酸敏感离子通道阻断剂对大鼠脑缺血/再灌注的保护效应观察

目的:探讨酸敏感离子通道(ASICs)阻断剂阿米洛利(amiloride)对大鼠脑缺血氧化应激性损伤的影响。方法:参照Zea Longa线栓法建立SD大鼠脑局灶性缺血/再灌注(I/R)模型。将32只大鼠随机分为4组,即假手术组、缺血/再灌注(I/R)模型组a、milorideⅠ组和amilorideⅡ组,每组8只。分别于局灶性脑缺血2 h再灌注24 h时间点取冰冻脑片一张进行组织细胞HE染色,其余脑组织制作匀浆,采用生化试剂测定其组织中髓过氧化物酶(MPO)和一氧化氮(NO)的含量。结果:I/R模型组MPO和NO的含量均高于amilorideⅠ组和amilorideⅡ组(P<0.05),amilorideⅠ组高于amilorideⅡ组(P<0.05)。结论:ASICs通道阻断剂amiloride通过抑制脑缺血氧化应激而发挥神经保护作用,其作用机制可能主要为amiloride阻断ASICs通道而抑制Ca2 超载。amiloride药理作用具有剂量-效应关系。     

高效液相色谱法对氨苯蝶啶等7种利尿药的分离测定

目的：建立分离测定氨苯蝶啶、阿米洛利、呋塞米、布美他尼、氯噻嗪、吲达帕胺、苄氟噻嗪等7种利尿药的新方法。方法：采用高效液相色谱法(HPLC)，使用C8反相柱(Sphensorb C8S5, 4.6 mm×250.0 mm，5 μm)，流动相为不同比例乙腈 水加0.5%甲酸，流速1.0 mL·min 1，检测波长280 nm。结果：使用流动相乙腈 水(50∶50)加0.5%甲酸时，7种利尿药的色谱保留时间3.6～20.3 min。结论：该方法简便、快捷、准确，适用于该7种利尿药的HPLC分离检测。     

联用阿米洛利与川芎嗪预防大鼠肝纤维化的实验研究

目的观察联用阿米洛利与川芎嗪对大鼠肝纤维化的预防效果。方法使用二甲基亚硝胺建立大鼠肝纤维化模型,观察给予阿米洛利与川芎嗪后,肝功能、丙二醛、超氧歧化酶、羟脯氨酸、透明质酸及层粘连蛋白含量变化。结果阿米洛利无改善肝功能之功效,川芎嗪可明显改善肝功能诸指标;阿米洛利和川芎嗪可明显降低血清透明质酸、层粘连蛋白和肝组织羟脯氨酸和丙二醛的含量(P<0.05);可明显提高肝组织内的超氧歧化酶的活力(P<0.01);尤以合用组效果最佳。结论阿米洛利与川芎嗪对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化均有预防作用,两者合用有一定协同作用。     

阿米洛利对大鼠压力超负荷性心肌肥厚的抑制作用

目的　观察钠氢交换体(NHE)抑制剂阿米洛利(Ami)对压力超负荷左室肥厚(LVH)大鼠心功能、心肌细胞内游离钙浓度([Ca²⁺]_i)及心肌细胞膜Na⁺ 、K⁺-ATP酶活性的影响。方法　①同步记录离体工作心脏LVSP、LVEDP、±dp/dt_max及T值;②测定Fura-2/A负载后的单个心室肌细胞的[Ca²⁺]_i;③光电比     

蛇床子素对酸诱发髓核致炎大鼠神经节神经元的膜电位改变抑制的作用

目的研究不同pH酸刺激下髓核致炎大鼠背根神经节(DRG)神经元的膜电位改变,及蛇床子素(Ost)对其的影响。方法移植尾部髓核于左侧腰5DRG建立炎性神经痛大鼠模型,术后3d分离DRG神经元,通过DiBAC4(3)荧光标记,观察不同pH液刺激下胞内荧光强度(膜电位)的动态变化,检测Ost或酸敏感离子通道抑制剂阿米洛利(Ami)预处理后膜电位的振幅、达峰时间等。结果 pH(6.5、6.2、5.9)酸刺激使髓核致炎大鼠神经元膜电位振幅一过性增加,Ost浓度依赖性的抑制膜电位振幅变化(P<0.05),20g·L-1和50g·L-1Ost强于Ami(P<0.05,P<0.05),复合应用Ami可增强Ost抑制效果(P<0.05)。结论 Ost抑制酸刺激诱发的髓核致炎大鼠DRG神经元去极化,增强炎症环境中神经元的抗酸能力。     

