骨桥蛋白参与血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞迁移

目的检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对骨桥蛋白(OPN)表达的影响及其涉及的信号传导途径,并探讨OPN在AngⅡ诱导中膜平滑肌细胞(VSMCs)迁移中的作用.方法采用贴壁法培养SD大鼠胸主动脉的VSMCs.以免疫印迹(Western blot)法检测OPN表达.运用Transwell观察反义OPN在AngⅡ诱导的VSMCs迁移中的作用.结果 (1)体外培养的大鼠VSMCs在基础状态下表达一定水平的OPN蛋白,经10-7mol/L AngⅡ诱导24 h后,OPN蛋白水平与对照组相比增加1.3倍(P＜0.05);(2)预先给予AngⅡ1型(AT1)受体拮抗剂氯沙坦(losartan)、胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂PD98059和P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB202190后,AngⅡ诱导的OPN的表达分别下降44.2%、23.6%及72.5%(P＜0.05),而其2型(AT2)受体拮抗剂PD123319对OPN的表达没有影响.(3)反义OPN可以明显抑制AngⅡ诱导的VSMCs迁移(每个视野平均迁移细胞数目26.34±5.47 vs 50.23±6.12,P＜0.05),而OPN正义、错配义组无此变化.结论 (1)AngⅡ上调VSMCs中OPN的表达;(2)AT1受体、ERK和P38MAPK信号系统参与AngⅡ诱导的OPN表达.(3)OPN参与AngⅡ诱导的VSMCs迁移.     

血清骨桥蛋白和D-二聚体水平对心肌梗死介入治疗患者预后的影响

目的 探讨血清骨桥蛋白(OPN)和D-二聚体(D-D)水平对心肌梗死介入治疗患者预后的影响。方法 选择2019年1月至2020年12月驻马店市中心医院收治的268例心肌梗死患者为研究对象。患者均行介入治疗,并于治疗后进行为期12个月的随访。随访期间评估患者预后,并根据预后将患者分为预后不良组(n=60)和预后良好组(n=208)。收集所有患者的临床资料并进行单因素分析,将单因素分析中差异有统计学意义的指标进一步行logistic回归分析影响心肌梗死患者介入治疗预后的因素;绘制决策曲线,分析联合检测血清OPN和D-D水平预测心肌梗死患者介入治疗预后的价值。结果 预后不良组与预后良好组患者的性别、年龄、发病至就医时间、饮酒史、吸烟史、舒张压、收缩压、空腹血糖、左心室射血分数及低密度脂蛋白胆固醇水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。预后不良组患者血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、OPN、D-D水平显著高于预后良好组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著低于预后良好组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,TG、TC、cTnI、O...     

凉血养阴法对寻常型银屑病患者外周血VEGF和OPN表达的影响

目的 观察凉血养阴法对寻常型银屑病患者的临床疗效及外周血血管内皮细胞生长因子(VEGF)和骨桥蛋白(OPN)表达的影响,探讨凉血养阴法治疗银屑病的作用机制.方法 选取70例寻常型银屑病患者,随机分为治疗组(银屑平丸)和对照组(复方青黛丸)各35例.分别予以口服银屑平丸和复方青黛丸,疗程均为8周,同时设立20名健康体检者作对照.观察2组患者治疗前后的银屑病面积及严重程度指数(PASI)评分,同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测2组患者治疗前后外周血VEGF和OPN含量变化,并与相应的PASI评分作相关性分析.结果 2组治疗后PASI积分均有明显下降,治疗组下降较对照组明显;治疗组总有效率为85.71％,对照组总有效率为58.82％,治疗组疗效优于对照组;2组患者治疗前外周血VEGF和OPN含量明显高于正常人,治疗后2组外周血VEGF和OPN均有下降,且治疗组较对照组下降更明显;银屑病外周血VEGF和OPN与其相应PASI呈正相关,但VEGF和OPN无明显相关性.结论 凉血养阴法治疗寻常型银屑病安全,疗效确切;寻常型银屑病患者外周血中VEGF和OPN表达异常,银屑平丸纠正异常表达的VEGF和OPN的水平,从而达到治疗银屑病的目的.     

