河南省市售婴幼儿配方乳粉中芽胞杆菌的分离鉴定及系统进化分析

目的 了解河南省市售婴幼儿乳粉中芽胞杆菌的污染状况,分析芽胞杆菌分离株的种属、表型和基因型.方法 采集河南省市售95份国内外婴幼儿乳粉,按照GB 4789.12-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验肉毒梭菌及肉毒毒素检验》进行芽胞杆菌的分离,根据菌落形态,革兰染色和生理生化反应初步鉴定,扩增16S rRNA序列并...     

产气荚膜梭菌对小鼠消化道组织和菌群的影响

梭状芽胞杆菌(Clostridium)是机体肠道正常菌群.产气荚膜梭菌(Cl.perfringen简写Cl.p)是其中少数致病菌之一,健康成人的分离率为52%,而老人则为92%.有关学者对它产生的腐败作用和在消化道肿瘤发生的相关性较为关注.本文报告昆明种小鼠长期饲Cl.p后,其胃肠粘膜组织病理变化、肝细胞增生和肠道菌群变化.     

口服冰冻粪便胶囊进行粪便移植治疗复发性艰难梭菌感染

目的粪便移植已被证明在治疗难治性艰难梭菌感染方面有效,但是实际应用中面临的困难和安全性的顾虑阻碍了其在临床中的广泛应用。本研究目的是评价粪便移植的安全性及其对复发性艰难梭菌感染相关性腹泻的缓解效果。用于粪便移植的可以口服的冰冻粪便胶囊由经过筛选的健康志愿者捐赠粪便制成。方法 2013年8月到2014年6月期间美国波士顿麻省总医院开展一项非双盲、单组、初步可行性研究。纳入20例患者,一种是有3次或以上的轻度到中度艰难梭菌感染表现,且经过6~8周的万古霉素治疗无效,另一种是有2次或以上的因重度艰难梭菌感染住院,年龄介于11~89岁,中位年龄64.5岁。捐献粪便的志愿者要经过筛选。用于移植的胶囊储存在-80℃条件下。患者在连续2天内服用15颗胶囊,然后追踪症状缓解情况和6个月内不良反应情况。主要结局指标包括安全性(通过2级或以上的不良反应来评价)和临床症状缓解且8周内不复发。次要指标包括患者主观感觉良好程度和每天排便次数。结果没有观察到由粪便移植引起的严重不良反应。粪便移植1个疗程后,14例(70%)症状缓解(95%CI:47%~85%)。6例无明显缓解,但是经过第2疗程后,4例缓解。总共18例(90%)患者腹泻明显缓解(95%CI:68%~98%)。患者治疗前排便次数平均5次/天,治疗3天后减少到2次/天(P=0.001),8周后减少到1次/天(P<0.001)。结论本研究利用经筛选的志愿者粪便制成的胶囊进行粪便移植治疗复发性艰难梭菌感染,粪便移植安全有效,但只是初步研究,仍需要更大的研究来评价粪便移植的安全性和有效性。     

利巴韦林联合酪酸梭菌活菌散治疗对轮状病毒肠炎患儿T淋巴细胞亚群和炎性因子的影响

目的:观察利巴韦林联合酪酸梭菌活菌散临床治疗轮状病毒肠炎患儿,分析患儿血清IL-6、IL-8、TNF-α浓度及T淋巴细胞亚群变化的影响。方法:将收治的90例轮状病毒肠炎患儿随机分为对照组(n=45)和观察组(n=45),其中对照组给予常规治疗联合利巴韦林,观察组在对照组基础上口服酪酸梭菌活菌散治疗。检测所有受试者治疗前后T淋巴细胞亚群和炎性因子指标的变化。结果:治疗前,对照组和观察组血清T淋巴细胞亚群水平均无明显差异(P>0.05)。治疗后,两组血清CD3+、CD4+和CD4+/CD8+水平均高于治疗前本组水平(P<0.05),而CD8+水平低于治疗前;观察组治疗后血清CD3+、CD4+和CD4+/CD8+水平均高于同期对照组,而CD8+水平低于同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,对照组和观察组炎性因子浓度均无明显差异(P>0.05)。治疗后,两组IL-6、IL-8和TNF-α浓度均低于治疗前本组浓度(P<0.05),且治疗后观察组明显低于同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在常规治疗和利巴韦林治疗基础上,联合酪酸梭菌活菌散治疗轮状病毒肠炎患儿,能更有效降低患儿外周血炎性因子浓度,降低CD8+T淋巴细胞亚群水平,提高CD3+、CD4+亚群水平,是辅助治疗轮状病毒肠炎患儿潜在有效方案。     

