痛泻要方水煎液化学成分的UPLC-LTQ-Orbitrap-MS分析

目的：采用超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)快速鉴定痛泻要方水煎液中的化学成分。方法：色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～4 min,5%～15%B;4～10 min,15%～25%B;10～15 min,25%～60%B;15～20 min,60%～90%B;20～25 min,90%～100%B;25～27 min,100%B;27～30 min,100%～5%B;30～32 min,5%B),流速0.3 m L·min^-1,进样量3μL,柱温35℃。质谱条件为电喷雾离子源(ESI),扫描范围m/z 100～1 250,正、负离子模式下分别采集MS、MS/MS数据。结合对照品、数据库和文献信息,运用Trace Finder 4.1和Xcalibur 2.1软件对痛泻要方水煎液进行化学成分鉴定。结果：在正、负离子模式下,从痛泻要方水煎液中共鉴定出90个化合物,主...     

基于Nrf2/HO-1通路的中医药干预溃疡性结肠炎研究进展

溃疡性结肠炎（UC）是临床常见的一种慢性消化系统疾病,其病情反复且治疗难度大,发病机制复杂,与氧化应激反应相关。核转录因子E₂相关因子2（Nrf2）是抗氧化反应中的重要因子,可调控其下游血红素加氧-1（HO-1）的表达,发挥维持机体氧化还原稳态的作用。UC的病程中Nrf2与HO-1的生物活性及含量水平均下降,组织抗氧化和抗炎能力减弱,肠上皮细胞损伤,肠黏膜屏障破坏。目前西医临床上主要以控制炎症和缓解症状治疗为主,虽有一定疗效,但存在停药后易复发、长期用药不良反应多等问题。研究表明,中医药治疗手段丰富,治疗方法灵活,在UC的防治上有广阔的应用前景。近年来,以Nrf2/HO-1通路为切入点,中医药领域开展了大量关于UC中该信号的基础和临床实验,结果表明Nrf2/HO-1通路是中医药治疗UC的重要潜在靶点。基于虚实夹杂的病因病机,中医药以清热解毒燥湿、活血化瘀止痛、益气补中温里和标本兼治等法调控Nrf2/HO-1通路,提高组织抗氧化应激能力,维持促炎因子与抗炎因子平衡,缓解炎症反应,发挥对UC的治疗作用。该文总结和分析了中医药靶向Nrf2/HO-1信号通路干预UC的机制和作用,以期为科研人员更为全面认识中医药对UC中Nrf2/HO-1通路的作用机制提供帮助,旨在推动今后中医药合理运用于临床UC的防治。     

丹参多酚酸盐通过AMPK/Sirt1/PGC-1α信号通路诱导膜性肾病大鼠足细胞自噬的机制

目的：通过观察丹参多酚酸盐对膜性肾病(MN)大鼠肾组织中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、沉默信息调节因子(Sirt1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)蛋白的表达及细胞自噬和凋亡的情况,探讨其治疗MN的可能的分子机制。方法：80只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,盐酸贝那普利组(10 mg·kg^-1),丹参多酚酸盐低、中、高剂量组(16.7、33.3、66.7 mg·kg^-1),通过尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法造模。造模成功后,各组按照相应比例剂量连续给药4周后留取24 h尿、血清和肾组织,尿液用于检测24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、血清用于检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。采用光镜、电镜、免疫荧光法观察肾脏病理学变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾组织磷酸化(p)-AMPK、AMPK、p...     

自噬在阿尔茨海默病中的作用及中医药研究进展

近年来伴随社会老龄化程度不断增加,阿尔兹海默病（AD）作为一种神经退行性疾病的发病率不断升高,因为其发病机制十分复杂,目前没有有效的防治方法。细胞中的过度磷酸化的抑制微管相关蛋白（Tau）和β-淀粉样蛋白（Aβ）的堆积形成大量老年斑是AD的主要病理特征。自噬是一种机体内通过清除异常蛋白质来维持机体稳态的的保护机制。研究表明通过调控自噬通路可以影响细胞中的Tau蛋白和Aβ,以达到治疗AD的目的。中医药的作用特点是多途径、多成分、多靶点,对发病机制不明的AD治疗有独特优势。目前中药对AD的防治已初见成效,研究者发现许多单味中药及中药复方可以影响自噬的相关通路来调控自噬活性,从而进一步治疗AD。因此,该文总结了近年来的相关研究,对单味中药的有效成分和中药复方进行分类叙述,讨论不同类别有效成分和复方通过影响自噬相关通路,调控细胞中磷酸化Tau蛋白以及Aβ的生成和清除等并延缓AD进程,为之后中药以影响自噬为切入点来防治AD奠定基础。     

