磁共振检查,脑内形成实体瘤;125I可以抑制肿瘤生长,诱导细胞凋亡,促进p16蛋白表达.结论 125I具有体内外抑制SHG-44细胞增殖,诱导凋亡的作用,其诱导凋亡机制可能与促进p16蛋白表达有关.     

聚乳酸作为脑植入剂载体的安全性初步研究

目的:考察缓释药物载体聚乳酸在脑内应用的安全性。方法:体外原代培养大鼠大脑皮层神经元,加入聚乳酸处理后通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞毒性,Hoechst33258染色检测细胞凋亡,并与正常对照组比较;自制聚乳酸空白片,植入大鼠颅内30d后,经行为能力测试、HE染色和Nissl染色检测聚乳酸对脑神经元及其功能的影响,并与假手术组、正常对照组比较。结果:与正常对照组比较,聚乳酸组神经元培养至第7、9、12天时,CCK-8吸光度值及细胞凋亡率均无显著差异;30d后聚乳酸空白片组与假手术组比较,脑组织有轻微炎症反应,但神经元数量和形态功能没有发生显著变化。结论:聚乳酸对体外培养的大脑皮层神经元抑制作用和诱导凋亡作用不显著,对脑内神经组织无明显毒性。     

低硒致乳鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的　为进一步探讨低硒与心肌损伤的关系,以及细胞凋亡是否参与心肌损伤及其机制。方法　用低硒合成饲料喂养昆明鼠,五周后交配,取其子代 ３ 周龄乳鼠心肌组织,采用ＴＵＮＥＬ法、透射电镜及免疫组化法等技术检测凋亡细胞及其相关基因。结果　低硒乳鼠心肌细胞有凋亡现象存在,而补硒组却未见类似现象。结论　低硒可以引起子代乳鼠心肌细胞发生凋亡     

针灸抗脑衰的实验研究

本文将 1 996年以来关于针灸抗脑衰实验研究的主要文献报道归纳整理 ,分为针刺的调节作用、艾灸的调节作用及其他疗法三个方面 ,陈述了目前这些疗法对神经内分泌系统调节作用的实验研究概况 ,并作了简要评述 ,对今后的研究提出了几点建议。     

茶多酚通过调节Akt通路诱导胰腺癌细胞凋亡

目的 观察茶多酚主要成分没石子儿茶素没石子酸酯( EGCG)诱导人胰腺癌Panc-1细胞凋亡过程中对Akt信号途径的调节作用.方法 以不同浓度EGCG (6.3、12.5、25.0、50.0 μmol/L)处理Panc-1细胞,用噻唑蓝(MTT)比色法检测其生长抑制作用,用琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡,用Western blot技术检测细胞中Akt分子(60 x103)的变化及Bad分子(23×103)的变化.结果 EGCG以时间及剂量依赖的方式抑制Panc-1细胞增殖并诱导Panc-1细胞凋亡(P<0.05).同时ECCG剂量依赖性降低了p-Akt( ser473)和p-Bad(ser136)蛋白的含量,而Akt总蛋白和Bad总蛋白无明显改变(P<0.05).结论 EGCG可通过抑制Akt信号通路并减轻该通路对Bad蛋白的阻断作用而诱导胰腺癌细胞凋亡.     

mitoKATP通道开放剂对高氧诱导人A549细胞凋亡的保护作用

目的：探讨mitoKATP通道开放剂二氮嗪对高氧诱导人A549细胞凋亡的保护作用和机制。方法：体外培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞（A549）,随机分为对照组、高氧组（换液后通入900 mL/L氧气和50 mL/L 二氧化碳高纯混合气,10 min后密闭培养）和二氮嗪组（用终浓度为100 μmol/L的二氮嗪培养液预处理24 h再进行高氧诱导）。3组分别于处理后12、24、48 h收集细胞进行检测。倒置相差显微镜下观察A549细胞形态,流式细胞仪检测48 h的细胞凋亡,免疫组化法检测细胞内Omi/HtrA2的表达。结果：与对照组相比,高氧组细胞受损明显,形态改变,细胞凋亡率增加（P<0.05）,胞浆Omi/HtrA2表达增多（P<0.05）。与高氧组相比,二氮嗪组细胞损伤状况明显得到改善,细胞生长状况明显好转,形态明显变好;胞浆Omi/HtrA2表达减少（P<0.05）,细胞凋亡率减少（P<0.05）。结论：mitoKATP通道开放剂二氮嗪具有降低Omi/HtrA2表达和A549细胞凋亡,从而减轻高氧诱导的肺损伤的作用。     

诱导型一氧化氮合酶在进展期胃腺癌介入化疗后的临床意义

目的探讨介入化疗后进展期胃腺癌细胞中诱导型一氧化氮合酶、凋亡、增殖、树突状细胞浸润的变化，并分析其临床意义。方法通过对术前行介入化疗的病人（介入组，56例）和直接进行手术根治的病人（对照组58例）术后肿瘤组织细胞中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、树突状细胞标志蛋白S-100（树突状细胞密度，DCS）的表达、细胞增殖核抗原Ki-67-LI的表达，原位末端标记技术TUNEL法检测胃腺癌细胞凋亡比例（AI），了解两组间iNOS、DCS、AI、Ki-67-LI的差别。结果介入组在有淋巴结转移者的iNOS阳性表达率为66．7％（12／18），高于淋巴结无转移者18．2％（4／22），两者差异有显著性意义（P=0．042）。介入组iNOS阳性表达率为28．6％（16／56），对照组iNOS阳性表达率为55．2％（32／58），两者差异有显著性意义（P=0．004）。DCs浸润的密度范围（1-50）／mm^2，平均为（6．09±5．36）／mm^2。对照组DCs（10．05±8．819）／mm^2高于介入组DCs（6．09±5．361）／mm^2，两者差异有显著性意义（P=0．005）。在两组中没发现AI、Ki-67-LI差异有显著性。结论iNOS的阳性表达促进进展期胃癌患者转移，而介入化疗后iNOS阳性表达明显下降，推测iNOS表达可评价化疗效果。