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991.
目的 筛选和鉴定人乳头状瘤病毒11型E7抗原(HPVllE7)HLA-A*0201限制性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位.方法 预测HPVllE7抗原HLA-A*0201限制性CTL表位并合成相对应的表位多肽和四聚体(tetramer),即HPVllE7 7-15(TLKDIVLDL)、15-23(LQPPDPVGL)、47-55(PLTQHYQIL)、81-89(DLLLGTLNI)和82-90(LLLGTLNIV).从健康HLA-A*0201成人外周血单一核细胞诱导树突状细胞(DC)并负载上述表位多肽,流式细胞技术检测DC成熟分化标记及ELISA法检测DC分泌的IL-12;成熟DC负载各组多肽后观察DC激活T淋巴细胞的效应,ELISA法检测T细胞分泌的IFN-γ;四聚体检测抗原特异性CD8+ T细胞及乳酸脱氢酶(LDH)释放法评价DC诱导的CTL对靶细胞的特异性体外杀伤效应.结果 预测的5条HPVllE7表位多肽均能诱导DC的成熟分化;E7 7-15、82-90和15-23多肽负载的DC能激活T淋巴细胞分泌高水平IFN-γ;E7 7-15多肽负载的DC能刺激特异性tetramer+CD8+细胞增殖且其诱导的CTL对HPVllE7/293细胞产生高效率的特异性杀伤作用(P<0.05).结论 筛选并鉴定出1条HPVllE7HLA-A*0201限制性CTL表位E7 7-15(TLKDIVLDL),负载该表位肽的DC体外可诱导高效、特异性的CTL效应,抗原性较强,有可能作为HPV感染治疗用肽疫苗的候选表位. 相似文献
992.
RNA编辑酶ADAR1对淋巴细胞系增殖的影响 总被引:2,自引:2,他引:2
目的 探索ADAR1活性升高对淋巴细胞细胞增殖的影响。方法 (1)构建反转录病毒载体;PCR从小鼠cDNA中放大ADAR1全长基因,连入反转录病毒MIEV载体,感染包装细胞后分泌病毒颗粒;(2)病毒颗粒感染T淋巴细胞CTLL2和B淋巴细胞A20,观察细胞增殖的变化;(3)MTT法测定细胞增殖率。结果 ADAR1/MIEV病毒感染淋巴细胞后,使细胞增殖速度减慢。结论 ADAR1在淋巴细胞发挥功能方面起有重要的作用,但哪些物质需要编辑以及具体机制如何,需要进一步研究。 相似文献
993.
登革2型病毒E蛋白免疫优势表位的筛选鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 用噬菌体展示肽库筛选登革2型病毒(DEN2)E蛋白的抗原表位,并确定该抗原表位性质。方法 以DEN2型特异的E单克隆抗体作为筛选分子,生物淘洗噬菌体随机12肽库,将筛选的噬菌体阳性克隆进行ELISA检测、DNA序列测定及展示肽的氨基酸序列推导,通过噬菌体展示肽序列与DEN2E蛋白的氨基酸一级结构的对比,初步确定E蛋白的抗原表位;用模拟该表位线性序列的合成十肽进行抗体结合试验、噬菌体竞争抑制试验及与DEN感染患者的血清学试验,确定其为免疫优势线性表位。结果 肽库淘洗获得的11个ELISA阳性的噬菌体克隆有相似的结构基序WFKKGSS,其展示肽与DEN2E蛋白390~398 AA序列有3~5个氨基酸相同。对应于DEN2E蛋白390~399AA的合成十肽能与淘洗单抗特异反应,并可抑制噬菌体阳性克隆与该单抗结合。该合成肽与DEN2感染患者血清有较高的免疫反应性。结论 本实验通过噬菌体随机肽库的生物淘洗确定的DEN2E蛋白(E390~398AA)线性序列为免疫优势表位,其对应的合成肽E10可望用于DEN2感染的快速诊断。 相似文献
994.
995.
目的 了解IL-7对中国HIV/AIDS患者病程的影响。方法应用超敏感酶免法对66例中国HIV/AIDS感染者及8例健康对照者血浆IL-7水平进行定量检测,分析其与CD^+T细胞绝对值、血浆病毒载量及HIV表型的相关性;并且在体外研究rhIL-7对人PBMC中T淋巴细胞增殖及CXCR4表达的影响。结果中国HIV/AIDS患者血浆IL-7水平高于健康对照(P〈0.05),与CD4^+T细胞绝对值负相关(P〈0.01),与血浆病毒载量正相关(P〈0.05)。rhIL-7可在体外促进T淋巴细胞增殖反应及CXCR4表达。结论中国HIV/AIDS患者血浆IL-7水平升高,且与疾病进展密切相关,可作为疾病进展的相关标志之一。 相似文献
996.
