川芎嗪肉桂酰类双酯衍生物对内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的观察2,5-二（2,5-二甲氧基肉桂酰氧甲基）-3,6-二甲基吡嗪（TMPC）对H2O2引起的体外培养人脐静脉内皮细胞氧化性损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法 H2O2引起体外培养人脐静脉内皮细胞氧化性损伤,观察TMPC对内皮细胞氧化损伤的保护作用。结果TMPC对H2O2引起体外培养人脐静脉内皮细胞氧化性损伤有明显的保护作用,能减少内皮细胞脂质过氧化物丙二醛（Malondialdehyde,MDA）的生成,提高超氧化物歧化酶（SOD）活性,减轻H2O2诱导的内皮细胞内游离钙离子升高引起的钙超载。结论TMPC可有效保护H2O2引起体外培养人脐静脉内皮细胞氧化性损伤,维持或恢复细胞正常的生理功能,其机制可能与TMPC能有效抑制细胞内钙超载,减少脂质过氧化物的生成,提高抗氧化物质的活性有关。     

血清钙调蛋白与急性缺血性脑卒中的相关性研究

目的 研究卒中后48小时钙调蛋白（CAM）水平与脑梗死面积的关系,探讨急性缺血性脑卒中（IS）患者CAM水平是否与急性期病情严重程度呈正相关.方法 将研究对象分为对照组和实验组.正常对照组为本院100例健康体检者.实验组为入组的急性IS的120例患者,在入院时对IS患者依据头颅CT计算脑梗死面积,按照Adamas分类法,将120例IS患者再分为：大梗死组（27例）、小梗死组（42例）、腔隙性脑梗死组（51例）三组.依据分组情况测定血清CAM值,探讨IS后48小时CAM水平与脑梗死灶面积之间的关系,是否与急性期病情严重程度有相关性.结果 实验组较对照组CAM值明显升高,有明显统计学意义（t=15.34,P＜0.001）.大梗死组、小梗死组、腔隙性脑梗死组三组患者血清CAM值比较有显著差异（F=260.89,P＜0.001）.结论 急性缺血性卒中患者48小时CAM水平与脑梗死面积呈正相关,可作为一重要指标反映脑卒中患者急性期病情的严重程度.     

酸枣仁汤含药血清对皮质酮损伤的PC12细胞[Ca2+]i、Caspase-3的影响

目的:观察酸枣仁汤含药血清对皮质酮损伤的PC12细胞[Ca2+]i、Caspase-3的影响。方法:以高浓度皮质酮诱导PC12细胞凋亡模拟焦虑症神经细胞损伤状态,激光共聚焦显微镜检测[Ca2+]i浓度、免疫细胞化学染色法测定Caspase-3的表达,探讨酸枣仁汤含药血清对皮质酮诱导PC12细胞凋亡的钙信号转导通路的影响。结果:与空白对照组比较,皮质酮组细胞内[Ca2+]i浓度、Caspase-3表达显著升高;与皮质酮+正常动物血清组比较,皮质酮+酸枣仁汤含药血清组细胞内[Ca2+]i浓度、Caspase-3表达显著降低。结论:胞内钙超载可能是皮质酮诱导PC12细胞凋亡的主要原因之一,酸枣仁汤含药血清可能通过减轻胞内钙超载、减少Caspase-3表达、拮抗皮质酮诱导的PC12细胞凋亡、减少焦虑症可能伴有的高皮质酮状态对神经细胞的损伤,发挥抗焦虑作用。     

硫酸镁防治蛛网膜下腔出血时脑血管痉挛的研究

蛛网膜下腔出血(SAH)死亡率极高,SAH时脑血管痉挛(CVS)是致残、死亡的重要原因,因此积极防治CVS,可大大降低SAH的伤残率,提高生存质量.而硫酸镁竞争性抑制钙离子(Ca2+),防止钙超载;镁离子(Mg2+)可阻断与N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA)偶联的离子通道,减少Ca2+内流和钾离子(K+)外流,从而抑制血管收缩,防治血管痉挛[1-3].因此,本研究采用硫酸镁静滴防治SAH时CVS,观察其效果.     

鼠动脉粥样硬化模型的建立

成功建立AS模型是研究冠心病发病机制及探讨治疗措施的主要方法之一,本文旨在根据动脉粥样硬化不同发病机制学说,介绍多种鼠动脉粥样硬化模型建立的具体方法     

U83836E对原代大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制研究

目的:观察U83836E对原代大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用并探讨其初步机制.方法:分离大鼠原代心肌细胞建立缺氧复氧(H/R)模型,细胞随机分为5组,观察不同剂量U83836E对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用.结果:与Control组比较,H/R组心肌细胞内钙离子浓度明显增高,肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2)表达显著减少.与H/R组比较,U83836E干预各组心肌细胞内游离钙离子浓度明显降低,且肌浆网钙泵的蛋白表达上调.结论:U83836E对缺氧复氧心肌细胞有保护作用,其可能与上调SERCA2的表达抑制细胞内钙超载有关.     