基于UPLC-Q-TOF-MS的建昌帮砂仁陈皮制熟地黄适宜炮制时间分析

目的：研究建昌帮砂仁陈皮制熟地黄炮制过程中差异代谢物和苷类分解产物还原糖的相对含量变化,为揭示该特色品种的炮制原理奠定基础。方法：以建昌帮砂仁陈皮制熟地黄的0～54 h炮制过程样品为研究对象,运用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）检测其次级代谢产物,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱（0～1 min,1%～3%B;1～10 min,3%～9%B;10～15 min,9%～12%B;15～22 min,12%～18%B;22～31 min,18%～24%B;31～35 min,24%～100%B;35～36 min,100%～5%B;36～40 min,5%～1%B;40～45 min,1%B）,柱温40℃,进样量3μL,流速0.3 mL·min-1;运用电喷雾离子源（ESI）,在负离子模式下进行扫描并采集MS数据,扫描范围m/z 50～1 250,利用PeakView 1.2进行数据分析,结合文献信息及化学成分数据库对砂仁陈皮制熟地黄化学成分进行鉴定;MS数据通过MarkerView 1.2归一化处理后应用多元统计分析方法找出差...     

基于血清药物化学和网络药理学的泽漆抗慢阻肺药效物质基础分析

目的：对泽漆水提物的入血成分进行分析,探讨该水提物抗慢性阻塞性肺疾病（COPD）的药效物质基础。方法：采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）检测大鼠灌胃泽漆水提物后入血成分,检测条件为Agilent RRHD SB-C18色谱柱（3 mm×100 mm,1.8μm）,流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0～15 min,5%～30%B;15～20 min,30%～50%B;20～30 min,50%～95%B;30～35 min,95%～5%B）,检测波长190～800 nm,柱温40℃,流速0.3 mL·min-1,进样量4μL,电喷雾离子源（ESI）,正、负离子模式检测,检测范围m/z 50～1 250。利用网络药理学方法对入血成分的靶点与COPD的靶点进行交互分析,通过网络拓扑分析筛选关键成分和关键靶点,运用Metascape数据库预测泽漆抗COPD主要涉及的分子功能、生物过程、细胞组成及信号通路,并采用分子对接技术判断关键靶点与关键成分的亲合力。结果：大鼠灌胃泽漆水提物后,从其含药血清中检测出了29个入血成分,9个为原...     

