芦荟大黄素对硬皮病成纤维细胞增殖的影响

目的探讨芦荟大黄素对系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞增殖的影响。方法以不同浓度的芦荟大黄素处理体外培养的成纤维细胞,显微镜下观察成纤维细胞生长状况并摄片;用四甲基偶氮唑盐（MTT）方法测定芦荟大黄素对成纤维细胞增殖的影响。结果荟大黄素对硬皮病成纤维细胞的增殖具有显著的抑制作用。结论芦荟大黄素可显著的抑制硬皮病成纤维细胞的生长,降低成纤维细胞的增殖指数并诱导其调亡。     

芦荟大黄素对人膀胱癌细胞T24增殖及凋亡的影响

目的：探讨芦荟大黄素（AE）对人膀胱癌细胞株T24细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法：采用甲基噻唑（MTT）比色法测定AE对体外培养的T24细胞的抑制率,并用作图法计算半数有效抑制浓度（IC5）0;光学显微镜下观察AE作用前后细胞形态学变化;流式细胞技术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测mRNA表达。结果：MTT法测定显示,在5～160μg/mL浓度范围内,AE对膀胱癌T24细胞生长有抑制作用,并呈量-效关系,IC50为31.55μg/mL;光学显微镜下药物IC50剂量（32μg/mL）作用T24细胞后呈现明显的死亡形态变化;流式细胞仪检测显示AE可阻滞T24细胞进入G2/M期;Annexin V-FITC/PI双染法显示早期凋亡细胞数明显增加;R T-PCR法显示myc基因表达下降。结论：AE能抑制人膀胱癌T24细胞生长,并阻断细胞周期和诱导细胞凋亡。其机制可能与myc基因表达下调有关。     

HPLC法测定通便宁片中芦荟大黄素和大黄酸的含量

番泻叶为通便宁片复方制剂中的君药,原标准采用分光光度法测定其中番泻苷B的含量,但操作复杂且所测成分易见光分解。文章以HPLC法测定其芦荟大黄素和大黄酸的含量,以此作为番泻叶成分的测定指标,以期探索方便有效的测定方法。     

HPLC法同时测定荜茇-大黄中6种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定荜茇-大黄药对中胡椒碱、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量。方法采用Thermo Hypersil BDS C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 ml/min;检测波长254 nm;柱温30℃。结果各成分色谱峰分离度良好,胡椒碱、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的质量浓度分别在6.02~240.72μg/ml(r=0.9996)、1.85~74.18μg/ml(r=0.9993)、1.79~71.78μg/ml(r=0.9996)、1.59~63.55μg/ml(r=0.9995)、5.42~216.72μg/ml(r=0.9992)、1.62~64.64μg/ml(r=0.9997)内呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.61%(RSD=1.50%)、99.48%(RSD=1.11%)、99.10%(RSD=1.31%)、99.72%(RSD=1.29%)、99.88%(RSD=1.25%)、99.06%(RSD=0.97%)。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于荜茇-大黄药对的质量控制。     

通便宁片质量标准研究

目的建立通便宁片质量控制方法。方法采用薄层色谱法对制剂中番泻叶、牵牛子、砂仁、白豆蔻进行定性鉴别;用HPLC法测定番泻叶干膏粉中芦荟大黄素的含量。结果薄层色谱中斑点清晰,易于识别;HPLC法精密度、重现性良好,芦荟大黄素进样量在0.1047～0.8376μg范围内线性关系良好。加样回收率为102.45%,RSD=1.53%。结论本法可有效控制通便宁片的质量。     

芦荟大黄素抑制人口腔癌KB细胞增殖和迁移的双重效应及其机制研究

目的 探讨芦荟大黄素抑制人口腔癌细胞生长和迁移的双重效应及其机制.方法 对人口腔上皮癌KB细胞分别用2.5、5、10、20和40 μmol/L的芦荟大黄素处理,对照组为含0.1%二甲基亚砜的培养液,分别用结晶紫实验和划痕损伤愈合迁移实验分析长效抗增殖作用和抗迁移效应,并用Western blotting方法 检测蛋白激酶Ca和c-myc蛋白水平的变化.结果 芦荟大黄素能长时间抑制KB细胞的生长;划痕损伤愈合迁移实验结果 显示,药物处理3 d后进入划痕区域的细胞数为(6.2±0.2)个/mm2,而对照组为(33.5±0.4)个/mm2,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组细胞抑制蛋白激酶Ca和c-myc的水平较高,经芦荟大黄素处理后,均以剂量依赖方式下降.结论 芦荟大黄素的抗增殖和抗迁移活性与抑制蛋白激酶C信号传导途径有关.     

