Fas、Fas配体、Fas相关死亡结构域蛋白、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶8和突变型P53蛋白在食管鳞癌患者中的表达

目的检测分析Fas、Fas配体（FasL）、Fas相关死亡结构域蛋白（FADD）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶8（caspase8）和突变型P53蛋白质在食管鳞癌中的表达,探讨这5种细胞凋亡相关蛋白质与食管鳞癌发生发展的关系。方法构建包含116例食管鳞癌患者的癌组织及相应癌旁正常食管鳞状上皮组织的组织芯片。应用免疫组织化学方法,检测鳞癌与鳞状上皮组织中Fas、FasL、FADD、caspase8和突变型P53蛋白质的表达,分析其表达差异与临床病理特征及预后的相关性。结果Fas在鳞癌组织中较正常鳞状上皮表达下降（阳性率分别为41．4％和95．7％,P〈0．001）。FasL、FADD在鳞癌组织（阳性率分别为76．7％和50％）较正常鳞状上皮（阳性率分别为39．7％和7．8％）表达上调（均P〈0．01）。caspase8在正常鳞状上皮表层细胞呈阳性表达,而在鳞癌组织中全部阴性。突变型P53蛋白质在正常鳞状上皮不表达,在鳞癌组织中呈弥漫表达（阳性率37．1％）。FADD阳性者无病生存率较低（P=0．0028）;而Fas、FasL、caspase8和突变型P53蛋白质的表达均与无病生存率无明显关系（均P〉0．05）。结论Fas、FasL、FADD、caspase8和突变型P53蛋白质与食管鳞癌发生发展密切相关,是食管鳞癌发生发展的重要标志物;其中FADD可作为食管鳞癌的预后相关标志物。     

荔枝核对小鼠S180、EAC肿瘤细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响研究

目的:研究荔枝核对小鼠S180、EAC肿瘤细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。方法:采用小鼠腋下接种瘤株的方法,复制EAC、S180及肝癌荷瘤动物模型。小鼠EAC、S180细胞与肝癌细胞混悬液分别用生理盐水按1∶1进行稀释,制成含瘤腹水混悬液。小鼠在给药前24h进行腋窝皮下接种,每只0·2mL,整个操作在无菌条件下60min内完成。连续给药10d,观察EAC、S180肿瘤和肝癌肿瘤细胞的生长情况。结果:荔枝核能够显著抑制EAC、S180肿瘤和肝癌肿瘤细胞的生长。结论:荔枝核具有抑制小鼠EAC、S180、肝癌细胞的作用;具有抑制小鼠S180、EAC体内、外细胞生长的作用;并能促进肿瘤细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤的作用。     

老年和青年大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的初步研究

目的探讨大鼠肺泡巨噬细胞(AM)在老年多器官功能衰竭(MOFE)肺启动形成过程中的作用。方法用酵母多糖腹腔注射复制大鼠MOFE模型。实验动物分为老年模型组、老年对照组、青年模型组和青年对照组4组,每组6只鼠。通过支气管肺泡灌洗和细胞贴壁的方法获取AM,用碘化丙啶染色流式细胞仪测定AM凋亡百分率,用Fluo3AM和Rhodamine123染色流式细胞仪测定AM胞内钙、线粒体膜电位。结果老年模型组AM凋亡率明显高于青年模型组(分别为434%±84%和242%±30%,P<001)。模型组与对照组相比,胞内游离钙浓度增加,而线粒体膜电位△Ψm降低。结论老年MOFE大鼠模型的AM的凋亡率大于青年大鼠模型,这可能是MOFE肺部感染后炎症不易控制以及肺部感染或肺损伤后容易引起MOFE的重要原因。AM胞内Ca2+浓度和线粒体膜电位的改变很可能是导致AM凋亡增加的重要原因。     