实时荧光PCR快速检测粪便中艰难梭菌方法

目的:建立实时荧光PCR快速检测艰难梭菌的方法。方法:以艰难梭菌磷酸丙糖异构酶(tpi)基因的保守序列为模板设计和合成特异性引物和荧光标记探针,建立实时荧光PCR检测体系,通过检测含有艰难梭菌标准菌株浓度为106-10 CFU/ml的细菌培养物及加标模拟样本进行敏感性分析,并对其特异性和干扰性进行评价。结果:该方法只对艰难梭菌进行特异性扩增,其他常见的病原菌均不能扩增;整个检测过程只需要2 h,对艰难梭菌菌悬液可检测至10 CFU/ml细菌,对加标粪便样本可检测至1000 CFU/ml细菌。结论:本研究建立的实时荧光PCR检测艰难梭菌方法具有快速、特异、敏感性高等优点,能实现对艰难梭菌的快速检测。     

酪酸梭菌活菌片对常用抗菌药物的体外敏感性检测

目的 检测酪酸梭菌活菌片中活性酪酸梭菌对常见抗菌药物的体外敏感性.方法 选取15种常见抗菌药物,通过纸片法进行体外抗菌药物敏感性试验.结果 酪酸梭菌种对头孢噻肟、头孢唑林、氨基苷类、磺胺类抗菌药物表现为耐药;对青霉素、大环内酯类、喹诺酮类药物敏感.结论 酪酸梭菌可与头孢菌素、氨基苷类、磺胺类等抗菌药物联用,应避免与青霉素类、大环内酯类、喹诺酮类药物联用.     

酪酸梭菌联合消旋卡多曲治疗儿童急性水样性腹泻疗效观察

目的:观察酪酸梭菌联合消旋卡多曲治疗儿童急性水样性腹泻的临床疗效。方法:将116例腹泻患儿分为两组,每组58例,在调整饮食、液体疗法等综合治疗的基础上,治疗组使用酪酸梭菌联合消旋卡多曲,对照组使用酪酸梭菌联合蒙脱石散,观察比较两组病人的腹泻次数、呕吐和发热缓解情况。结果:治疗24、48、72h治疗组和对照组病人腹泻分别为(6.62±2.31)和(8.32±2.92)次/d(P<0.01)、(3.27±1.25)和(4.82±2.04)次/d(P<0.01)、(1.59±0.76)和(1.86±0.99)次/d(P>0.05),止吐和退热时间分别在用药后(17.52±9.86)和(29.75±13.82)h(P<0.01)、(1.22±0.65)和(1.35±0.97)h(P>0.05)。结论:对比酪酸梭菌联合蒙脱石散,酪酸梭菌联合消旋卡多曲治疗儿童急性水样性腹泻更能缓解前期的腹泻和呕吐症状,但不能更有效地缩短病程,在改善发热方面无优势。     

口服酪酸梭菌活菌散联合腹部按摩及温盐水清洁灌肠对早产儿喂养不耐受的影响

目的：探讨酪酸梭菌活菌散联合腹部按摩及温盐水清洁灌肠对早产儿喂养不耐受的影响。方法将河北省唐山市玉田县医院收治的80例喂养不耐受的早产儿随机分成观察组和对照组（n=40）。2组患儿均给予口服或鼻饲早产儿配方奶及静脉营养等常规治疗。观察组在此基础上,给予酪酸梭菌活菌散联合腹部按摩及温盐水清洁灌肠综合治疗。观察2组患儿喂养不耐受的改善情况,即每天进乳量、残奶量、体质量增加量,腹胀、呕吐消失情况等。结果观察组上述症状改善情况明显优于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论口服酪酸梭菌活菌散联合腹部按摩及温盐水清洁灌肠可有效促进肠道成熟,明显改善早产儿胃肠道喂养不耐受的情况。     

CPB-ST融合基因的构建及表达研究

用限制性核酸内切酶ＥｃｏＲＩ和ＳａｌⅠ双酶切含有大肠杆菌耐热性肠毒素ＳＴ１前体蛋白基因的质粒ｐＸＳＴ１，回收３２５ｂｐ的ＳＴ基因片段，然后，通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶将其定向连接于事先经同样的双酶切处理的带有产气荚膜梭菌β－毒素基因（ＣＰＢ）的重组质粒ｐＥＣＢ２中ＣＰＢ基因的下降，转化受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中，经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ酶切反应鉴定重组质粒，得到了理想重组质粒ｐＥＣＢ－ＳＴ１。重组菌株Ｂｌ２１（ＤＥ３）（ｐＥＣＢ－ＳＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后，其表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ及ＥＬＩＳＡ检测，结果表明重组菌株可以表达ＣＰＢ－ＳＴ融合蛋白，而且该融合蛋白无天然β－毒素和ＳＴ１的生物毒性。