生长反应因子与大鼠颈动脉损伤后内膜增生

背景：经皮冠状动脉介入治疗后再狭窄仍是影响介入治疗远期疗效的严重的临床问题。目的：在大鼠颈动脉球囊损伤模型中,探讨早期生长反应因子诱骗寡脱氧核苷酸对损伤后的血管内膜的影响,并初步探讨其分子机制。方法：利用2FFogarty导管损伤Wistar大鼠颈动脉,构建大鼠球囊损伤模型,在转染试剂Fugene6介导下经血管腔内转染生长反应因子诱骗寡脱氧核苷酸,苏木精一伊红染色法观察血管内膜增生情况,免疫组化法检测CyclinD1,观察其表达情况。结果与结论：早期生长反应因子诱骗寡脱氧核苷酸可以显著抑制大鼠颈动脉球囊损伤后血管内膜增生,同时也可以下调大鼠颈动脉球囊损伤后表达显著增加的CyclinD1。说明生长反应因子诱骗寡脱氧核苷酸可能通过抑制CyclinD1的表达,使细胞周期停滞,从而抑制损伤后的大鼠颈动脉内膜的增生。     

中国汉族人群17个心血管疾病易感基因位点基因型和基因频率分析

目的:调查中国汉族人群中17个心血管疾病易感基因位点的基因型和基因频率.方法: 运用基因芯片技术同时检测138例来自中国大部分省市的汉族人的13个心血管易感基因的17个SNPs.结果: 国内未曾见报道的4个基因位点基因型频率分别为: ET-2985 AA∶AG∶GG为2.2% (3)∶22.2% (30)∶75.6% (102);NPRC(-55) AA∶AC∶CC为8.1% (11)∶23.0% (31)∶68.9% (93);KCNQ1140则只发现了SS基因型;CYP46rs754203 CC∶CT∶TT为55.0%(66)∶20.0%(24)∶25.0%(30).ApoBMsp1 ∶-为92%(232)∶8%(20),而Hapmap公布的则为100%(90)∶0%(0),两者比较,差异有统计学意义(χ2=7.587,P=0.000).MTHFR677 C∶T为70%(168)∶30%(72),与Hapmap中中国北京汉族人(CHB)公布的结果48.9%(44)∶51.1%(46),以及ALFRED中公布的中国香港汉族(SA0008510)77.8%(322)∶22.2%(92)比较,差异具有统计学意义(χ2和P分别为12.70,0.000;4.89, 0.027).其他位点的调查结果与Hapmap计划中CHB(ANP2238, ApoBXbaⅠ, NOS3298, ApoBEcorⅠ和ApoE112)和ALFRED网站的SA0008510的基因频率(AGT235, ACEAlu, ApoCⅢ3175, ApoCⅢ3206, ApoE158和SerpinA3rs4934)有较好的吻合.结论:SNPs频率分布具有种族和地区差异,中国汉族人群中ANP2238 C, ApoBEcorⅠ(-)和KCNQ1140 G, 是少见的等位基因(《5%),可能不是心血管疾病的主要原因.用基因芯片检测多个心血管疾病易感基因SNPs结果可靠.     

光气吸入对大鼠肺组织基因表达谱的影响

目的:研究光气吸入染毒前后大鼠肺组织基因表达的差异,探讨光气肺损伤作用相关的基因谱.方法:提取正常对照组和光气染毒组肺组织的总RNA,并以此为模板制备荧光标记的cRNA靶物,经杂交、洗涤后,通过扫描荧光强度和计算机软件分析,寻找染毒前后上调和下调的差异表达基因.结果:在大鼠20500个靶基因中,初步筛选出801条差异表达基因,表达上调的有557条,下调的有254条.根据基因的生物学功能,差异表达基因被分为9类:G1自由基\电子传递相关;G2应激炎症相关;G3物质代谢相关;G4细胞增殖\分化\凋亡相关;G5基因表达调控相关;G6受体和信号转导相关;G7蛋白质修饰\分解相关;G8细胞骨架\运动相关;G9离子通道与物质转运相关等.结论:光气可以引起肺组织基因的多发性改变,其差异表达基因的功能分类为进一步探讨光气中毒发生、发展的机制和有效救治提供新的线索和思路.     

本刊声明

近期有不法分子仿制本刊网站,诱骗作者在虚假网站上通过电子邮箱投稿,之后骗取钱财,为此,本刊声明如下:1.本刊注册网站为http://www.zglcyxyxzz.org及http://www.jccmi.com.cn,其他形式的网站均为虚假网站,本刊从未授权其他机构制作运行本刊网站。     

大鼠发育第6天与第8天睾丸组织基因表达差异的分析

目的 检测大鼠精原干细胞早期发育过程中第6天与第8天睾丸组织的差异表达基因.方法 通过基因芯片技术,利用Roche-NimbleGen公司大鼠12×135K全基因组表达谱芯片分别与第6天和第8天睾丸组织的cDNA进行杂交.比较两个样品差异表达的基因.结果 差异表达基因700个,表达上调的基因共295个,表达下调的基因共405个.参与了1 407个基因功能分析条目;参与了46个生物学通路.结论 大鼠精原干细胞早期发育过程中,精原干细胞的发生与增殖是一个多基因参与、多因素作用和多阶段进展的过程.     

