百令胶囊对哮喘豚鼠骨髓及肺组织CD34+、Eotaxin及CCR3表达的影响

目的:通过观察百令胶囊对支气管哮喘豚鼠骨髓及肺组织中CD34+、Eotaxin及CCR3表达的影响,探讨百令胶囊治疗哮喘的可能机制。方法:健康雄性豚鼠30只随机分成对照组(A组)、哮喘组(B组)及百令胶囊治疗组(C组),每组10只。B、C组以卵白蛋白(OVA)作为抗原腹腔内注射联合雾化吸入复制哮喘模型,末次激发后24 h处死豚鼠,制备豚鼠肺组织病理标本,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织炎症改变;免疫组化检测CD34+祖细胞、Eotaxin及CCR3在肺组织中的表达。结果:哮喘组肺组织CD34+祖细胞、Eotaxin及CCR3的阳性细胞数明显增加;百令胶囊治疗组肺组织中CD34+祖细胞、Eotaxin及CCR3的表达均有不同程度的减轻,与哮喘组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:百令胶囊可通过下调骨髓及肺组织中CD34+祖细胞、Eotaxin及CCR3的表达水平,发挥其抗气道炎症的作用。     

研究者发起的临床研究用于支持新药研发面临的挑战

在我国开展的大量研究者发起的N34;床研究（Investigator-initiated clinical trials, IIT），其中部分应该可以为新药研发起到重要的支撑作用。但由于我国IIT尚存在数量多、规模小、质量参差不齐等问题，特别是在方案设计、质量管理以及伦理审查能力等方面与制药企业发起的注册N34;床试验还存在不小的差距，导致很多IIT还不能用于支持新药研发。因此需要监管部门、申办方、研究机构、伦理委员会和研究者共同提高对于IIT用于支持新药研发作用的认识。只有加强监管，建立有效的质量管理体系、强化对研究者的培训并切实提347;伦理审查能力，才能用高质量的研究者发起的N34;床研究支持新药研发。     

北京市和湖南省郴州市4~8月龄婴儿蔬菜水果添加情况的追踪性调查

目的追踪调查北京市和湖南省郴州市两地4~8月龄婴儿的蔬菜、l34;果添加时间与添加种类，探索与蔬果添加行为有关的母婴特征。方法采用方便抽样，在婴儿12~16周龄招募228对健康母婴，婴儿4月龄时正式进入研究，对其进行为期4个月的随访(n=204)。记录母婴对的基本信息以及婴儿的蔬菜、l34;果首次添加时间和添加种类等信息。使用秩和检验分析与蔬菜、l34;果添加有关的母婴因素，运用多重线性回归分析部分母婴因素与首次蔬菜添加时间以及8月龄婴儿蔬果添加种类数的关系。结果参与调查的204名婴儿的蔬菜添加时间集中在7月龄，l34;果添加时间主要集中在6月龄，l34;果添加时间早于蔬菜(P < 0.001)，添加l34;果的种类数高于蔬菜(P=0.045)。48%(n=98)的8月龄婴儿添加的蔬果不超过3种，仅9.8%(n=20)的婴儿在8月龄时已添加10种以上的蔬果。菠菜等绿叶蔬菜是最常添加的蔬菜，苹果是最常添加的l34;果。多重线性回归显示，35岁以上的乳母给婴儿添加蔬菜的时间比35岁及以下的乳母晚0.6个月，4月龄纯母乳喂养的婴儿首次添加蔬菜的时间比混合喂养的婴儿晚0.4个月，受教育程度为大学本科及以上的乳母给婴儿添加蔬果的种类数比学历为初中及以下的乳母多2~3种。结论调查结果显示婴儿的l34;果添加时间早于蔬菜，绿叶蔬菜和苹果是最常添加的蔬果，纯母乳喂养、母亲分娩年龄较高的婴儿蔬菜添加时间较晚，母亲文化程度较低的婴儿蔬果添加种类较少，故分娩年龄较高以及文化程度较低的乳母应受到婴儿合理辅食添加健康宣教的重点关注。     

