Mouse models in oncogenesis and cancer therapy

Animal models have been critical in the study of the molecular mechanisms of cancer and in the development of new antitumor agents; nevertheless, there is still much room for improvement. The relevance of each particular model depends on how close it replicates the histology, physiological effects, biochemical pathways and metastatic pattern observed in the same human tumor type. Metastases are especially important because they are the main determinants of the clinical course of the disease and patient survival, and are the target of systemic therapy. The generation of clinically relevant models using the mouse requires their humanization, since differences exist in transformation and oncogenesis between human and mouse. Although genetically modified (GM) mice have been instrumental in understanding the molecular mechanisms involved in tumor initiation, they have been less successful in replicating advanced cancer. Moreover, a particular genetic alteration frequently leads to different tumor types in human and mouse and to lower metastastatic rates in GM mice than in humans. These findings question the capacity of current GM mouse carcinoma models to predict clinical response to therapy. On the other hand, orthotopic (ORT) xenografts of human tumors, or tumor cell lines, in nude mice reproduced the histology and metastatic pattern of most human tumors at advanced stage. Usingex vivo genetic manipulation of human tumor cells, ORT models can be used to molecularly dissect the metastatic process and to evaluatein vivo tumor response to therapy, using non-invasive procedures. Nevertheless, this approach is not useful in the study of the initial stages of tumorigenesis or the contribution of the immune system in this process. Despite ORT models are more promising than the most commonly used subcutaneous xenografts in preclinical drug development, their capacity to predict clinical response to antitumor agents remains to be studied. Humanizing mouse models of cancer will most likely require the combined use of currently available methodologies. Supported by an unrestricted educational grant from AstraZeneca.     

去甲长春花碱加顺铂治疗晚期非小细胞肺癌42例

目的观察抗肿瘤新药去甲长春花碱（Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ,ＮＶＢ）加顺铂（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ,ＤＤＰ）联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌（Ｎｏｎｓｍａｌｃｅｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ）的疗效。方法治疗ＮＳＣＬＣ４２例。男性３３例,女性９例。病理类型以腺癌为主（２７例）,ⅢＢ期１７例,Ⅳ期２５例。２４例初治,１８例复治。结果部分缓解（ＰＲ）２０例,稳定（Ｓ）１８例,进展（Ｐ）４例,总有效率４７．６％。每周ＮＶＢ≥２５ｍｇ／ｍ２的有效率为５４．２％,＜２５ｍｇ／ｍ２的有效率３８．９％。中位缓解期３．３个月,中位生存期８．５个月。ＮＶＢ的剂量限制毒性为骨髓抑制,白细胞下降占１００．０％,其中Ⅲ、Ⅳ度为６６．６％。注射局部静脉毒性发生率４０．５％。结论以ＮＶＢ为主的联合化疗治疗晚期ＮＳＣＬＣ有效率高,毒性可以耐受,是一个有前途的抗肿瘤新药。     

RNAi沉默RON基因对人结肠癌HT-29细胞侵袭和耐药性的抑制作用

目的:探讨RNAi沉默酪氨酸激酶受体RON(recepteur d'origine nantais)基因对人结肠癌HT-29细胞侵袭和对抗肿瘤药物敏感性的影响.方法:构建RON基因的RNAi慢病毒载体Lv-RON-siRNA.Real-time PCR和Western blotting检测RON基因的沉默效率及RON蛋白表达水平;Transwell侵袭实验和ATP-TCA(ATP-tumor chemosensitivity assay)检测RON基因对HT-29细胞侵袭和对药物敏感性的影响.结果:慢病毒载体Lv-RON-siRNA感染HT-29细胞对RON基因的沉默效果达到70％.Lv-RON-siRNA感染后,HT-29细胞侵袭力较对照组明显降低(0.97±0.072 vs 1.29±0.076,P＜0.05).Lv-RON-siRNA感染后,HT-29细胞对5-氟尿嘧啶(5-fluorouraci,5-FU)的IC90值和IC50值分别为(14.28 ±1.34)、(8.93±1.20) μg/ml,顺铂(cisplatin,DDP)的IC90值和IC50值分别为(1.91±0.22)、(0.64±0.07) μg/ml,均明显低于对照组(P＜0.01).结论:沉默RON基因表达能抑制HT-29细胞的侵袭力,提高细胞对5-FU和DDP的敏感性.     