重组生长激素改善小鼠子宫内膜损伤疗效分析

目的 研究重组生长激素(GH)能否修复小鼠受损的子宫内膜及其对子宫内膜容受性的影响。方法 通过宫腔内灌注95%乙醇建立受损的小鼠子宫内膜模型,重组生长激素采用皮下注射及宫腔灌注两种形式,经过不同方式治疗的小鼠作为实验组,建模后宫腔灌注生理盐水及未经任何处理的小鼠作为对照组。分别治疗2个动情周期后检测子宫内膜并进行生育测试。HE染色检测子宫内膜厚度、腺体及血管数目。采用免疫组织化学法观察雌激素受体(ER1)、孕激素受体(PR)、整合素ανβ3及骨桥蛋白在两组子宫内膜组织中的表达情况评价子宫内膜容受性。结果 构建小鼠的子宫内膜损伤模型,各组小鼠均有不同程度的盆腹腔粘连及子宫肿胀,以宫腔灌注生理盐水组最严重。重组生长激素两种不同方式的治疗后,小鼠受损的子宫内膜组织结构都有不同程度的恢复,子宫内膜厚度、腺体数目及血管分布均高于宫腔灌注生理盐水组,但是两种治疗方式在改善子宫厚度、改善子宫内膜容受性差异无统计学意义(P>0.05)。结论 重组生长激素可以修复受损的子宫内膜,提高子宫内膜容受性。     

鹿角形肾结石并发肾盂感染的危险因素及肾组织骨桥蛋白、NF-κB表达水平

目的 探究鹿角形肾结石患者并发肾盂感染的危险因素及肾组织骨桥蛋白(OPN)、核因子κB(NF-κB)表达水平。方法 回顾性分析2016年1月-2021年1月重庆市丰都县人民医院收治的鹿角形肾结石患者126例,均行经皮肾镜碎石术碎石,依据术后是否发生肾盂感染分为感染组38例,非感染组88例,分析肾盂感染病原菌分布及其危险因素,比较两组患者肾组织中OPN和NF-κB表达水平及其预测术后肾盂感染的临床价值。结果 38例肾盂感染患者共分离病原菌44株,其中革兰阴性菌36株占81.82%,革兰阳性菌7株占15.91%,真菌1株占2.27%;多因素分析显示：性别(OR=2.188)、肾积水程度(OR=2.633)、糖尿病史(OR=1.530)为肾盂感染的危险因素(P<0.05);感染组患者OPN及NF-κB表达高于非感染组(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线显示：肾组织OPN、NF-κB联合诊断预测术后肾盂感染曲线下面积为0.915,灵敏度为93.75%,特异度为83.36%。结论 肾组织OPN及NF-κB表达异常与鹿角形肾结石患者术后肾盂感染密切相关,可为临床预防术后感染提...     

祛银汤联合紫外线治疗银屑病的疗效观察及对外周血骨桥蛋白与血管内皮生长因子的影响

目的观察祛银汤联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗寻常型银屑病的疗效,及对患者血清中骨桥蛋白(OPN)和血管内皮生长因子（VEGF）的影响。 方法共选取60例银屑病患者,将其随机分为治疗组及对照组,2组均每天口服祛银汤中药制剂,治疗组同时辅以NB-UVB照射,每周治疗3次,共治疗8周;另同期选取20例健康志愿者纳入健康组。于治疗前及治疗8周后采用酶联免疫吸附分析法（ELISA）检测各组对象血清中OPN及VEGF水平,选用银屑病皮损面积及严重性指数（PASI）对患者临床疗效进行评定。 结果2组患者分别经8周治疗后,发现治疗组PASI评分及临床疗效均显著优于治疗前及对照组水平;治疗前2组患者血清中OPN及VEGF水平均显著高于健康组,治疗8周后2组患者上述指标均明显降低（P<0.05）,且以治疗组的降低幅度较显著,与对照组比较,组间差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论祛银汤联合NB-UVB治疗银屑病具有协同疗效,能进一步改善患者病情、减轻各种不良反应,同时还能下调血清中异常升高的OPN及VEGF水平,该联合疗法值得临床推广、应用。     

依达拉奉对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的保护作用

目的观察依达拉奉对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的保护作用。方法将40只健康成年Wistar大鼠随机分成正常组、EAE组、LDE组、HDE组各10只,EAE组、LDE组、HDE组建立EAE模型,LDE组、HDE组分别腹腔注射相应剂量的药物。正常组、EAE组仅腹腔注射生理盐水0.5ml/d,所有大鼠24h后处死。结果EAE组神经功能缺损评分>LDE组>HDE组,组间比较有显著性差异(P<0.05);EAE组iNOS、OPN阳性细胞表达>LDE组>HDE组,组间比较有显著性差异(P<0.05)。结论依达拉奉对EAE的保护作用可能与其清除自由基、减轻炎症反应、减少i-NOS和OPN表达有关。     

