大鼠胚胎肝干细胞的分离方法比较

目的比较两种体外分离培养原代大鼠胚胎肝干细胞(EHSCs)方法,并对其进行鉴定。方法用胶原酶灌注法及剪碎消化法分离不同年龄的大鼠胚胎肝干细胞,用含10%优等胎牛血清的H-DMEM培养液培养。利用免疫细胞化学方法在激光共聚焦扫描显微镜下观察该细胞表面抗原的表达情况,进行鉴定。结果两种方法分离的大鼠胚胎肝干细胞体外培养24 h贴壁,5 d左右可长成单层,光镜下为致密圆形细胞,边缘清楚。8 d后细胞铺展,呈上皮样。表达甲胎蛋白(AFP)抗原、细胞角蛋白(CK)18、19。结论所分离的细胞经鉴定为大鼠胚胎肝干细胞,可在体外培养条件下迅速扩增,两种方法所分离培养的肝细胞形态基本一致。     

突触蛋白-Ⅰ在胚胎干细胞体外神经分化过程中的表达变化

目的探讨突触蛋白-I（synapsin-I）在胚胎干细胞（ESCs）体外神经分化过程中的表达变化及作用。方法采用“五步法”和维甲酸（RA）法两种途径体外诱导ESCs向神经细胞分化，并以另一种可向神经细胞分化的肿瘤细胞-PC12细胞的诱导过程作参照，从不同的途径、不同的细胞进行比较．通过免疫组织化学、RT-PCR、Western blot方法观察这一过程中synapsin-I的表达变化．找出synapsin-I在ESCs向神经细胞分化过程中表达变化的共同规律。结果结合形态学和其它神经特异性指标的变化，synapsin-I在ESCs和PC12细胞向神经细胞分化的过程中具有早期即有表达，后逐渐升高，至分化成熟阶段达最高，后期又逐渐下降的变化规律。结论在ESCs的分化过程中，synapsin-I的表达存在特定的时空规律，并与ESCs的形态学改变相关，提示synapsin-I可能对ESCs在神经分化过程中的形态分化起着重要的作用。     

具有靶向免疫抑制作用新型重组融合蛋白B7-2-PE40KDEL真核表达载体的构建及其生物效应

目的:构建B7-2-PE40KDEL的真核表达载体,探讨通过体内表达重组融合蛋白,特异性杀伤高表达CD28 T细胞,阻断B7∶CD28/CTLA4共刺激信号途径诱导免疫耐受的可能性.方法:以原核表达载体pRSETA-B7-2-PE40KDEL质粒为模板,采用PCR及酶切连接的方法构建真核表达载体pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL.利用RT-PCR、Western 印迹及ELISA法从mRNA、蛋白质水平检测了B7-2-PE40KDEL在RPE-CHO真核细胞中的表达情况.采用MTT法对其特异性杀伤高表达CD28 T细胞的生物活性进行测定.结果:成功构建了pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL真核表达载体,转染入RPE-CHO细胞后可转录翻译为重组融合毒素蛋白,相对分子质量约为71×103,平均106个转染细胞24 h表达0.23 μg/L.活性测定显示真核载体所表达的B7-2-PE40KDEL可特异性地抑制高表达CD28的人T淋巴细胞系,而对CD28阴性的人白血病细胞系的抑制率较低.结论:真核载体表达的B7-2-PE40KDEL具有良好的靶向性免疫抑制活性,为进一步开展其体内特异性防治移植排斥反应及自身免疫性疾病奠定了基础.     

多位点不合的非清髓异基因外周血造血干细胞移植治疗慢性粒细胞性白血病1例

1998年以来，Slaven等学者率先开展非清髓异基因外周血造血干细胞移植(NAPBSCT)，治疗白血病等恶性血液病，取得显著效果。笔者采用白消安(Bus)、CY及环孢素(环孢菌素A，CsA)等，为1例HLA配型四个位点不合的慢性粒细胞性白血病(CML)患者成功进行NAPBSCT，现报告如下。     

组织工程支架在犬急性脊髓损伤修复中应用的初步研究

目的探讨携带神经干细胞的聚碳酸亚丙酯[poly（propylene carbonate），PPC]可降解支架移植在犬脊髓急性损伤后修复中的作用。方法制作犬T13脊髓左侧半切损伤模型。将实验动物随机分为3组：细胞支架组在损伤后1周时将填充神经干细胞的PPC可降解支架植入损伤区．支架组只植入支架，对照组不作移植。8周后观察支架的组织反应、降解情况及神经干细胞的迁移分化和脊髓轴突再生情况。结果支架部分降解，管腔内未见瘢痕侵入。神经干细胞向支架邻近部位广泛迁移、扩散，并分化为3种神经细胞表型。神经丝蛋白（NF）及髓鞘碱性磷酯蛋白（MBP）免疫组化显示细胞支架组脊髓损伤区邻近部位的继发损害较其他组轻。结论携带神经干细胞的PPC可降解支架在犬脊髓组织中无明显组织反应．能够抵御瘢痕侵入：其携带的神经干细胞能够整合入邻近脊髓组织并起到一定保护作用。     

医学突破：睾丸细胞可能制成心脏

国际间对干细胞的研究又有了重大的突破!美国一家生物科技公司,近日在西班牙一场会议中发表最新研究成果,声称已从人类睾丸中取出未成熟的细胞,改造为干细胞。这项成果若经过证实,将在人体胚胎之外,提供另一个干细胞的来源。美国加州的研究人员表示,他们已从一群年龄26至50岁的男士睾丸中取出未成熟细胞,再将细胞重新排列为干细胞,并利用这些干细胞培植出神经心脏及骨骼细胞等。     

Mice aorta loop grafting： A new model which separate vascular rejection and neointimal formation in chronic rejection

To study the cause and mechanism of transplantation vasculopathy which characterized by accelerated graft arteriosclerosis ( AGA), we estabfished a mouse aorta graft model. Methods: A segment of thoracic aortas of B10. A (2R) mice were transplanted to C57BL/10 mice abdominal aorta by end to side anastomoses. The different time point collected grafts were analyzed by morphological, histochemical and electro microscopic methods. Results:Rejection was manifested as a concentric progressive destruction of the smooth muscle cells. In contrast, the endothelial inflammation and subsequent ncointimal proliferation characteristic of AGA was localized to the regions of turbulent flow, i.e. the junction of the graft with the recipient aorta. Conclusion: This model separates the processes of rejec-tion and neointimal formation which usually manifested together in the lesion of AGA, elucidate that different mecha-nisms control vascular rejection and neointimal formation in chronic rejection.     

肾移植后要合理用药 长期存活的“金钥匙”在患者手中

尽管抗排斥药物近年的进步使肾移植患者术后生存率大大提高，但与移植手术本身相比，术后的医疗护理、合理用药、饮食锻炼、生活习惯等同样重要，     

淋巴瘤首先侵犯骨髓、脾脏和心包PET/CT显像一例

患者女，56岁，因全身乏力4个月余，双下肢水肿2个月入院。患者4个月前无明显诱因出现全身乏力，并有活动后气喘、心慌，外院检查示血AST87．6U／L、ALT 101．5U／L、乳酸脱氢酶1259U／L，予保肝治疗，病情无明显好转。2个月前患者全身乏力等症状加重，并出现双下肢水肿，外院检查PT，2．7pmol／L、FT4 10．6pmol／L、TSH4．1mU／L，诊断为“甲状腺功能减退症”并给予左甲状腺素钠片口服治疗，