EB病毒转化B淋巴细胞影响因素的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
人外周血B淋巴细胞膜上有EB病毒 (EBV)受体 ,在体外可被EBV转化为B淋巴母细胞样细胞系 (LCL) ,LCL具有永生性 ,能在体外长期传代生长 ,且能保持较稳定的遗传学性状。因而LCL可被广泛应用于医学生物学研究的许多领域 ,如进行基因组遗传物质结构的分析 ,某些细胞生物学性状的检测等。目前建立LCL的方法主要有环孢霉素A法、微量全血法及冻存全血法。但微量全血法和冻存全血法因具有操作简单 ,所需标本量少的优点 ,而被广泛采用。我们就影响微量全血法转化效果的因素作了初步探讨。实验中共收集血标本 78份 ,其中正常人 … 相似文献
997.
NF-κB在人肝细胞肝癌中的表达及与HBV X蛋白的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究核转录因子NF--κB在人肝细胞肝癌组织中的表达及其与乙型肝炎病毒(HBV )X蛋白的关系。方法;用免疫组织化学S-P法,检测52例人肝细胞肝癌组织中核转录因子NF--κB及HBV X蛋白的表达;用脂质体介导的基因转染法将HBV x基因真核表达载体pcDNA3.1-HBX转染入人肝癌细胞系HCC-9204,检测肝癌细胞内核转录因子NF--κB的表达。结果:52例人肝细胞肝癌组织均有核转录因子NF--κB的广泛表达,并且在11例HBV X蛋白阳性的肝癌组织,核转录因子NF--κB位于细胞胞质和胞核,而在41例HBV X蛋白阴性的肝癌组织,核转录因子NF--κB位于肝癌细胞的胞质。将HBV x基因真核表达载体pcDNA3.1-HBX转染 入人肝癌细胞系HCC-9204,并在稳定表达X蛋白 的肝癌细胞,核转录因子NF--κB定位于其胞质和胞核,而未进行基因转染的亲体细胞,核转录因子NF--κB仅定位于细胞质,细胞核无核转录因子NF--κB的表达。结论:核转录因子NF--κB在人肝细胞肝癌组织中广泛表达,人肝细胞肝癌中存在着核转录因子NF--κB的异常激活,并且核转录因子NF--κB的异常激活与HBV X蛋白有关,X蛋白激活核转录因子NF--κB, 使其从细胞转位于细胞核,这可能在HBV相关的人原发性肝癌肝癌的发生中起一定作用。 相似文献
998.
刘桂兰 《细胞与分子免疫学杂志》2002,18(1):57-57
TT病毒(TTV)是近几年来新发现的一种与输血相关的新型病毒。近年来报道甚多,但在贵州地区至今尚无有关捐血人群TTV感染方面的报道。笔者采用酶联免疫吸附试验(ELISA),对贵阳地区近年来部分捐血人群进行TTV实验检测,旨在了解贵阳地区捐血人群的TTV感染情况,并提供有实用价值的资料。1 材料和方法1.1材料 调查对象:贵阳地区捐血者1999年6月至2001年4月共335例。实验标本全部来自血液中心街头流动采用血车及来我中心捐血者。及时分离血清置-20℃冻存保存备检。EIJSA读数仪为KM_2型(… 相似文献
999.
塞姆利基森林病毒翻译增强序列对HIV Gag DNA疫苗抗原表达和免疫原性的调节 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究塞姆利基森林病毒(Semliki forest virus,SFV)衣壳蛋白5’翻译增强区对基于该病毒复制子的HIV Gag DNA疫苗抗原表达水平和免疫原性的影响:方法将SFV衣壳蛋白(capsid,C蛋白)基因的5’端102bp翻译增强区插入到SFT复制子DNA疫苗载体pCMV-Rep的SFV亚基因启动子下游,得到DNA疫苗载体pCMV-RepC。将删除ATG的HIV-1 gag基因插入pCMV-RepC,使gag编码区与翻详增强区融合,得到DNA疫苗质粒pCMV-RepC-gag。同时,构建携带未融合翻译增强序列的DNA疫苗质粒pCMV-Rep-gag。Western blot检测翻译增强序列对Gag表达水平的影响。用上述两种DNA疫苗分别免疫BALB/c雌性小鼠,ELISA检测Gag特片的抗体反应,ELISPOT和细胞内因子染色技术检测细胞免疫应答。结果衣壳蛋白5’翻译增强区增强了Gag表达水平,对体液免疫应答没有显著影响,但显著增强了特异性细胞免疫应答水平。结论SFVC蛋白翻译增强区能显著提高SFV复制子DNA疫苗的抗原表达和抗原特异性细胞免疫反心。 相似文献
1000.
万涛 《国外医学:免疫学分册》1996,19(4):179-182
目前采用同源重组构建了多种表达外源基因的重组痘苗病毒载体,包括IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IFNα,IFNγ,GM-CSF,TNF,IL-10等细胞因子基因及p97,CEA,MUC1等肿瘤抗原基因,并应用于肿瘤基因治疗的体内外实验取得了明显的疗效。应用痘苗病毒载体进行in vivo基因治疗可望成为肿瘤基因治疗的一种新模式。 相似文献