Morphological diversity of dying cells during regression of the human tail

During normal human development a number of transient structures form and subsequently regress completely. One of the most prominent structures that regress during development is the human tail. We report here a histological and ultrastructural study of cell death in the cranial and caudal (tail) parts of the neural tube in 4 to 6-week-old human embryos. Initially, the human tail is composed of tail bud mesenchyme which differentiates into caudal somites, secondary neural tube, notochord and tail gut. Later on, these structures gradually regress by cell death. During the investigated period, we observed two morphologically distinct types of dying cells. The well-described apoptotic type of cell death was observed only in the cranial neural tube that forms during primary neurulation. The other type of cell death characterized by necrotic morphology was observed in the tail mesenchyme and in the caudal neural tube that forms during secondary neurulation. This morphological diversity suggests that besides differences in origin and fate there are different mechanisms of developmental cell death between two parts of the human neural tube. We can speculate that the apoptotic type of cell death is associated with the precise control of cell numbers and that the other morphologically distinct type of cell death is responsible for the massive removal of transitory structures.     

益肾降浊冲剂对5/6肾切除大鼠残肾脂质蓄积和小管间质损伤的影响

目的：观察益肾降浊冲剂对5/6肾切除大鼠残肾小管间质损伤的保护作用并探讨其机制。方法：SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、他汀组、益肾降浊冲剂组（n=8）。5/6肾切除建立慢性肾衰竭（CRF）大鼠模型,建模后2周始给药。用药8周后,检测血脂、肾功能变化,PAS染色、油红O染色、免疫组化、TUNEL染色分别观察残肾小管间质损伤评分、脂质蓄积、血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）的表达、肾小管上皮细胞凋亡数的变化。结果：与假手术组比较,模型组大鼠尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）明显升高（P〈0.01）,残肾小管间质病理损伤明显加重、脂滴、LOX-1的表达、肾小管上皮细胞凋亡数均明显增高（P〈0.01）;益肾降浊冲剂干预后,与模型组比较,上述指标均明显降低（P〈0.01）。结论：益肾降浊冲剂能减轻CRF肾小管间质的损伤,其机制与纠正脂代谢紊乱、减轻肾内脂质蓄积、下调LOX-1的表达、减轻细胞凋亡有关。     

甲基化抑制剂对CEM细胞EphB4基因表达及细胞增殖与凋亡的影响

目的：探讨甲基化抑制剂5-氮杂-2'脱氧胞苷（5-aza-2'-deoxycytidine,5aza-CdR）对人急性淋巴细胞白血病细胞株CEM中抑癌基因EphB4的转录调控作用及对CEM细胞增殖凋亡的生物学影响,为寻找肿瘤治疗新靶点提供实验依据。方法：采用亚硫酸氢盐修饰后测序法检测EphB4基因甲基化水平,荧光定量PCR法(Q-PCR)和Western blot方法检测5-aza-CdR处理前后EphB4基因mRNA及蛋白表达水平;MTS法检测不同剂量(1.0、2.5、5.0 μmol/L) 的5-aza-CdR作用于CEM细胞0 h、24 h、48 h、72 h、96 h对CEM细胞存活率的影响,流式细胞仪分析5-aza-CdR作用96 h对CEM细胞周期及凋亡的影响。结果：CEM细胞中存在EphB4基因的甲基化,甲基化水平为31.4%;不同浓度5-aza-CdR作用后CEM细胞甲基化水平均下降。5-aza-CdR作用使CEM细胞中EphB4 基因的mRNA和蛋白表达上升;5-aza-CdR明显抑制CEM细胞增殖,并与药物浓度及作用时间呈正相关。5-aza-CdR处理 96 h后,早期凋亡由4.1%上升为24.8%。用药96 h后,CEM细胞G1期由62.4% 降至46.8%,G2期由2.1%升至16.2%,细胞阻滞于G2期。结论：特异性甲基化转移酶抑制剂5-aza-CdR能使CEM细胞中沉默的EphB4基因重新表达,并可抑制白血病细胞增殖和诱导其凋亡。     