TEC酪氨酸蛋白激酶在肝癌组织中高表达并参与肝癌耐药

目的 研究TEC酪氨酸蛋白激酶在肝癌组织中的表达及其与肝癌耐药之间的关系,为肝癌临床治疗提供线索。方法 Real-time PCR、Western blot及免疫组织化学法检测癌旁、肝癌组织及肝癌细胞系中TEC mRNA、TEC蛋白表达水平;狭线杂交法检测肝癌组织中TEC mRNA表达水平;MTT检测细胞存活率。构建TEC真核表达载体,经脂质体介导法转染肝癌细胞;RNA干扰技术敲低肝癌细胞中TEC。免疫共沉淀技术检测TEC磷酸化活化水平。结果 18例肝癌组织中,TEC mRNA和蛋白水平显著高于癌旁组织（P<0.001）;48例肝癌组织中,TEC高表达组对化疗药物的耐受能力明显高于TEC低表达组;上调TEC表达水平后,HepG2细胞对化疗药物的耐受性增加;用化疗药物处理肝癌细胞株HepG2,其TEC表达水平增加,并伴随有ERK磷酸化水平升高。 结论 TEC在肝癌组织中的高表达促进了肝癌的耐药,且可能与ERK磷酸化水平升高有关。     

去势抵抗性前列腺癌冷冻消融联合多西紫杉醇治疗临床观察

目的：评价氩氦刀冷冻消融联合多西紫杉醇化疗治疗去势抵抗性前列腺癌的安全性、有效性及临床价值。方法：2007-06-01-2011-12-30南京大学医学院附属鼓楼医院采用冷冻消融联合多西紫杉醇＋泼尼松3周标准方案化疗治疗去势抵抗性前列腺癌17例。以PSA缓解,前列腺MR及ECT骨扫描作为评定指标,疗效评价包括完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、病情稳定（SD）和病情恶化（PD）。不良反应选择髓抑制、肝功能损害及呕吐作为评估。结果：17例患者经过18～66个月随访,平均随访时间31个月。冷冻手术时间（102±43）min,均未输血及术中并发症。其中29.4%（5/17）CR,47.1%（8/17）PR,17.6%（3/17）SD,5.9%（1/17）PD。CR＋PR患者的PSA进展时间为18～112周,中位进展时间为54.2周。中位生存期〉14个月。PSA无进展生存率为94.1%。合并骨痛患者11例,经治疗后72.7%（8/11）骨痛缓解,27.3%（3/11）骨痛稳定。骨髓抑制、肝功能损害和胃肠道反应等不良反应可耐受。结论：冷冻消融联合标准多西紫杉醇＋泼尼松标准方案化疗治疗CRPC安全可行,近期疗效明显,远期疗效有待进一步观察。     

FOLFIRI方案联合或不联合贝伐珠单抗治疗转移性GEP-NEC的疗效和安全性

目的 探讨FOLFIRI方案联合或不联合贝伐珠单抗治疗转移性胃肠胰神经内分泌癌(gastroentempancreatic neuroendocrine carcinoma,GEP-NEC)的疗效和安全性.方法 回顾性分析12例转移性GEP-NEC患者临床资料,采用FOLFIRI方案(伊立替康+亚叶酸钙+5-氟尿嘧啶)联合或不联合贝伐珠单抗治疗,收集疗效和不良反应相关数据.结果 12例患者中,6例(50.0％)为既往EP方案(依托泊苷+顺铂)治疗失败,2例(16.7％)为其他方案(1例吉西他滨+白蛋白紫杉醇,1例奥沙利铂+卡培他滨)治疗失败,另4例为一线治疗.12例疾病控制率为83.3％ (10/12),其中7例(58.3％)为部分缓解(partial response,PR),3例(25.0％)为疾病稳定(stable disease,SD),2例(16.7％)为疾病进展(progressive disease,PD).7例(58.3％)联合贝伐珠单抗治疗,其中4例(57.1％)PR,2例(28.6％)SD,1例(14.3％)PD.5例不联合贝伐珠单抗患者,其中3例(60.0％) PR,1例(20.0％)SD,1例(20.0％)PD.所有患者无进展生存时间为5.1月(3.8-6.4月).Ⅲ～Ⅳ度毒性反应发生率为25.0％ (3/12),且均为Ⅲ度粒细胞减少,其他的常见不良反应包括贫血、转氨酶升高、高血压和蛋白尿等,均为Ⅰ～Ⅱ度.结论 FOLFIRI方案联合或不联合贝伐珠单抗在转移性GEP-NEC患者中的缓解率良好且耐受性佳.     

