泽泻有效部位对肾草酸钙结石模型大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响

目的研究泽泻有效部位对大鼠肾草酸钙结石形成和肾组织骨桥蛋白(OPN)表达的影响,探讨泽泻抑制尿结石形成的机制。方法采用现代植化和生物活性导向分离的方法分离、提取泽泻的有效部位。将30只大鼠随机分成3组对照组、模型组、泽泻组。以乙二醇和1α-羟基维生素D3ig制备大鼠肾草酸钙结石模型。检测各组大鼠血及尿生化、肾Ca2 水平、24h尿草酸分泌量和肾组织病理学改变,并采用免疫印迹(Western blotting)和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别观察各组大鼠肾组织OPN蛋白及其mRNA的表达水平。结果ig泽泻有效部位(主要以四环三萜类化合物为主)大鼠的血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、肾Ca2 水平、24h尿Ca2 分泌量、肾组织草酸钙晶体的分布、OPN蛋白及其mRNA的表达水平均显著低于模型组(P<0.01)。结论泽泻有效部位能抑制大鼠肾组织OPN的表达,减少肾组织草酸钙结晶的沉积,从而能有效抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。     

溶石颗粒剂对结石模型大鼠肾骨桥蛋白表达的影响

目的：通过测定用药前后肾脏骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的变化,来阐明民间验方溶石颗粒剂防治肾结石的作用机制。方法：采用乙二醇、氯化胺法致大鼠肾结石,同时每天1次ig给予溶石颗粒剂5.8,11.6,17.4 g·kg^-1,实验全程21 d。每7 d作以下测定：尿标本以EDTA法测定钙浓度,比色法测定草酸浓度；肾组织HE染色,以免疫组化法检测大鼠肾骨桥蛋白的表达。结果：模型组大鼠肾OPN的表达明显增加,与溶剂对照组相比P<0.01,其中21 d模型组OPN的表达最高,OPN的表达为溶剂对照组的1.4倍（0.281 3/0.201 8）；溶石颗粒剂各剂量组均能明显抑制大鼠肾结石模型OPN的表达（P<0.05）,且呈现明显的量效关系；溶石颗粒剂各剂量组能减轻大鼠肾脏草酸钙结晶程度,显著降低大鼠尿钙和草酸浓度(P<0.01)。结论：溶石颗粒剂可以抑制大鼠肾结石模型中OPN的表达。     

过量氟对大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响

目的检测骨桥蛋白(OPN)mRNA和蛋白在氟处理大鼠肾组织中的表达差异和蛋白定位,并探讨OPN与氟中毒肾损害的关系。方法经饮水投氟喂养Wistar大鼠48只,用免疫组织化学法进行骨桥蛋白的组织学检测。提取各组大鼠肾组织mRNA,采用RT-PCR法检测骨桥蛋白mRNA的表达变化。结果免疫组织化学结果表明,骨桥蛋白主要定位于肾组织的肾小管上皮细胞质中,常食和偏食对照组大鼠肾组织OPN蛋白只是散在表达,而常食和偏食加氟组的OPN蛋白表达较相应对照组明显增强(与常食对照组比较,q=18．4,P< 0．05;与偏食对照组比较,q=12．0,P<0．01)。2个投氟组的OPN mRNA表达水平均较相对应的对照组增加,但差异无统计学意义。结论过量氟可促进大鼠。肾组织OPN表达,且随着投氟量的增加,OPN伴随着肾损伤加重而表达增强,提示OPN与氟中毒肾损伤程度密切相关,很可能作为一种氟中毒肾损害的预测标志。     

甲氨喋呤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜骨桥蛋白和整合素αVβ3表达的影响

目的 探讨甲氨喋呤对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及其受体整合素αvβ3表达的影响及其作用机制.方法 建立CIA大鼠模型,分为模型组和甲氨喋呤(MTX)组,后者用MTX进行干预治疗;采用免疫组织化学染色技术检测滑膜组织OPN和整合素αvβ3的表达,ELISA方法检测血清TNF-α水平.结果 ① CIA模型组和MTX组大鼠的滑膜OPN、整合素αvβ3表达均明显高于正常大鼠对照组(均为P<0.01);与模型组比较,MTX组OPN和整合素αVβ3的表达减少(均为P<0.01). ②正常对照组和MTX组大鼠血清TNF-α水平显著性低于模型组大鼠(均为P<0.01).结论 滑膜OPN和整合素αvβ3异常表达在CIA发病中具有重要意义.MTX通过下调滑膜OPN和整合素αvβ3的表达,降低血清TNF-α水平从而达到治疗CIA的作用.     

PI3K/PKB信号通路在TGF-β_1诱导人肝星状细胞表达骨桥蛋白中的作用

目的:研究磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)信号通路在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肝星状细胞表达骨桥蛋白(OPN)的调控作用。方法:体外培养LX-2人肝星状细胞株,予TGF-β1(终浓度2.5、5、10、20μg/L)刺激24 h或予TGF-β1(终浓度10μg/L)刺激12 h、24 h、48 h;先经PI3K/PKB信号通路特异性抑制剂wortmannin(0.1μmol/L)预处理1 h,再予10μg/L TGF-β1刺激24 h,收集细胞,采用real-time PCR及Western blotting法检测OPN表达情况。结果:TGF-β1能够促进LX-2细胞表达OPN,在一定浓度和时间范围内,其表达量随着TGF-β1浓度和时间的增加而增加,呈剂量和时间依赖性关系;经wortmannin预处理再予TGF-β1刺激的LX-2细胞,与对照组相比,OPN表达受到明显抑制(P0.01)。结论:TGF-β1对LX-2人肝星状细胞OPN表达具有诱导作用,此作用可能受PI3K/PKB信号通路的调控。     