脐血CD34+细胞的分离与纯化

脐血造血干细胞的分离是进行干细胞移植、体外扩增培养的关键。研究采用明胶自然沉降法、Ficoll分层法分离脐血MNC后,用MACS分离纯化CD34+细胞,计数并用流式细胞仪进行纯度分析。结果显示:每份脐血的采集量平均为95+52ml,3g/dl明胶自然沉降法所获MNC密度平均为(5.76±0.67)×107/ml;CD34+细胞密度平均为(5.53±1.16)×105/ml,较Fi-coll分层法高(P<0.01)。因此,3g/dl明胶自然沉降法是一种较理想的分离MNC的方法,用明胶沉降法和MACS相结合是分离脐血CD34+细胞的理想方法。     

一种序列3D打印导板引导的瓷贴面分区粘接技术

获得足够的釉质粘接是保证瓷34;面固位、边缘封闭及N34;床使用效果的共识性建议，牙体预备后，基牙的粘接面就确定下来。由于唇面釉质厚薄不均，常常存在或多或少的牙本质暴露，而分区识别粘接面上的釉质或牙本质（简称釉本）并采用“选择性酸蚀”使其获得最大粘接力的处理方式，将有助于提高瓷34;面的整体粘接强度。不同于以往“选择性酸蚀”裸眼识别釉本分区的不确定性和经验依赖，本技术方案通过第一个目标修复体空间定深导板控制预备深度，获得准确的釉本分区；并将其映射到第二个分区粘接导板里，依靠第二个导板分别对粘接面上的釉本进行不同处理，实现了精准的、可预期的瓷34;面的分区粘接，获得了更好的粘接效果。     

原核表达重组人白介素-3及其对脐带血造血干细胞体外增殖的影响

目的研究原核表达重组人白介素-3(rhIL-3)及其对脐带血造血干细胞体外增殖的影响。方法构建pET-43.1-rhIL-3表达载体,克隆至BL21菌株,并进行中试发酵生产,所得包涵体经透析复性后,采用阳离子交换柱纯化,纯化产物送N-端测序。Ficoll密度梯度离心结合免疫磁珠法富集人脐带血中CD34+细胞,以不同浓度rhIL-3及干细胞因子(SCF)、Fms样酪氨酸激酶受体-3配体(FL)和促血小板生成素(TPO)因子组合培养1周,测定细胞总数,计算CD34+细胞增殖倍数。结果在SCF和FL存在下,rhIL-3可明显促进造血干祖细胞增殖,但较无rhIL-3时CD34+细胞占细胞总数的比例有所下降。与SCF、FL共同作用时的最佳浓度在15 ng/mL左右,与SCF、FL、TPO共同作用时的最佳浓度在50 ng/mL左右。结论高效表达及纯化的rhIL-3与SCF、FL和TPO细胞因子组合对脐带血造血干细胞具有良好的增殖作用。     

miR-34a通过靶向抗凋亡基因Survivin抑制皮肤鳞状细胞癌增殖的研究

[摘要]　目的　研究miR-34a在皮肤鳞状细胞癌(SCC)中的表达及对肿瘤细胞增殖、抗凋亡的调控作用及机制。　方法　采用实时定量PCR检测46例SCC病人肿瘤组织及15例正常皮肤组织中miR-34a及Survivin的表达;将miR-34a mimic转染进皮肤鳞状细胞癌A431细胞系,探讨miR-34a对SCC细胞增殖、Survivin表达的影响;评估miR-34a及Survivin表达对SCC预后的生物诊断价值。 　结果　　（1）低分化SCC患者miR-34a显著低于高分化组,而Survivin则显著高于高分化组（P均<0.05）。与正常皮肤比较,SCC病人的miR-34a显著降低,而Survivin表达则显著提高,P值分别为0.0013及<0.0001,差异均有极显著性意义。（2）与未转染组相比,miR-34a mimic可以显著抑制A431细胞增殖（P<0.05）;同时显著降低Survivin蛋白表达（P<0.01）。（3）高miR-34a表达的SCC患者生存率显著高于低表达者,P=0.020567;高Survivin表达的SCC患者生存率则显著低于高表达者,P=0.008198。　结论　　miR-34a可通过对Survivin表达调控影响SCC细胞增殖,同时它也可作为一个很好的生物学诊断指标为评估SCC病人预后提供参考。     