补肾健脾解毒利咽法对IgA肾病模型大鼠归巢相关黏附分子的影响

目的 探讨补肾健脾解毒利咽法不同剂量中药对免疫球蛋白A（IgA）肾病模型大鼠小肠及骨髓中黏附分子整合素α₄β₁与血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）、基质细胞衍生因子-1（SDF-1）与趋化因子受体-4（CXCR4）表达的影响。方法 采用雄性SD大鼠120只,应用牛血清白蛋白（BSA）灌胃、CCl₄皮下注射、脂多糖（LPS）尾静脉注射等方案的改良法制备IgA肾病大鼠模型后,验证模型成功后,随机将大鼠分为空白组、模型组、洛汀新组（63 mg·kg^-1）、补肾健脾解毒利咽法（中药）低、中、高剂量组（10.4、20.81、41.62 g·kg^-1）,每组16只,给药7周后处死大鼠,收集相关标本并检验,采用免疫组化检测大鼠小肠固有膜黏附分子α₄ β₁,VCAM-1,SDF-1和CXCR4的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠骨髓中黏附分子α₄ β₁,VCAM-1,SDF-1和CXCR4 mRNA表达变化情况。结果 与空白组比较,第10、12、14、16周模型组大鼠的尿红细胞计数均显著升（P<0.01）。与模型组比较,第10、12、14、16周洛汀新组与中药各剂量组大鼠尿红细胞计数均明显降低（P<0.05）,其中中药中剂量组对于大鼠尿红细胞计数改善更明显（P<0.05）。与空白组比较,模型组大鼠小肠固有膜黏附分子α₄ β₁,VCAM-1,SDF-1和CXCR4蛋白表达均明显升高（P<0.05）。与模型组比较,洛汀新组及中药各剂量组大鼠小肠固有膜α₄ β₁,VCAM-1,SDF-1和CXCR4蛋白表达均明显下降（P<0.05）。与模型组比较,中药中剂量组大鼠小肠固有膜SDF-1与CXCR4蛋白表达均明显下降（P<0.05）。与空白组比较,模型组大鼠骨髓黏附分子α₄ β₁,SDF-1 mRNA表达明显下降,VCAM-1,CXCR4 mRNA表达明显升高（P<0.05）。与模型组比较,洛丁新组与中药各剂量组大鼠骨髓黏附分子SDF-1,CXCR4 mRNA均明显下降（P<0.05）。结论 补肾健脾解毒利咽法通过调节小肠固有膜及骨髓中黏附分子α₄ β₁与VCAM-1、SDF-1与CXCR4的表达,从而调节浆细胞的归巢效应,可能与Toll样受体介导的免疫应答激活有关,补肾健脾解毒利咽法中药可能通过减少相关黏附分子的表达量从而浆细胞在循环中的增殖,进而减轻IgA肾病肾脏损伤。     

简述蒙药额尔敦-7汤

目的：对蒙药额尔敦-7汤进行方解分析,综述药理与机制、临床应用,为该方进一步研究与利用提供科学依据。方法：采用查阅古籍文献研究与考证方法进行文献综述。结果：蒙药额尔敦-7汤出自《观者之喜》,属传统蒙药经典方。该方由苦参20 g,栀子、悬钩子木各15 g,川楝子、山柰、土木香各10 g,诃子5 g等七味单味药组成。蒙药额尔敦-7汤具有促使热病成熟,使热收敛、清除等功效,治疗未成熟热,疫热,轻型热症,赫依、血相讧之热等疾病疗效确切。结论：蒙药额尔敦-7汤出自《观者之喜》,属传统蒙药经典方,对被西医诊断为流行性感冒用此药疗效显著。     

PA-aO2、PaCO2和Lac水平与急性百草枯中毒患者的预后的相关性

目的探究肺泡-动脉氧分压差(PA-aO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)和血乳酸(Lac水平与急性百草枯中毒(APP)患者的预后的相关性。方法选取2018年8月至2020年8月就诊于本院的126例APP患者,根据3个月随访情况,分为存活组57例和死亡组69例,另选取同期于本院进行健康体检的健康人群45例作为对照组,检测3组PA-aO2、PaCO2和Lac水平。结果与对照组比较,APP患者PA-aO2和Lac水平显著升高,PaCO2水平显著降低,且死亡组变化幅度显著大于存活组,差异有统计学意义(P<0.05);PA-aO2和Lac与存活组呈负相关,与死亡组呈正相关,PaCO2与存活组呈正相关,与死亡组呈负相关(P<0.05);PA-aO2、PaCO2和Lac联合检测对APP患者预后的预测价值显著高于单一指标,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PA-aO2、PaCO2和Lac水平与APP患者预后密切相关,值得临床参考。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定海鱼中无机砷

目的建立测定海鱼中无机砷含量的高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法。方法海鱼样品经稀硝酸超声热水浴提取后,AS7阴离子交换色谱柱分离,3.5 mmol/L(NH4)2CO3+1%甲醇与100 mmol/L(NH4)2CO3+1%甲醇流动相梯度洗脱,电感耦合等离子体质谱仪测定,以保留时间定性,外标法定量。结果在1~100μg/L的线性范围,6种砷形态化合物的回归方程均呈良好的线性关系,相关系数均优于0.9996,检出限为0.05~0.25μg/L,定量限为0.17~0.84μg/L,3个浓度加标回收率为88.5%~106.4%,相对标准偏差为2.5%~4.9%。结论本方法满足海鱼中无机砷含量的测定要求,提取快速,稳定,操作简单,检出限低,方法的重现性好,灵敏度高。