罗勒多糖抗卵巢癌侵袭转移的体外实验研究

目的： 探讨罗勒多糖抗卵巢癌侵袭转移的作用机制及其肿瘤乏氧微环境对其效应的影响,为临床应用研究提供依据。方法：罗勒多糖分别在常氧（21%O2、5%CO2）和乏氧（1%O2、5%CO2和94%N2）环境中作用于人卵巢癌SKOV3细胞,形态学观察不同氧环境下各组细胞形态差异;Transwell小室实验检测各组细胞的侵袭运动能力;明胶酶谱法分析各组细胞分泌的基质金属蛋白酶-2（MMP-2）活性差异;RT-PCR技术检测骨桥蛋白（OPN）mRNA表达水平;免疫细胞化学法观察各组细胞胞内OPN表达情况。结果：与对照组相比,罗勒多糖在常氧和乏氧环境下都能够降低SKOV3细胞的侵袭运动能力,抑制细胞中MMP-2的分泌,抑制人卵巢癌SKOV3细胞中OPN的表达（转录水平、蛋白水平）,且乏氧环境下罗勒多糖的上述作用更为显著。结论：低氧显著增强人卵巢癌SKOV3细胞的迁移能力,罗勒多糖可能通过下调骨桥蛋白表达及基质金属蛋白酶-2的分泌,抑制其侵袭运动能力。     

骨桥蛋白mRNA在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的探讨骨桥蛋白(OPN)mRNA在卵巢癌中的表达并分析其临床意义。方法利用实时荧光定量RT-PCR技术检测35例卵巢癌及正常卵巢组织中OPNmRNA的表达,并结合卵巢癌的临床病理特征进行分析。结果OPNmRNA在卵巢癌组织中表达明显升高,其表达与卵巢癌临床分期及是否存在淋巴结转移显著相关(P<0.01),临床分期较晚、有淋巴结转移的卵巢癌组织中表达水平显著升高。OPNmRNA与CA125在卵巢癌中的表达没有相关性(P>0.05)。结论OPN可能在卵巢癌的发生发展以及转移中起着重要作用,OPN和CA125的联合检测可提高卵巢癌的阳性诊断率。     

骨桥蛋白和p21蛋白在结直肠癌中表达的相关意义

目的:探讨骨桥蛋白(OPN)和p21在原发性结直肠癌组织中的表达及转移中的作用。方法:采用免疫组化SP法检测60例结直肠癌组织中OPN和p21的表达情况。结果:OPN和p21的阳性表达主要定位于癌细胞的细胞浆;OPN和p21在60例结直肠癌组织中阳性表达率分别为66.7%(40/60)和61.7%(37/60)。在发生转移的结直肠癌组织中OPN和p21阳性表达率分别为83.3%(25/30)和80.0%(24/30),高于无转移的结直肠癌组织中OPN(50.0%,15/30)和p21(43.3%,13/30)的阳性表达率,差异具有显著性,(P<0.05)。两者均阳性表达的33例结直肠癌有24例(72.7%)已发生转移,与两者均阴性表达的8例结直肠癌仅有1例(12.5%)发生转移相比较,差异有显著性,(P<0.05),提示OPN和p21均阳性表达与肿瘤转移的发生密切相关。OPN和p21的表达与肿瘤的大小、肿瘤的分化、分期、性别、年龄等因素无关,但与肿瘤侵袭的发生有关,(P<0.05)。OPN和p21的表达成显著正相关(r=0.286,P<0.05)。结论:OPN和p21的表达与结直肠癌侵袭转移的发生密切关系,两者均阳性表达时对预测结直肠癌已发生转移具有指导意义。     

骨桥蛋白与肿瘤转移

骨桥蛋白（osteopontin，OPN）是一种多功能分泌型钙结合磷酸化糖蛋白，它能与骨组织中的羟基磷灰石紧密结合，参与调节骨钙的沉积。1979年Senger等首先报道恶性转化上皮细胞能分泌OPN。近年来，人们对它的认识不断深入，越来越多的研究发现OPN在肿瘤转移的过程中起重要作用，多种人类肿瘤细胞能表达和分泌OPN。OPN已被公认为是肿瘤转移相关基因或转移基因，其与肿瘤转移的密切关系已引起人们高度重视。     

骨桥蛋白和CD44v6在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的：探讨骨桥蛋白（OPN）和CD44v6在非小细胞肺癌中的表达与肺癌临床病理的关系。方法：应用免疫组织化学方法,分别检测OPN和CD44v6在56例非小细胞肺癌（30例鳞癌和26例腺癌）组织中的表达。结果：（1）56例非小细胞肺癌组织中OPN和CD44v6阳性表达率分别为71.4%、67.8%。肺鳞癌组和肺腺癌组中OPN和CD44v6的表达无差异性（P〉0.05）。（2）肺癌中OPN和CD44v6的表达与肿瘤的淋巴结转移相关（P〈0.05）,而与患者的年龄、性别及肿瘤组织学分级无关（P〉0.05）。结论：OPN和CD44v6可能在肺癌的发生、进展中起重要作用,联合检测OPN、CD44v6可作为判断肺癌患者预后的重要指标。