Microrna-34a在鼠膝骨关节炎中的作用

目的:研究miR-34a在小鼠膝骨关节炎模型中的作用。方法:建立小鼠膝骨关节炎模型,行HE染色,对膝关节软骨损伤进行Mankin评分,然后取小鼠膝关节软骨细胞进行培养,RT-PCR检测miR-34a的表达,western-blot检测凋亡相关因子bcl-2、MMP-13的蛋白表达。结果:小鼠膝骨关节炎模型中,Mankin评分升高,miR-34a的表达升高,MMP-13亦升高,而bcl-2的表达降低。结论:在小鼠膝骨关节炎模型中,过表达的miR-34a,导致MMP-13的表达升高以及bcl-2的表达降低,加速骨关节炎进程。这说明沉默miR-34a可能成为防止骨关节炎进程的新方法。     

肺腺癌VEGF-C、VEGF-D的表达与MVD、MLVD及淋巴转移的关系

目的探讨肺腺癌中VEGF-C、VEGF-D与微淋巴管密度MLVD（VEGFR-3）、微血管密度MVD （CD34）及淋巴结转移之间的关系。方法免疫组化检测48例肺腺癌组织中VEGF-C、VEGF-D、MLVD、MVD蛋白的表达。结果VEGF-C、VEGF-D蛋白阳性率分别为70．8％（34／48例）、58．3％（28／48例）,肿瘤周边部位显著高于肿瘤中心部位,具有统计学意义,其表达与肿瘤分化程度无关,与肿瘤的TNM分期有关,Ⅲ～Ⅳ期显著高于Ⅰ～Ⅱ期。在VEGF-C蛋白阳性组,MVD高于阴性组（P=0．016）,MLVD显著高于阴性组（P=0．006）,淋巴结转移（P=0．042）增多;而VEGF-D蛋白阳性组与阴性组相比MVD无显著差异（P=0．943）, MLVD高于阴性组（P〈0．01）,淋巴结转移（P=0．012）增加。结论VEGF-C的表达与肺腺癌血管生成及淋巴管生成和淋巴结转移关系密切,而VEGF-D的表达只与淋巴管生成和淋巴结转移关系密切,与血管生成无关。     

Prognostic Significance of Immunohistochemically Detected Blood and Lymphatic Vessel Invasion in Colorectal Carcinoma: Its Impact on Prognosis

Background The prognostic significance of blood vessel invasion (BVI) and lymphatic vessel invasion (LVI) is unclear. Because of the absence of specific markers for venous and lymphatic vessels, earlier studies could not reliably distinguish between BVI and LVI. Methods By immunostaining for podoplanin and CD34 antigen, we retrospectively investigated LVI and BVI in 419 tissue specimens of colorectal carcinoma. We performed univariate and multivariate analysis of the clinicopathologic features, frequency of recurrence, and outcome of patients with or without LVI and BVI. Results The use of hematoxylin and eosin (H&E) staining to identify BVI and LVI yielded a false positive rate of 9.1% and false negative rate of 12.6%. The incidence of BVI was significantly higher among tumors with LVI than tumors without LVI (P <.001). In logistic multivariate analysis, only LVI (P < .001) was associated with lymph node metastasis and BVI (P = .015) was associated with distant recurrence. Calculating the prognostic relevance, both two invasion types correlated with decreased survival in univariate analysis (both P <.001). In multivariate analysis, BVI (P =.024), lymph node status (P =.003) and tumor stage (P <.001) remained statistically significant factors for survival. Conclusions Our results suggest that immunohistologic evaluation of BVI and LVI could be useful in colorectal carcinoma indicating the risk of lymph node metastasis and recurrence, thereby contributing to prognostic evaluation.