血清胆碱酯酶与肺癌的相关性研究

血清胆碱酯酶(CHE)活力降低常见于有机磷中毒和肝实质细胞损害的患者。我们在临床工作中发现部分肺癌患者亦存在着血清CHE活力降低。为进一步了解两者之间的关系,我们检测了肺癌患者的血清CHE活力,并进行对照研究,以探讨CHE与肺癌的相关性。 一、资料与方法     

以mRNA差异显示方法克隆与鉴定小细胞肺癌新的相关基因cDNA片段

mRNA 差异显示方法是分离、克隆基因的先进技术。我们采用mRNA 差异显示方法克隆并鉴定了小细胞肺癌新的相关基因cDNA片段 ,现报告如下。一、材料与方法1.材料 :标本来源于中国医科大学第一临床学院胸外科一例小细胞肺癌患者。2 .方法 :应用mRNA差异显示技术克隆与鉴定出 3个差异cDNA片段 ,在国际互联网上应用blastsimilaritysearchingsystem进行同源性比较和分析。二、结果1.mRNA差异显示结果 :锚定引物和随机引物所得的差异显示结果显示出多条cDNA条带 ,选择其中 3条cDNA差异带用于分析 (其中差异带A为癌组织所特有 ,差异带B、…     

小细胞肺癌2F7单抗ScFv的高效表达及复性研究

目的 在大肠杆菌中高效表达小细胞肺癌单抗2F7的单链抗体（ScFv)，并获得具有生物学活性的ScFv。方法 利用PCR方法将2F7单抗重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）通过一人工设计的柔性连接肽（Linker)连接，再将单链抗体基因重组到原核表达载体pQE31中，构建单链抗体高效表达载体pQE-2F7-ScFv。将pQE-2F7-ScFv质粒转化大肠杆菌M15后诱导表达，并对表达产物进行纯化和稀释复性。结果 获得了2F7单链抗体的高效表达，表达蛋白大小约27.4kD，以包涵体形式存在。包涵体蛋白在经过变性、纯化和稀释复性后，获得了有功能的单链抗体。结论 成功地构建和表达了小细胞肺癌单抗F27的单链抗体，并对其进行了纯化和复性，将进一步促进2F7单抗小分子抗体的应用。     

肺癌细胞和蛙皮素抑制树突状细胞的产生和功能

目的：了解肺癌细胞株及蛙皮素对树突状细胞（DC）产生及功能的影响。方法：树突状细胞由健康人外周血单个核细胞CD14^ ，在完全细胞培养液中加入1000U／ml GM-CSF和1000U／ml IL-4,培养7天获得，肺癌细胞株CRL－5815，CRL－5826，Bombesin和Bombesin受体拮抗剂加入培养液中，Annxin V检测DC凋亡；流式细胞仪检测CD40，CD86，CD83，CD80，HLA－DR阳性表达。结果：培养7－10天后的DC前体细胞表达高水平的HLA－DR CD80 CD86 CD83 CD40。肺癌及蛙皮素可导致DC前体细胞凋亡，而蛙皮素受体拮抗剂可部分保护蛙皮素致DC凋亡的作用。加入肺癌细胞株或蛙皮素与DC共培养时明显抑制上述细胞表型的表达和DC刺激同种异体T细胞的增殖能力，当加入蛙皮素受体拮抗剂时，DC细胞表达HLA－DR CD80 CD86 CD83 CD40明显增加，接近DC正常对照组。结论：肺癌细胞株及蛙皮素可导致DC的凋亡，抑制树突状细胞的产生和功能。     