酸敏感离子通道阻断剂阿米洛利对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞凋亡抑制作用的初步研究

目的：研究酸敏感离子通道阻断剂阿米洛利（Amiloride）对佐剂性关节炎（AIA）大鼠关节软骨组织的保护作用及机制。方法：将大鼠随机分为正常组、AIA模型组、阿米洛利（2.5、5.0、10.0mg·kg^-1.d^-1）组和阿司匹林（50mg/kg）对照组。弗氏完全佐剂（CFA）致AIA后第10天,大鼠出现继发性炎症,此时阿米洛利、阿司匹林灌胃给药,连续8d 正常组与模型组给予等容量的无菌注射用水。检测大鼠继发侧关节肿胀度,光学显微镜观察关节病理变化,透射电镜、Tunel法观察阿米洛利对AIA大鼠关节软骨细胞凋亡的影响,免疫组织化学技术测定阿米洛利对AIA大鼠关节软骨中的Ⅱ型胶原（COII）蛋白合成的影响,Alcian染色测定阿米洛利对AIA大鼠关节软骨中的PG合成的影响。结果：阿米洛利各剂量组对AIA大鼠的足肿胀未见明显影响 病理学观察关节软骨表面光滑,软骨细胞层次尚清晰,成熟软骨细胞数量增加 透射电镜观察软骨细胞核内异染色质轻度边集、细胞内粗面内质网轻度扩张、线粒体轻度肿胀,与模型组软骨细胞核膜皱缩、核染色质高度边集、核膜破裂、出现凋亡小体相比无明显细胞凋亡的特征;Tunel法原位检测显示凋亡阳性细胞数显著减少（P〈0.01） 免疫组化及Alcian染色检测显示关节软骨基质成分COII蛋白和PG的表达量增加。结论：ASICs阻断剂阿米洛利可通过抑制AIA大鼠关节软骨细胞凋亡发挥对关节软骨的保护作用。     

阿米洛利对食管癌EC9706细胞侵袭能力的影响及其作用机制

 【摘要】　目的　研究阿米洛利对人类食管癌EC9706细胞体外侵袭能力的影响,探讨其可能的作用机制。方法　食管癌细胞EC9706经阿米洛利处理后,采用Transwell小室法检测其对细胞侵袭能力的影响,采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot法分别检测阿米洛利对细胞尿纤溶酶原激活物（uPA）mRNA及蛋白相对于β-actin表达的影响。结果　经10、20、40、80 μmol／L阿米洛利作用24 h后,EC9706细胞体外侵袭人工重组基膜的能力降低,并随着阿米洛利浓度的增加,EC9706细胞的穿膜细胞数由对照组的（96±7）个分别下降为（78±6）、（57±6）、（33±4）、（15±3）个（F＝43.46,P＜0.01）。随着阿米洛利浓度的增加,uPA mRNA的表达由对照组的（0.623±0.065）分别下降为（0.526±0.054）、（0.389±0.041）、（0.312±0.038）、（0.247±0.025）（F＝6.71,P＜0.01）,uPA 蛋白由对照组的（0.732±0.064）分别下降为（0.644±0.057）、（0.533±0.058）、（0.391±0.036）、（0.267±0.043）（F＝ 6.71,P＜0.01）。结论　阿米洛利能抑制食管癌细胞的侵袭能力,其作用机制可能与抑制uPA系统的表达有关。     

二甲基氨氯吡咪诱导HL-60细胞分化(英文)

目的:研究阿米洛利衍生物二甲基阿米洛利(DMA)对培养的HL-60细胞增殖和分化的影响。方法:MTT法测定细胞增殖,细胞染色和NBT还原试验测定细胞分化。结果:DMA以浓度依赖方式抑制HL-60细胞增殖,药物作用96小时测得半数抑制浓度(IC_(50))为31.7(95％可信限为6.3-57.1)μmol·L~(-1)。DMA诱导HL-60细胞向粒细胞系分化。加入DMA100μmol·L~(-1)作用3天,细胞分化率从6.5％升至70％。阿米洛利及阿米洛利的另二个衍生物对细胞分化无明显作用。结论:二甲基阿米洛利抑制HL-60细胞增殖和诱导HL-60细胞分化。     

amiloride对自发性高血压大鼠心肌肥厚及血管紧张素Ⅱ的影响

高血压左室肥厚 (ＬＶＨ)时肾素 -血管紧张素系统(ＲＡＳ)发生异常 ,尤其血管紧张素Ⅱ (ＡｎｇⅡ )的升高与ＬＶＨ的发生发展密切相关。以往研究显示 ,自发性高血压大鼠(ＳＨＲ)左室肥厚时Ｎａ+ /Ｈ+ 交换体 (ＮＨＥ)活性增加。ａｍｉｌｏｒｉｄｅ是一种具有Ｎａ+ /Ｈ+ 交换抑制作用的利尿剂 ,在心血管系统中有保护缺血重灌损伤、抗心律失常等作用 ,但对ＳＨＲ心肌肥厚及ＡｎｇⅡ的影响少见报道。本文观察ａｍｉｌｏｒｉｄｅ对ＳＨＲ的ＬＶＨ和ＡｎｇⅡ的影响 ,旨在探讨高血压心肌肥厚的可能机制及防治对策。1　材料与方法1 1　材料　盐酸阿…