白细胞介素-6在2型糖尿病患者腹部皮下和网膜脂肪组织中的表达及其与胰岛素抵抗的关系

目的探讨白细胞介素石（IL-6）基因在2型糖尿病（T2DM）患者腹部皮下和网膜脂肪组织中的表达情况，及其与胰岛素抵抗的关系。方法用半定量RT-PCR方法检测22例正常人（对照组）和20例T2DM（糖尿病组）患者的大网膜与皮下脂肪组织IL-6mRNA的表达水平，并测量体重、血压、腰围、臀围、血糖、空腹胰岛素、血脂和胰岛素敏感指数（IAI）。结果①糖尿病组网膜和皮下脂肪的IL-6mRNA表达量均高于对照组（P〈0．05）；对照组网膜组织的IL-6mRNA表达量高于皮下脂肪组织（P〈0．05）．而糖尿病组网膜和皮下脂肪组织差异无显著性（P〉0．05）。②将两组数据合并，网膜和皮下脂肪的IL-6mRNA表达量与腰臀比、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）呈正相关（P〈0．05），与血浆IAI呈负相关（P〈0．05），与其他因素均无相关性（均P〉0．05）。③多元逐步回归分析发现，皮下脂肪IL-6mRNA表达量与HOMA—IR、腰臀比相关（P〈0．05），网膜IL-6mRNA表达量与HOMA—IR相关（P〈0．05）。结论，12DM患者网膜和皮下脂肪组织IL-6mRNA表达水平升高，可以作为胰岛素抵抗的一个重要参数。     

骨髓间充质干细胞定向诱导条件下向脂肪细胞和成骨细胞诱导分化的关系

目的：观察骨髓间充质干细胞在定向诱导分化条件下向成骨细胞、脂肪细胞分化的特征及相互关系。方法：实验于2004-10／2005-04在泸州医学院心肌电细胞实验室完成。日本大耳兔10只，经兔髂嵴无菌抽取骨髓，采用Percoll液进行梯度离心法和体外细胞贴壁分离培养法相结合对兔骨髓间充质干细胞进行分离、纯化，将获得的原代和传代培养的骨髓间充质干细胞，分别用含成脂诱导剂和含成骨诱导剂的改良的伊格尔培养基进行实验组（向脂肪细胞和成骨细胞的定向诱导培养，对诱导培养后的细胞进行生长形态学特征观察），对照组（采用不加成脂、成骨诱导剂的伊格尔培养基），两组进行成脂及成骨诱导后的苏丹脂肪染色、碱性磷酸酶活性检测、胞外矿化基质测定，并进行细胞成脂和成骨率比较。结果：从10只实验动物中均成功提取到骨髓间充质干细胞，其中有2只动物的骨髓间充质干细胞在原代培养时出现污染，8只获得成功进入结果分析。①在经过2ld成脂诱导培养后实验组的许多细胞胞浆内均出现较多的高折光性的脂滴，苏丹脂肪染色呈橘红色，同时Kossa法也检测出少许成骨分化，其比例为70％（28／40）干细胞可转化为含有脂滴的脂肪细胞；10％（4／40）干细胞转化为含有钙结节的成骨细胞。②经过21d向成骨诱导培养后实验组出现一些细胞基质逐渐堆积、并出现基质矿盐沉积，Von Kossa法测定形成的钙结节，同时苏丹脂肪染色也检测出少许向脂肪细胞分化，其比例为40％（16／40）干细胞可转化为成骨细胞，20％（8／40）骨髓间充质干细胞可转化为脂肪细胞。③对照组用苏丹脂肪染色后显示5％（2／40）骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞，用Von Kossa法测定矿化结节形成比例和碱性磷酸酶活性测定结果成骨率10％（4／40）。结论：在适当诱导条件下骨髓间充质干细胞可一部分转化为脂肪细胞，另一部分转化为成骨细胞，两者分化存在一定关系：分化的脂肪细胞多，则成骨细胞少；分化的成骨细胞多，则脂肪细胞少。     

向成骨细胞和成脂肪细胞分化的小鼠骨间充质干细胞调节单核细胞来源的破骨细胞发育

为探究分化阶段的骨间充质干细胞对于破骨细胞的影响,将小鼠密质骨来源的间充质干细胞体外诱导分化,研究其对于破骨细胞发育的调控作用。从小鼠密质骨中分离培养得到间充质干细胞,将其进行成骨和成脂肪诱导1周,分别将成骨分化和成脂肪分化的间充质干细胞与CD11b+的单核细胞共同培养,并以抗酒石酸的酸性磷酸酶染色鉴定破骨细胞。结果表明:向成骨分化和成脂肪分化的间充质干细胞均可以调节单核细胞向破骨细胞分化。与未分化的间充质干细胞相比,成骨分化的间充质干细胞促进破骨细胞发育的作用减弱,而成脂肪分化的间充质干细胞促进破骨细胞发育的作用增强。结论:间充质干细胞调节破骨细胞发育的能力在其分化为不同种类细胞后发生相应变化,提示间充质干细胞通过分化为子代细胞而对破骨细胞发育发挥选择性的调节。     

骨髓间充质干细胞及其向神经元细胞分化的研究进展

早期的干细胞研究主要集中在骨髓造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)上。现在发现骨髓中除了造血干细胞以外,还存在一类骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)。BMSCs是与HSC截然不同的一类干细胞,具有自我更新和多向分化的潜能,能分化为成骨细胞、脂肪细胞、成肌纤维细胞、软骨细胞、内皮细胞、心肌细胞,神经元样细胞[1-2]。在新近的研究中,人们还发现它可以向内胚层及外胚层的细胞分化[3-4],具有     

