基于二氧化硅、百草枯、博莱霉素建立3种大鼠肺纤维模型的差异蛋白质组学分析

目的 以二氧化硅、百草枯、博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化(PF)模型为研究对象,以期在3种大鼠PF模型中探究存在差异表达的参与PF发生、发展相关的关键蛋白.方法 应用同位素标记相对与绝对定量技术(iTRAQ)结合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析3种大鼠PF模型肺组织蛋白表达谱;采用Proteome Discove...     

H2O2对人皮肤成纤维细胞衰老标记蛋白30及自噬相关蛋白LC3Ⅱ表达的影响北大核心CSCD

目的 探讨H2O2对人皮肤成纤维细胞（NHSF）衰老标记蛋白30（SMP30）以及细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型（LC3Ⅱ）的影响。方法 用150 μmol/L H2O2处理2 ~ 4代NHSF 2 h,构建细胞衰老模型作为H2O2组,而未处理的NHSF作为对照组。细胞衰老β半乳糖苷酶（SA？β？gal）染色法检测衰老细胞比例,间接免疫荧光检测自噬相关蛋白LC3的表达,反转录PCR（RT？PCR）检测SMP30 mRNA的表达,Western印迹法检测SMP30和LC3蛋白的表达。结果 H2O2组NHSF的SA？β？gal染色阳性率（41.70% ± 2.95%）显著高于对照组（3.03% ± 0.25%,t = 22.59,P 〈 0.05）。间接免疫荧光结果显示,H2O2组NHSF LC3阳性率（12.60% ± 1.57%）明显低于对照组（23.67% ± 3.04%,t = 5.61,P 〈 0.05）。Western印迹显示,H2O2组LC3Ⅰ/GAPDH比值（0.40 ± 0.02）与对照组（0.41 ± 0.04）比较差异无统计学意义（P 〉 0.05）,而H2O2组LC3Ⅱ/GAPDH比值（0.20 ± 0.02）明显低于对照组（0.80 ± 0.03,t = 29.69,P 〈 0.05）,且H2O2组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值（0.51 ± 0.03）亦明显低于对照组（1.98 ± 0.23,t = 10.967,P 〈 0.05）。H2O2组SMP30 mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.16 ± 0.01和0.27 ± 0.02）明显低于对照组（分别为0.35 ± 0.01和0.63 ± 0.02）,均P 〈 0.05。结论 H2O2可降低NHSF中SMP30及LC3Ⅱ的表达水平,加速NHSF衰老。     

蛋白质芯片技术在矽肺早期血清生物标志物筛选中的应用

目的寻找可对矽肺患者进行早期诊断的血清特异性生物标志物。方法选择接触矽尘未患病者(0组)、接触矽尘有可疑矽肺者(0 组)、接触矽尘后患I期矽肺者(I组)以及未接触矽尘的正常人(正常对照组)各20例,利用表面加强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测各组血清蛋白质指纹图谱。结果质荷比(M/Z)为2746、3269、3402、3941、4184、5488、5914、6122、7572、7937的10个标志分子在矽尘暴露人员(0、0 、I组)和正常人的血清中差异表达,相对含量变化具有统计学意义(P<0.05)。其中M/Z为2746的分子在矽尘暴露人员血清中高表达,而在正常人血清中低表达;相反,M/Z为4184、5914和6122的分子在正常人血清中高表达,而在矽尘暴露人员血清中低表达。M/Z为2938、3269、3821、4095、5071、5483、5640的7个标志分子在矽尘暴露人员各组血清中差异表达,相对含量变化具有统计学意义(P<0.05),其中M/Z为5071、5483和5640的分子在矽尘暴露人员0组和0 组中均为低表达,而在I组中高表达。结论M/Z为2746、4184、5914和6122的分子可能成为矽肺患者与正常人的鉴别诊断指标,而M/Z为5071、5483和5640的分子可能成为矽肺的早期诊断指标。     