肺癌血浆VEGF、血循环癌细胞及树突状细胞相互关系的研究

目的　分析非小细胞肺癌 (NSCLC)患者VEGF血浆含量与癌细胞血道转移及树突状细胞 (DC)成熟的关系。方法　外周血获自正常人、肺部良性疾患以及NSCLC患者。血循环中的癌细胞和DC按已建立的流式细胞仪定量分析技术进行检测。血浆VEGF含量采用ELISA方法测定。结果　 12例正常人及 13例肺部良性疾患的血浆VEGF平均含量分别为 15 .7和 13.2 pg /ml,而 12 3例NSCLC患者的血浆VEGF平均含量为 140 .8pg /ml,显著高于正常人及肺部良性疾患者 (P <0 .0 0 1)。正常人及肺部良性疾患者外周血中癌细胞检测均为阴性 ,而 6 9例NSCLC患者血样中 32例阳性 ,阳性率为 46 .4% ,阳性患者的癌细胞平均含量为 0 .471× 10 6/L。正常人及肺部良性疾患者外周血中DC含量分别为 2 9.0和 2 2 .0× 10 6/L ,而 5 4例NSCLC患者的DC含量为 15 .9× 10 6/L ,显著低于正常人及肺部良性疾患者 (P <0 .0 5 )。若以VEGF≤ 5 6pg/m1作为正常值 ,则VEGF增高的NSCLC患者外周血中癌细胞阳性率及其含量明显增高而DC含量显著降低 ,其中以III、IV期患者最为突出。结论　NSCLC患者血浆VEGF增高具有促使癌细胞血道播散和抑制DC成熟的效应。     

肺癌中p53和p63 蛋白表达的高通量组织微阵研究

目的探讨p53和p63蛋白在肺癌中的表达及意义,并比较两者之间的表达关系.方法组织微阵(tissue microarray,TMA)技术和免疫组化S-P方法(immunohistochemistry,IHC).结果p53蛋白IHC染色中,TMA有价值的肿瘤标本为234(72.9%),总的表达率(+、++、+++)率为48.3%(113/234).随着肺鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)和腺癌(adenocarcinoma,Ad)分级升高,p53蛋白表达增强,与肺SCC及Ad病理分级有明显相关性(P＜0.05).p53蛋白表达与生存期呈明显负相关性(P＜0.05).p53蛋白表达与病理分型和临床分期等无明显相关性(P＞0.05).p53蛋白表达在肺癌原发肿瘤和转移淋巴结之间无明显差异(P＞0.05).p63蛋白IHC染色中,TMA有价值的肿瘤标本为264(82.2%),总的表达率(+、++、+++)为67.8%(179/264).p63蛋白在小细胞肺癌(small cell lung carcinoma,SCLC)表达最低16.0%(4/25),非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)与SCLC之间表达存在明显差异(P＜0.05).p63蛋白表达与病理组织分级、临床分期、生存期等无明显相关性(P＞0.05).p63蛋白表达在肺癌原发肿瘤和转移淋巴结之间无明显差异(P＞0.05).结论1.p53是肺癌的独立预后指标;2.p63蛋白在肺癌的不同病理类型的不同表达,说明肺癌的不同病理类型分子机理有所不同;3.p53蛋白和p63蛋白表达之间无明显相关性;4.TMA可以有效分析比较组织中肿瘤标记物的表达情况.     

中青年与老年非吸烟女性肺癌危险因素的比较研究

目的 分析比较中青年和老年非吸烟女性肺癌的危险因素。方法 于1992年2月～1993年12月，在上海市区完成了一项大规模全人群女性肺癌病例对照研究，共调查了非吸烟女性肺癌病例504例及人群对照601例。根据年龄把研究对象分为两组，35～54岁和55～69岁组，并分析比较两组的结果。单因素分析采用Mantel—Haenszel分层分析法，进一步调整混杂因素采用多变量logistic回归模型。结果分析结果显示，中青年组危险因素是做饭时眼和喉烟雾刺激感，最高一组比数比为3．40；其次是肺癌家族史，比数为5．80。而保护因素是饮茶(OR：0．40)和活产次数(5次及以上组OR：0．39)。老年组的危险因素主要是：高身体指数(最高一组OR：1．69)、工作场所被动吸烟史(OR：1.55)、厨房在卧室内(OR：1．50)、做饭时厨房内烟雾较多(OR：2．43)、菜油为主要食用油(OR：1.94)等。此外。肺结核病史和肺癌家族史可能增加老年女性患肺癌的危险性。保护因素是维生素C(最高一组OR：0．45)，趋势检验有统计学意义。中青年组和老年组肺癌的结果比较表明，无论是危险因素还是保护因素，两者都有不同。结论 中青年和老年非吸烟女性肺癌的病因可能存在一定的差异。     

