蜂毒肽突变体Melittin-K1抑制人肝癌细胞BEL-7402生长的作用

目的:为了提高蜂毒肽Melittin的抗肿瘤活性,我们设计出新型多肽并将其命名为Melittin-K1。并对多肽Melittin-K1抑制人肝癌细胞BEL-7402生长的作用进行研究。方法:采用CCK-8法检测细胞活力。扫描电镜拍照结合培养基上清中乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase,LDH）的表达水平来评价细胞膜的损伤水平。构建BEL-7402细胞裸鼠异种移植瘤模型来评价Melittin-K1、Melittin体内对肝癌生长的影响以及毒性。结果:与Melittin相比,Melittin-K1抑制BEL-7402细胞生长的作用更显著;与L02细胞相比,BEL-7402对Melittin-K1的杀伤作用更敏感;Melittin-K1体外抑制BEL-7402细胞生长呈时间、剂量依赖性。扫描电镜以及LDH检测结果均显示Melittin-K1处理组细胞膜的破损情况严重。BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型结果表明,Melittin-K1体内显著抑制肿瘤生长,其抗肿瘤作用明显高于同剂量Melittin。Melittin-K1和Melittin体内毒性小,主要表现在,与模型组相比,体重曲线、肝功指标均未发生明显改变。结论:Melittin-K1能够明显抑制肝癌细胞BEL-7402的增殖,是一种极具潜力的抗肝癌药物。     

蜂毒的药理研究、临床应用及开发现状

目的：通过对蜂毒的成分、药理作用、临床应用及开发现状作了系统阐述,为临床合理应用峰毒提供依据。方法：通过参考文献,利用综述的方法对蜂毒成分、药理作用、应用作了个体介绍。结果：蜂毒为复杂混合物,药理作用比较多,已广泛应用于临床。结论：蜂毒来活丰富,作用广,功效大,其应用价值将会有一个广阔的发展前景。     

蜂毒素的体内外抗肿瘤研究

目的 研究蜂毒素(melittin)在体内、外对H22细胞的增殖抑制作用,初步探讨其机制.方法 通过四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测melittin对H22细胞的增殖抑制情况;腹腔注射浓度为1、2、4 mg/(kg·d)的melittin,给药10 d,观察melittin对荷瘤小鼠的肿瘤抑制以及机体免疫变化情况.结果 melittin在体外对H22细胞有明显的抑制作用;体内实验表明浓度为2、4 mg/(kg·d)的melittin能够增强机体免疫力,对荷瘤小鼠肿瘤有着较强的抑制作用,且效果随剂量的增大而增强.结论 melittin在体外、体内均对H22细胞有着较强的抑制作用,可能通过增强机体免疫而产生作用.     

蜂毒肽MP-1对内毒素血症小鼠急性肺损伤保护作用的研究

目的探讨蜂毒肽MP-1对内毒素血症（ETM）小鼠急性肺损伤的保护作用。方法尾静脉注射内毒素（LPS）5mg/kg制备ETM小鼠模型。动物随机分为正常对照组（n=8）、ETM组（n=48）和MP-1治疗组（n=48,注射LPS的同时注射MP-1 3mg/kg）。ETM组和MP-1组分别于注射LPS后2、6、12、24、48、72h处死动物,采集血浆和肺组织标本,动态比浊法鲎试验检测各时相点血浆LPS水平,ELISA法检测血浆TNF-α和IL-6水平,real-ti me RT-PCR检测肺组织Toll样受体4（TLR4）、TNF-α和IL-6 mRNA表达,分光光度法检测肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性,并观察伤后12h肺组织的病理变化。结果ETM小鼠伤后2-48h血浆LPS、TNF-α和IL-6水平显著增高（P〈0.01）,肺组织TLR4、TNF-α、IL-6 mRNA表达和MPO活性也明显增强（P〈0.05或P〈0.01）。MP-1治疗可不同程度降低血浆LPS和各细胞因子水平（P〈0.05或P〈0.01）,抑制肺组织相关基因表达及减低MPO活性（P〈0.05或P〈0.01）,并可减轻肺组织的病理损伤。结论MP-1可能通过中和LPS,减少LPS诱导的炎症介质的合成与释放,进而减轻炎症介质对肺组织的损伤。     

构象锁定蜂毒肽联合光热疗法增强三阴性乳腺癌的溶瘤免疫治疗

构建共递送构象锁定蜂毒肽-3(stapled anoplin peptide-3,A3)与光能转化材料氧化石墨烯(graphene oxide, GO)的纳米载药系统A3@GMH,评价其对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC)的溶瘤免疫治疗作用。通过乳液模板法制备A3@GMH,并表征其理化性质。红外热成像仪考察A3@GMH的体内外光热转换能力。综合细胞增殖检测(cell counting kit-8,CCK-8)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放、活死细胞染色和超高分辨显微镜等实验考察A3@GMH对TNBC 4T1细胞的溶瘤活性。高内涵成像系统和流式细胞仪评价A3@GMH的4T1细胞靶向性质。体内外研究A3@GMH联合光热通过诱导4T1细胞免疫原性死亡(immunogenic cell death, ICD)发挥抗肿瘤的作用机制。结果显示，该研究所制备的A3@GMH具有明显的介孔和涂层结构，平均粒径为(308.9±7.5)nm,表面电势为(-6.79±0.58)mV,A3的包封率和载药率分别为23.9...