Ki67反义核酸对裸鼠人肾癌细胞移植瘤生长及凋亡的影响

目的 观察Ki67基因反义寡核苷酸(ASODNs)对裸鼠人肾癌细胞移植瘤生长及凋亡的影响。方法 BALB／C-nu裸鼠接种入肾癌786-0细胞,治疗组瘤体注射ASODNs(10 mmol／g),连续4 d。对照组注射RPMI 1640培养基。药物处理后第3、6、12天每次处死小鼠4只,取瘤组织检测肿瘤体积;免疫组织化学、Western blot检测Ki67表达;脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测凋亡。结果ASODNs处理组小鼠肿瘤体积缩小,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);肿瘤Ki-67抗原表达率、Ki-67蛋白定量均降低,与对照组比较差异均有显著性(P<0.01);肿瘤细胞凋亡率增加,与对照组比较差异均有显著性(P<0.01)。结论Ki67 ASODNs能有效抑制裸鼠入肾癌细胞移植瘤生长并促进其凋亡。     

MMP-2反义寡核苷酸抑制人膀胱癌裸鼠异体移植瘤生长的实验研究

目的：探讨基质金属蛋白酶2（MMP2）反义寡核苷酸对人膀胱癌裸鼠异体移植瘤生长的抑制作用。方法：制备膀胱癌裸鼠移植瘤模型18只,随机分为3组：MMP2反义寡核苷酸（ASODN）治疗组、MMP2正义寡核苷酸（SODN）治疗组及对照组,每组6只。待瘤结节直径≥5mm后,分别在肿瘤细胞接种部位周围及中心皮下注射反义寡核苷酸／阳离子脂质体复合物、正义寡核苷酸／阳离子脂质体复合物和生理盐水。每周2次,连续4周,断颈处死裸鼠,计算肿瘤体积,称量瘤重。常规切片,HE染色,观察组织学形态并进行病理学评估。应用免疫组织化学技术（SP法）检测各组移植瘤组织中PCNA蛋白表达。结果：与对照组瘤重（7．49±0．53）g比较,ASODN组瘤重（4．18±0．53）g明屁降低（P〈0．01）;ASODN组、正义寡核苷酸（SODN）组抑瘤率分别为44．19％、8．41％（P〈0．01）;ASODN组、对照组增殖指数（PI值）分别为27．63％、88．39％,抑制率为60．76％（P〈0．01）;ASODN组瘤体病理学特征改善。结论：MMP-2反义寡核苷酸能抑制裸鼠体内移植瘤生长,通过反义寡核苷酸下调MMP-2的表达,降低癌细胞的增殖活性,有效逆转肿瘤的恶性表型。为膀胱癌的基因治疗提供了实验依据。     

联合检测诱骗受体-3和白细胞介素-17在人脑胶质瘤的表达及意义

目的 探讨诱骗受体-3(DcR-3)和白细胞介素-17(IL-17)在人脑胶质瘤中的表达及意义.方法 连续收集90例胶质瘤患者及脑外伤患者10例,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测各组血清DcR-3和IL-17浓度,Western blot和免疫荧光染色方法检测脑组织中的DcR-3和IL-17蛋白的表达.结果 胶质瘤患者DcR-3和IL-17在不同的性别、年龄中表达差异无统计学意义(P＞0.05),但与肿瘤病理分级有关,Ⅲ/Ⅳ级胶质瘤患者DcR-3和IL-17表达阳性例数明显高于Ⅰ/Ⅱ级患者(P＜0.01).绝大多数胶质瘤患者DcR-3表达升高伴有IL-17表达阳性.不同级别(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)的胶质瘤患者术前血清DcR-3和IL-17浓度均明显高于对照组(P＜0.01).术后DcR-3和IL-17浓度显著降低,Ⅰ～Ⅳ级的胶质瘤患者术前术后DcR-3和IL-17比较差异均有统计学意义(P＜0.01).术前血清DcR-3和IL-17水平与胶质瘤患者预后复发和存活密切相关.存活组胶质瘤患者血清DcR-3和IL-17平均浓度分别为(56.22±18.33)和(72.89士16.58)ng/L,显著低于死亡组[DcR-3和IL-17平均浓度分别为(103.27±10.47)和(121.00±9.02)ng/L,P＜0.01].结论 DcR-3和IL-17表达与人脑胶质瘤的病理分级呈正相关,联合检测血清DcR-3和IL-17浓度有助于胶质瘤患者的诊断、疗效观察和预后判断.     

细菌感染患者早期病原学分子诊断技术

目的 建立细菌感染患者早期病原及耐药性分子诊断技术，以便尽早实施有效的抗感染治疗方案，改善患者预后。方法 扩增细菌23S rRNA基因序列，同时扩增多种耐药基因，设计探针，通过基因芯片杂交技术识别其差异序列，鉴别细菌，检测耐药基因，用于病原早期诊断和耐药谱测定；收集血培养标本223份，脑脊液、胸水、腹水标本339份，尿液标本514份，比较所建立方法与传统方法的一致性，验证所建立技术的可靠性。结果 基因诊断方法可正确检出常见病原菌，并检测其是否携带mecA、SHV、CTX-M-1组和CTX-M-2组耐药基因。检测血、尿及脑脊液等无菌体液标本时，所建立的快速检测方法与常规方法的符合率分别为96．4％、99．8％和99．7％，总体符合率为99．1％，耐药性检测与传统药物敏感结果的符合率为95．7％，其准确性与常规方法相当，检测时间比常规方法平均减少（2．09±1．15）d。结论 多重PCR-基因芯片杂交技术可用于耐药菌感染的病原早期诊断和耐药感染的同步检测，应用于临床可望改善患者的预后。     

牙胚组织原位杂交方法学探讨

目的探讨牙胚组织原位杂交的最佳方法。方法用牙本质涎磷蛋白DSPP特异性寡核苷酸探针,检测不同时期牙胚DSPPmRNA的表达。结果各种牙胚的成牙本质细胞和前成釉细胞均检测到DSPPmRNA的表达,各阴性对照组均未检测到信号。结论所用的牙胚组织原位杂交方法敏感性高,特异性高。