低氧对人结肠癌细胞HT-29体外侵袭转移潜能的影响

目的 探讨低氧与人结肠癌细胞HT-29恶性转化的关系,检测骨桥蛋白（osteopontin,OPN）、细胞核内核转录因子（NF—κB／p65）表达和MMP-2、MMP-9活性变化,以探索其恶性转化的潜在机制。方法 参照体内肿瘤的氧分压,建立低氧模型。MTT比色试验测定HT-29细胞的异质性黏附能力,Transwell侵袭试验判定其侵袭游走能力;将HT-29细胞低氧处理0、6、12、24、48h,明胶酶谱分析检测分泌的MMP-2、MMP-9活性变化,RT—PCR和Western blot检测OPN mRNA和蛋白表达,提取细胞核蛋白,Western blot检测细胞核内NF—κB／065蛋白表达。结果 低氧诱导24h后,HT-29细胞的异质性黏附能力、侵袭游走能力显著增加。低氧下6h,MMP-2、MMP-9活性无明显变化,随着低氧时间的延长,其活性逐渐显著上调,24h达顶峰,48h与24h无显著性差异。HT-29细胞在低氧的诱导下,其OPN mRNA和蛋白以及细胞核内NF—κB／065蛋白的表达趋势与MMP-2、MMP-9活性变化趋势类同。结论 低氧能诱导HT-29细胞异质性黏附能力、侵袭游走能力显著增加,MMP-2、MMPO活性上调而促使其向恶性表型转化。OPN—NF—κB可能是低氧下继HIF-1之外的另一重要调节途径,该途径与低氧诱导的恶性表型有密切关系。     

DNA载体介导的RNAi抑制肝癌细胞的骨桥蛋白表达及侵袭性

目的探讨骨桥蛋白(OPN)对高转移潜能人肝癌细胞系HCCLM3侵袭性影响。方法构建两个针对人OPN mRNA干扰质粒pENTR~(TM)/U6-INF(pINF-1、2)及对照质粒pENTR~(TM)/ U6-CTR(pCTR),并将其转染HCCLM3细胞。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定OPN的mR—NA表达量；Western印迹测定OPN蛋白的表达量；噻唑蓝(MTT)比色法实验检测HCCLM3的增殖力；Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭力的改变；结果与仅加转染试剂的空白对照组(2．01±0．13)相比。转染24h后,plNF-1组OPN mRNA用RT-PCR无法检测到,pINF-2组mRNA(1．00±0．12)下降50%,而pCTR组mRNA(2．02±0．13)表达差异无统计学意义(P＞0．05)。转染48h后plNF-1组OPN蛋白表达(0．11±0．02)与空白对照组(1．02±0．11)相比下降90%；转染plNF-1后,HCC-LM3细胞的增殖力下降2%。但与对照组相比差异无统计学意义(P＞0．05)。Matrigel侵袭实验结果显示,与空白对照组(28．4±1．5)相比,转染plNF-1后HCCLM3细胞穿过人工基底膜的数量(10．2±0．8)明显减少,差异有统计学意义(P＜0．01)。结论pINF-1可以特异性抑制高转移肝癌细胞系HCCLM3中OPN的表达,并显著降低其侵袭力,但对细胞增殖力影响不大,此技术有望成为抑制肝癌侵袭转移的新途径。     

脂多糖作用下腹膜间皮细胞骨桥蛋白表达及乌司他丁的影响

目的：观察脂多糖对大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）中骨桥蛋白（OPN）表达的影响;观察乌司他丁（ulinastatin）作用下RPMC的OPN细胞分布及mRNA表达的影响。方法：胰蛋白酶法行RPMC的原代培养和传代,经鉴定第3代细胞融合至80%时分组。正常对照组：不同浓度LPS（50,100μg/ml）组;50μg/mlLPS作用不同时间（8,12,24,34,48h）组;乌司他丁组：（160,320,640U/ml）与LPS50mg/L作用24h,RealTime-RT-PCR技术检测骨桥蛋白（OPN）、TGF-β1mRNA的表达。结果：LPS可刺激RPMC的骨桥蛋白表达显著增加,呈剂量、时间依赖性（P〈0.05）;乌司他丁可降低LPS引起的RPMC中的骨桥蛋白表达,呈剂量依赖性（P〈0.05）。结论：脂多糖通过上调骨桥蛋白的表达,引起腹膜损伤导致腹膜纤维化,乌司他丁可以一定程度抑制骨桥蛋白引起的腹膜纤维化过程。