青蒿琥酯对K562细胞凋亡诱导作用及其与亚砷酸的协同作用

目的：研究青蒿琥酯体外诱导K562细胞凋亡的作用及其与亚砷酸的协同作用.方法： 采用MTT法、透射电镜技术、流式细胞术检测青蒿琥酯或（和）亚砷酸作用后K562细胞的凋亡发生情况.结果：青蒿琥酯抑制K562细胞的增殖,IC50值为12.41 μg/mL,其有时间、剂量-效应关系;12.50～50.00 μg/mL的青蒿琥酯可诱导K562细胞凋亡,并具有一定的时间剂量-效应关系;12.50μg/mL青蒿琥酯与1.00 μmol/L亚砷酸联合作用于K562细胞48 h后,凋亡率为21.07%,与阴性对照（1.87%）、单独应用青蒿琥酯（7.45%）、亚砷酸（2.57%）相比,差异有统计学意义,χ^2次为1 128.39、335.47和1 058.40,P值均为0.000.结论： 青蒿琥酯对K562细胞具有凋亡诱导作用,并且与亚砷酸具有协同作用.     

盐酸帕诺洛司琼联合地塞米松预防顺铂化疗引起恶心和呕吐的临床观察

为了评价帕诺洛司琼联合地塞米松预防顺铂化疗所致恶心和呕吐的疗效和安全性,在81例患者接受顺铂化疗中使用帕诺洛司琼和地塞米松预防恶心和呕吐,观察急性和延迟性无呕吐率、恶心程度、安全性以及多程化疗中的无呕吐率.81例患者共接受了247个周期的帕诺洛司琼和地塞米松的止呕治疗.在第1个周期中,无恶心率为28.4％(23/81),急性和延迟性无呕吐率分别为46.9％(38/81)和76.5％(62/81),主要不良反应为便秘(25.9％)、呃逆(23.4％)、乏力(13.6％)和头晕(11.1％).第1～6个周期的无呕吐率分别为45.7％(37/81),36.1％(22/61),32.6％(15/46),27.3％(9/33),23.1％(3/13)和23.1％(3/13).初步研究结果提示,帕诺洛司琼联合地塞米松安全有效地预防顺铂化疗中的恶心和呕吐,但疗效在多程化疗中不能很好地维持.     

28例颈、胸上中段食管鳞癌同期加量调强放疗的近期疗效及毒副反应

[目的]评价颈、胸上中段食管鳞癌同期加量调强放疗合并化疗的近期疗效及毒副反应。[方法]28例T1-4N0-1M0期颈、胸上中段食管鳞癌行预防性次全淋巴放疗,PGTV（包括原发肿瘤和转移淋巴结）和町V（包括预防性次全淋巴照射区）予同期加量调强放疗（SIB—IMRT）,PTV—GTV处方剂量66Gy／30f,PTV—CTV处方剂量60Gy／30f。放疗期间及放疗前后PF或TP方案化疗4个周期。[结果]28例患者按计划完成了全量放疗,21例患者接受2个周期以上化疗,15例患者接受1-2个周期同步化疗。CR28．6％（8,28）,PR50％（14／28）。中位随访8．5个月（2～17个月）,5例死亡。局部未控或复发率35．7％（10／28）,无一例出现野内淋巴结进展或复发。远处转移率10．7％（3／28）．其中1例贲门周围淋巴结转移。7例治疗后体重下降超过5％。无2度以上心脏、肝脏、肾脏毒性;无3度以上急性肺损伤;3-4度食管炎5例,均接受了同期化放疗;3-4度血液学毒性3例;2例食管瘘形成;无治疗相关死亡。[结论]颈、胸上中段食管鳞癌同期加量调强放疗合并化疗是可以耐受的,可降低区域淋巴结复发,野外淋巴结复发少见,但局部复发仍是主要失败形式。