131I标记抗NRP-1单克隆抗体A6在荷瘤裸鼠体内分布和显像研究

目的制备131I标记的抗神经纤毛蛋白-1（NRP-1）单克隆抗体A6（131I-A6）,探讨其作为NRP-1靶向显像新型分子探针的可行性。方法（1）采用Iodogen法对A6进行131I标记,检测其标记率、放化纯和体外稳定性。（2）以人胶质瘤细胞株U87MG为实验细胞进行体外实验,测定131I—A6生物学活性、结合率及其与受体的亲和力。（3）将荷U87MG胶质瘤模型裸鼠采用随机抽样法分为5组,每组5只,分别于注射1．2MBq 131I-A6后24、48、72、96和120h处死,计算各脏器放射性摄取（％ID／g）、肿瘤／血液（T／B）和肿瘤／肌肉（T／M）比值。（4）取6只荷瘤裸鼠,以随机抽样法分为未阻断组和竞争阻断组,前组注射3．7MBq 131I-A6;后组注射3．7MBq 131I-A6和未标记的700仙gA6,均分别于注射后24、48、72、96和120h行SPECT／CT显像。采用两样本t检验对实验数据进行统计学分析。结果（1）131I—A6标记率为（95．46±3．34）％,放化纯〉95％;131I—A6在室温下PBS溶液中放置至96h,其放化纯仍〉85％。（2） 131I-A6与U87MG胶质瘤细胞特异性结合率1h达到最高值,为（15．80±1．30）％,在加入未标记的抗体A6时,U87MG细胞对131I-A6明显受抑制（t=2．862,P〈0．05）;与细胞表面抗原的亲和力（kd）为（1．67±0．14）nmol／L。（3）24h时131I—A6在荷瘤裸鼠血液放射性最高,为（8．00±1．42）％ID／g;其次是肝脏和肿瘤组织,分别为（7．68±1．56）和（6．00±1．24）％ID／g;脑、骨、肌肉组织放射性计数较低。给药后24h,T／B和T／M分别为0．78±0．10和3．20±0．30,随时间延长比值逐渐增高,在120h达到最高,分别为1．87±0．50和7．13±0．24。（4）体内显像示,注射 131I-A6后24h肿瘤略显影,随时间延长变清晰,120h显影为最清晰,阻断后未见肿瘤显影。结论 131I-A6的标记方法简单易行,标记率高,产物稳定性好,?     

储存磷光质屏放射自显影在测定兔血浆中^125I—重组人尿激酶原浓度的应用

目的　探讨储存磷光质屏放射自显影结合聚丙烯酰胺凝胶电泳测定兔血中12 5I 重组人尿激酶原 (12 5I rhpro UK)浓度的方法。方法　将含12 5I rhpro UK样品的聚丙烯酰胺凝胶贴于储存磷光质屏上曝光 ,根据储存磷光质屏上检出的吸收度值计算12 5I rhpro UK浓度。结果与结论　该方法特异性、线性及线性范围、灵敏度、重现性、回收率均可达到蛋白多肽药物药代动力学研究的要求。并测定了 0 .8mg·kg-1静脉给药时 (12 5I rhpro UK/rhpro UK =1∶9混合 ) ,兔血浆12 5I rhpro UK浓度 -时间曲线     

RAPD用于结核暴发流行点传染源鉴别及其意义

作者就随机扩增ＤＮＡ多态性分析 (ＲＡＰＤ)技术用于结核暴发流行点传染源鉴别的价值进行了探讨 ,现报道如下。1　材料与方法1 1　痰菌分离培养　由全军结核病防疫队取自北京市某结核病暴发流行点共 13份痰标本 ,于次日用匡氏琼脂培养基做抗酸杆菌分离培养[1] 。1 2　菌型鉴定　采用多引物ＰＣＲ和传统生化、培养分型 2种技术对抗酸杆菌阳性分离物分型鉴定[2 ] 。1 3　药敏试验　采用匡氏琼脂培养基鉴定结核杆菌分离株对 8种抗痨药物的抗性[3 ] 。1 4　ＤＮＡ提取　用酚 氯仿法从受试结核菌提取ＤＮＡ。为确保操作安全 ,用作ＤＮＡ提取的菌…     