HPLC法测定十滴水中五种活性成分的含量

目的：建立HPLC法同时测定十滴水中的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量的方法。方法：色谱柱为ShimadzuVP-ODS柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,流速为1.0ml/min,检测波长为254nm,柱温30℃。结果：5种成分分别在0.042～0.840μg（r=0.9996）、0.168～3.352μg（r=0.9998）、0.084～1.680μg（r=0.9997）、0.093～1.852μg（r=0.9999）和0.174～3.490μg（r=0.9994）内呈良好线性关系,平均回收率分别为99.60%（RSD=0.20%）、99.56%（RSD=0.36%）、98.95%（RSD=0.55%）、98.76%（RSD=0.97%）和98.79%（RSD=1.08%）。结论：本法简便、快速、准确,可用于十滴水的质量控制。     

大黄素对人胃癌BGC-823细胞体外增殖和迁移的影响

目的 探讨大黄素对人胃癌BGC-823细胞增殖和迁移的影响。 方法 采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定不同浓度大黄素对体外培养人胃癌BGC-823细胞增殖的影响;采用流式细胞术测定大黄素对人胃癌BGC-823细胞的细胞周期影响;采用划痕损伤实验测定大黄素对人胃癌BGC-823细胞迁移的影响。 结果 MTT法显示,大黄素能抑制人胃癌BGC-823细胞増殖,呈现浓度依赖性;流式细胞术显示,人胃癌BGC-823细胞的细胞周期主要停滞在G₀/G₁期;划痕损伤实验表明,人胃癌BGC-823细胞迁移受到明显的抑制。 结论 大黄素对人胃癌BGC-823细胞的增殖和迁移具有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性,并可使人胃癌BGC-823细胞增殖周期停滞于G₀/G₁期。     

游离蒽醌在人肠Caco-2细胞模型的转运

目的：研究1，8-二羟基蒽醌（1，8-dihydroxyanthraquinone，DQ）、大黄酚（chrysophanol，CP）、大黄素（emodin，EN）、大黄酸（rhein，RN）、芦荟大黄素（aloe—emodin，AE）和ω-羟基大黄素（citreorosein，CN）在人肠Caco-2细胞单层模型的转运。方法：以人源Caco-2细胞单层为药物的肠吸收转运模型，将DQ、CP、EN、RN、AE和CN与其共温孵进行吸收转运，高效液相色谱法测定吸收转运量。结果：DQ、CP、EN、RN、AE和CN从顶侧（肠腔侧）向底侧（体循环侧）吸收转运的表观渗透系数（Papp）值分别为（2．16±0．38）×10^-6、（3．00±0．09）×10^-7、（1．99±0．94）×10^-6、（4．58±0．20）×10^-6、（6.24±0．19）×10^-6和（7．34±0.61）×10^-6cm·s^-1；从底侧向顶侧吸收转运的Papp分别为（3．20±0．10）×10^-6，（4．50±0．02）×10^-7，（2．22±0．62）×10^-6，（4．94±0．39）×10^-6，（2．87±0．18）×10^-6和（6．80±0．37）×10^-6cm·s^-1。DQ、EN、RN、AE和CN的Papp值比在Caco-2细胞单层模型上呈被动扩散机制、吸收良好的阳性对照化合物普萘洛尔的Papp值[（6．30±0．26）×10～cm·s^-1]小10倍，但比呈被动扩散机制、吸收不良的阳性对照化合物阿替洛尔的Papp值（〈1×10^-7cm·s^-1）大10倍。CP的Papp值与阿替洛尔的Papp值基本上在同一数量级。ATP耗竭剂碘乙酰胺不影响AE在两个方向上的转运。结论：DQ、CP、EN、RN、AE和CN在人源Caco-2细胞单层模型的吸收转运机制为被动扩散；DQ、EN、RN、AE和CN属于中等吸收的化合物，CP属于吸收不良的化合物。     

双波长标准加入法同时测定芦荟大黄素甙和芦荟大黄素

应用双波长标准加入分光光度法同时测定芦荟中芦荟大黄素甙和 芦荟大黄素的含量。根据两种物质的吸收光谱,选择芦荟大黄素甙为标准加入组分,在芦荟大黄素的等吸收波长361.4nm和480.9nm处进行标准加入测定。芦荟大黄素甙和芦荟大黄素 浓度在0～1×10-4mol·L-1范围内均符合比尔定律。对库拉索芦荟中芦荟大黄 素甙和芦荟大黄素含量测定的相对标准偏差(n＝6)小于2%。