病毒载体介导BDNF基因表达在大鼠神经元AD模型中的作用

目的 探讨重组腺伴随病毒（rAAV）载体介导表达人脑源性神经营养因子（hBDNF）基因以及表达的hBDNF对β淀粉样蛋白（Aβ）诱导的AD模型神经元保护效应的机制。方法 使用分子克隆技术克隆了hBDNF基因,并且构建了携带hBDNF基因的rAAV病毒载体（AAV-hBDNF）,使用病毒载体转染Aβ诱导损伤的海马神经元。使用MTT检测和流式细胞仪分析观察细胞凋亡变化,同时使用免疫细胞化学技术检测了BDNF蛋白以及Bcl-2抗凋亡蛋白的表达,使用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]）i的变化。结果 结果显示重组病毒对培养的海马神经元进行了有效的转染,BDNF蛋白表达水平明显增高,表达的BDNF对Aβ诱导的神经元损伤有显著的保护效应,在BDNF治疗组表现出抗凋亡蛋白Bcl-2的表达增高和有效地维持了[Ca^2＋]i平衡。结论 表达的BDNF通过抑制Aβ依赖的细胞内钙超载和增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,有效地保护神经元抵抗Aβ神经毒性引起的凋亡。     

SIRT1/p66Shc介导小檗碱对阿霉素诱导心肌毒性拮抗作用研究

【目的】基于细胞水平观察小檗碱对阿霉素诱导心肌细胞沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)/p66Shc通路的影响,探讨小檗碱抗阿霉素所致心肌毒性作用的机制。【方法】应用阿霉素（1μmol/L）处理人心肌细胞系AC16建立阿霉素心肌毒性模型。四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定细胞存活率,二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）染色荧光显微镜照像测定细胞活性氧簇（ROS）水平,罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜照像测定线粒体膜电位（MMP）,荧光染料Rhod2-AM（分子探针）测定线粒体Ca2+浓度（[Ca2+]m）,蛋白免疫印迹（Western Blot）法测定细胞SIRT1、p66Shc及凋亡蛋白Bax的表达水平。【结果】用1μmol/L小檗碱预处理可明显抑制1μmol/L阿霉素引起的AC16心肌细胞毒性作用,使细胞存活率升高,表现为抑制阿霉素引起的细胞内ROS生成增多、抑制阿霉素致细胞凋亡（使凋亡蛋白Bax表达下调）和减轻线粒体损伤。阿霉素处理的AC16心肌细胞中p66Shc表达增强且SIRT1蛋白表达下降;预先加用小檗碱组中,阿霉素上调p66Shc及下调SIRT1表达的效应显...     

参麦注射液对阿霉素中毒心肌细胞脂质过氧化和钙超载的影响

目的：应用阿霉素（ADR）复制新生大鼠心肌细胞中毒模型,观察参麦注射液（SMI）对中毒心肌细胞的保护作用并探讨其机制,方法：将培养72h以后的新生大鼠心肌细胞分为对照组,模型组和SMI保护组,继续培养24h后测定培养基中乳酸脱氢酶（LDH）释放量,细胞内丙二醛（MDA）含量,超氧化物歧化酶（SOD）活力以及细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2 ]i)。结果：SMI能够减少ADR中毒心肌细胞LDH释放量,降低细胞内MDA含量和[Ca^2 ]i,同时增强细胞内SOD活力。续集：SMI能够对抗自由基引起的脂质过氧化和逆转细胞内钙超载,从而保护ADR中毒心肌细胞。     

不同剂量辛伐他汀对慢性心房重构犬心房肌细胞内游离钙离子浓度的影响

目的探讨不同剂量辛伐他汀剂量对慢性心房心动过速所致心房重构犬心房肌细胞内游离钙离子(Ca2+)浓度的影响。方法将28只健康杂种犬随机分为对照组、起搏组、干预1组及干预2组,每组各7只。起搏组、干预组利用快速心房起搏(ATP)建立慢性心房重构模型,干预组ATP前5 d始分别给予口服辛伐他汀10 mg/d(干预1组)和60 mg/d(干预2组)。用激光共聚焦显微镜技术,以Flou-3/AM作为钙指示剂,测定四组犬心房肌细胞内游离Ca2+浓度。结果起搏组犬心房肌细胞内游离Ca2+浓度(162)较干预1组(140)、对照组(109)及干预2组(118)均有显著增高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);干预2组犬心房肌细胞内游离Ca2+浓度明显低于干预1组(P<0.05),与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论大剂量辛伐他汀能更有效抑制慢性心房重构犬心房肌细胞内钙超载。