硫酸锌对体外培养胸腺细胞凋亡的影响

目的　研究锌缺乏影响机体免疫功能的机理以及与细胞凋亡的关系。　方法　采用ＤＮＡ 琼脂糖电泳及流式细胞仪分析（ＦＡＣＳ） ，观察了不同浓度的硫酸锌对缺乏营养因子引起的胸腺细胞凋亡的影响。　结果　随培养液中硫酸锌浓度的增加，细胞死亡率逐渐增加；ＤＮＡ 琼脂糖电泳显示，１０３ ～１０５ 浓度的硫酸锌可抑制胸腺细胞自发性的凋亡；ＦＡＣＳ 分析表明，凋亡的抑制率可达６０ ％ ～６５ ％ 。　结论　锌可抑制胸腺细胞凋亡，促进细胞免疫功能，对营养缺乏导致的免疫功能低下具有抑制作用。     

不同肝纤维化分级患者外周血T、B淋巴细胞Bcl-2的表达

目的探讨不同肝纤维化(LF)分级患者外周血单个核细胞Bcl-2蛋白表达及其临床意义。方法47例LF患者(男17例,女30例)与35例(男24例,女11例)同期住院治疗的慢性乙型肝炎无LF及41例(男29例,女12例)正常对照进行比较研究。以流式细胞仪双标记免疫荧光方法测定外周血T、B淋巴细胞Bcl-2蛋白表达和CD3+T细胞Bcl-2蛋白表达的平均荧光强度(MFI)。结果1.LF组CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群和CD19+细胞Bcl-2蛋白表达明显高于慢性乙型肝炎无肝纤维化组和对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。外周血CD3+T细胞蛋白表达Bcl-2的MFI为0.61±0.17亦明显高于慢性乙型肝炎无肝纤维化组0.32±0.11和对照组的0.19±0.15(P<0.01)。2.Spearman相关分析显示CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群及CD19+细胞的Bcl-2蛋白表达与肝纤维化患者年龄、病程无明显相关,而与肝纤维化分期密切相关。3.抗病毒治疗连续1年,LF患者临床症状改善,且其淋巴细胞亚群Bcl-2蛋白表达亦较治疗前有明显下降(P<0.01),CD3+T细胞蛋白表达的MFI从0.61±0.17减少到0.43±0.14(P<0.01)。结论外周血淋巴细胞Bcl-2蛋白异常表达对LF发病及临床症状有重要作用。     

PI-3 K/Akt信号转导通路在神经系统疾病中的研究进展

磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B (PI-3K/Akt)信号转导通路是细胞内重要的信号转导通路,在细胞的凋亡、存活、增殖以及细胞骨架的变化等活动中发挥重要的生物学功能,其中尤为重要的是它对细胞凋亡、存活的调节作用。细胞凋亡参与许多神经系统疾病的发生与发展过程,近年来的研究发现该通路的激活具有一定的神经保护作用,因此针对PI-3K/Akt/GSK3β信号通路内源性神经保护机制的研究,有望为神经系统疾病的治疗提供新的理论依据。     

肝癌组织中凋亡调控因子Fas、FasL及caspase-3的表达及意义

目的：探讨凋亡调控因子Fas、FasL及caspase-3在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测80例HCC患者肝癌组织及其相应癌旁正常肝组织中Fas、FasL及caspase-3的表达,并分析其表达与 HCC临床病理因素的相关性。结果 Fas、FasL及caspase-3在 HCC、癌旁组织中的表达比较,均差异有统计学意义（P＜0．05）。在TNM 分期（Ⅲ～Ⅳ期）、有门静脉癌栓、有淋巴结转移的肝癌组织中Fas 的阳性表达率明显降低（P＜0．05）;在病理分级（Ⅲ～Ⅳ级）、TNM分期（Ⅲ～Ⅳ期）、有门静脉癌栓、有淋巴结转移的肝癌组织中FasL的阳性表达率明显增高（P＜0．05）;在病理分级（Ⅲ～Ⅳ级）、TNM分期（Ⅲ～Ⅳ期）、有淋巴结转移的肝癌组织中 caspase-3的阳性表达率明显降低（P＜0．05）。80例 HCC患者肝癌组织中Fas、FasL与caspase-3的表达,两两之间并无明显关联性（狉＝0．057,P＞0．05）。结论 Fas/FasL系统的失衡及caspase-3低表达导致肝癌细胞凋亡障碍,在 HCC发生、发展及转移中起着重要作用。