非小细胞肺癌中hRAD17基因表达与淋巴结转移的关系

目的　研究非小细胞肺癌 (NSCLC)中hRAD17基因的表达频率及其与淋巴结转移的关系。方法　应用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)方法检测了 5 0例肺癌标本的hRAD17表达。以人NSCLC细胞株SPC A1作为阳性对照 ,癌周正常肺组织作为阴性对照。结果　 5 0例肺癌中 38例hRAD17阳性表达 ,阳性率为 76 %。 38例阳性病例中有纵隔淋巴结转移者为 31例(81.5 % ) ,而 12例阴性表达病例中仅 3例 (2 5 % )有纵隔淋巴结转移 ,两组间差异具有统计学显著意义 (P <0 .0 1)。结论　hRAD17基因在肺癌中高表达 ,其阳性表达与淋巴结转移密切相关。     

齐墩果酸抗人肺癌细胞增殖、侵袭和诱导细胞凋亡的研究

 目的　研究齐墩果酸抗人肺癌细胞增殖、侵袭和诱导细胞凋亡的作用 ,并探讨其抗侵袭作用的机理。方法　用细胞增殖抑制试验、软琼脂集落形成试验、对重建基底膜的侵袭试验、趋化运动试验、对层粘连蛋白的粘附试验以及组织蛋白酶B活性测定观察齐墩果酸对PGCL3细胞侵袭能力的影响 ,用吖啶橙 -溴乙啶荧光双染法和TUNEL法检测细胞凋亡。结果　齐墩果酸可降低PGCL3细胞增殖能力并呈剂量依赖性 ,IC50 为 4 0 .71 μmol/L ;35 μmol/L和 4 5 μmol/L齐墩果酸均能抑制PGCL3细胞的侵袭能力 (P <0 .0 1 )且有剂量依赖性。抗侵袭作用机理的分析结果显示上述浓度的该药物对细胞的运动、粘附及组织蛋白酶B分泌均有明显的抑制作用 (P <0 .0 5和P <0 .0 1 ) ;软琼脂集落形成率也显著降低 ;上述浓度的药物处理 4 8h均使PGCL3细胞凋亡率显著升高 (P <0 .0 1 )。结论　齐墩果酸有抗PGCL3人肺癌细胞增殖和侵袭作用 ,并有诱导PGCL3细胞凋亡的作用。其抗侵袭机理不是对侵袭的某一环节的阻断 ,而是对侵袭各个基本环节都有抑制作用     

介入性新辅助化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的临床病理学疗效观察

 目的　评价介入性 (支气管动脉灌注 ,BAI)新辅助化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌 (NSCLC)的临床及病理组织学疗效。方法　 36例Ⅲ期NSCLC患者在接受 1～ 3个疗程的BAI化疗后手术 ,观察BAI化疗的临床疗效和病理组织学反应。结果　 36例患者BAI化疗后总有效率 (RR) 5 5 .6 %。给予 2～ 3个疗程BAI化疗的RR为 76 .2 % (16 /2 2 ) ,明显高于给予 1个疗程化疗的 2 8.6 % (4/14 ) (P <0 .0 5 )。术后病理学观察显示 ,接受 2～ 3个疗程BAI化疗的总的组织学有效率 (HRR)为 6 1.9% (13/2 1) ,明显高于接受1个疗程BAI化疗的HRR 2 3.1% (3/13) (P <0 .0 5 )。临床疗效与病理组织学疗效并不完全一致。结论介入性 (BAI)新辅助化疗治疗Ⅲ期NSCLC以 2～ 3个疗程的疗效为优。化疗效果应结合临床和病理组织学疗效共同评价。