翼点入路的显微解剖

目的：掌握经翼点入路对下丘脑区结构显露的显微外科解剖和显份科技术。方法：12例(24侧)经颈内动脉灌注红色乳胶成人尸颅上模拟翼点入路。借助手术显微镜6-25倍下通过鞍区手术间隙对下丘脑区重要结构进行解剖。结果：经翼点入路，通过鞍区的手术间隙，。可对颈内动脉床突上段及其分支，基底动脉顶端，垂体柄、漏斗区、终板等下丘脑区重要结构进行良好的暴露。结论：经翼点入路对鞍区病变。特别是颅咽管瘤和动脉瘤显微手术时，需熟悉局部解剖结构，利用显微外科技术保护周围重要血管和神经组织。     

急性心肌梗死MRI与心肌坏死标记物及心电图的相关性研究

目的 探讨心脏MRI确定的心肌梗死的梗死质量、梗死百分比、左心室功能等参数与肌酸激酶同工酶(CK-MB)峰值、肌钙蛋白T(TnT)峰值及心电图(ECG)的相关性.方法 对19例首次发病3～7 d的急件心肌梗死患者行心脏MR检查.采用1.5 T MR仪行首过灌注成像及延迟强化成像.分别评价每例患者的梗死质量、梗死百分比、左心室功能,记录TnT峰值、CK-MB峰值并分析ECG.对正态分布资料行Pearson相关性检验,对非正态分布资料行Spearman相关性检验.用独立样本t检验进行2组计量资料的均数比较.结果 19例患者的梗死质量中位数为6,3 g,与左心室射血分数(LVEF)(54.1±15.4)/呈负相关(r=-0.563,P=0.012),与TnT峰值(中位数为0.8μg/L,r=0.487,P=0.0340)、左心室收缩末期容积指数(LVESVI;中位数为23.4 ml/m2,r=0.480,P=0.038)相关.梗死百分比(中位数为6.0/)分别与TnT峰值(r=0.583,P=0.009)、CK-MB峰值(中位数为43.0 U/L,r=0.470,P=0.042)、每搏输出量[LVSV;(57.6±15.0)ml,(r=-0.482,P:0.036)]相关.TnT峰值还与LVSV相关(r=-0.524,P=0.021).心肌梗死ST段抬高与非ST段抬高相比,受累段数(中位数分别为3.0和2.0,t:2.972,P=0.009)更多,TnT峰值(中位数分别为1.0和0.7μg/L,t=2.245,P=0.041)、CK-MB峰值(中位数分别为43和35 U/L,t=2.508,P=0.024)更高.结论 急性期心肌梗死的梗死质最直接影响左心室功能.TnT峰值是反映梗死三百分比及左心室功能的较好指标,ST段抬高心肌梗死的范围更大.     

放射性同位素示踪技术在反义核酸研究中的应用

用放射性同位素标记反义核酸,可方便地对反义核酸的体内行为进行研究,或者进行反义显像和反义治疗。目前已有多种不同性质的放射性同位素被用于反义核酸标记,标记方法也不断得到完善。本文对常用于反义核酸标记的放射性同位素的特点及其标记方法进行综述,介绍其在反义治疗药物和反义显像研究中的应用情况,并评述了反义核酸同位素标记存在的问题和发展趋势。     

富勒烯及其衍生物在核生物医学领域应用的研究现状

富勒烯及其衍生物是一类具有独特物理化学特性的化合物,在生物医学领域有广泛的应用前景。介绍该类化合物的合成及制备,富勒烯笼外配合物的抗HIV病毒、断裂DNA和清除自由基等生物学活性,以及富勒烯金属包合物在核医学诊断中的应用研究。