LYRM1基因过表达对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响

目的观察LYRM1基因过表达对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响。方法体外培养3T3-L1前体脂肪细胞,分别构建LYRM1基因过表达细胞株(LYRM1-pcDNA3.1/myc-His B)和空载对照细胞株(pcDNA3.1/myc-His B);实时定量RT-PCR验证转染情况;RT-PCR检测诱导分化成熟后的线粒体代谢酶HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C基因表达水平。结果 RT-PCR结果证实LYRM1质粒转染成功;与空载对照组比较,LYRM1过表达组HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C mRNA表达水平均显著降低(P均<0.05)。结论 LYRM1基因过表达下调了3T3-L1脂肪细胞中线粒体的代谢关键酶基因表达水平,可能参与调节脂肪细胞线粒体的代谢。     

乙醇对股骨头髓内脂肪细胞的作用**☆

背景：乙醇已成为股骨头缺血性坏死的致病因素,其所致的骨髓内脂质代谢异常可能是股骨头缺血性坏死起病的重要原因,但机制尚未完全明确。
　　目的：从分子水平观察在乙醇作用下脂肪细胞结构功能的变化,以期分析酒精性股骨头坏死的发病机制。
　　方法：采用原代脂肪细胞体外培养技术,取大白兔股骨头髓内脂肪组织,分离获取脂肪细胞,以油红O染色行细胞表型鉴定。取传代稳定的髓内脂肪细胞,将盖玻片切割成10 mm×10 mm,种植前置入24孔培养板孔内,分为乙醇组和对照组,每组24孔,每孔为1个样本。对照组不加乙醇,乙醇组加入0.15 mol/L乙醇,分别于4,6,8,10 d 更换培养液,换液时不再加入乙醇,均培养至10 d。培养终止后,取出盖玻片行油红O染色,光镜下观察脂肪细胞形态并计数。
　　结果与结论：随着时间延长,乙醇组脂肪细胞数量明显多于对照组(P<0.001),2组小脂滴均逐渐增多、增大,但乙醇组更明显。培养4,6,8,10 d的髓内脂肪细胞数量乙醇组分别为(200.90±24.60),(1102.30±76.73),(1160.30±28.37),(1199.70±44.74)个/cm2;对照组分别为(99.80±10.82),(0.40±94.71),(1000.20±41.85),(1059.80±26.79)个/cm2,脂肪细胞数量随乙醇作用的时间延长而增多。提示乙醇能够促进髓内脂肪细胞增殖肥大,这可能是长期酗酒后股骨头骨髓内脂肪组织增多,骨内压增加,血流灌注减少,导致缺血,从而发生股骨头坏死的主要原因。     

T2DM、OSAS 患者血清 A - FABP 的检测意义

目的：探讨2型糖尿病（T2DM）与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（OSAS）患者血清中脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白（A - FABP）的水平及临床意义。方法分析2012年8月至2014年2月接受住院治疗的患者和同期接受体检的健康者的临床资料。将入选者划分为 T2MD + OSAS 组、T2MD 组、正常对照组（NC 组）。比较三组受试者的一般资料、血糖相关指标、临床指标,并探讨 T2MD + OSAS 组、T2MD 组患者 A - FABP 与临床指标的相关性。结果共纳入研究对象78例,其中 NC 组20例,T2DM 组26例,T2DM + OSAS 组32例。T2DM 组、T2DM + OSAS 组患者的空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS、餐后2 h 血糖（2 h PG）、糖化血红蛋白（HBA1C）、胰岛素抵抗指数（HOAM - IR）、脂肪细胞脂肪酸结合蛋白（A - FABP）水平均显著高于 NC 组（ P <0.05）;T2DM + OSAS 组患者的 FPG、FINS、2 hPG、HBA1C、HOAM - IR、A - FABP 水平均显著高于 T2DM 组患者（ P <0.05）;T2DM、T2DM + OSAS 组两组患者的 TC、TG、LDL 水平均明显高于NC 组,而 HDL 低于 NC 组（ P <0.05）;T2DM + OSAS 组患者的 TC、TG、LDL 水平均明显高于 T2DM 组,而 HDL 小于T2DM 组患者,差异均具有统计学意义（ P <0.05）;T2DM 组和 T2DM + OSAS 组患者的 A - FABP 水平与患者的 TC、TG、LDL、FPG、FINS、2 hPG、HBA1c、HOAM - IR 均呈正相关,而与 HDL 呈负相关,均具有统计学意义（ P <0.05）。结论
　　T2DM、OSAS 患者血清 A - FABP 水平明显升高,并且与患者的血脂、血糖、缺氧状况有着显著的相关性。     

小檗碱对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化相关基因PPARγ、C/EBPα mRNA和蛋白表达的影响

目的 探讨小檗碱对脂肪细胞增殖、分化的影响及其机制。     

11β-羟化类固醇脱氢酶1促进3T3-L1前脂肪细胞分化机制

目的 探讨11β-羟化类固醇脱氢酶1（11β-HSDl）促3T3-L1前脂肪细胞分化机制及其在肥胖中的作用。方法 采用油红染色观察脂滴堆积情况;采用Western blot方法检测11β-HSD1的表达。应用氢化可的松刺激模型,采用实时定量PCR观察11β-HSD1和糖皮质激素受体（GR）表达的变化。应用实时定量PCR检测脂肪细胞分化标志基因的变化。结果 （1）油红染色显示脂滴堆积随着小鼠前脂肪细胞（3T3-L1）细胞分化过程逐渐增加。（2）在3T3-L1前脂肪细胞分化模型中（0、2、4、6、8d）,11β-HSD1蛋白水平是上调的,证实1113-HSDl蛋白分子量为34000。（3）11β-HSD1及GR的mRNA表达在分化过程中是上调的。（4）11β-HSD1对氢化可的松的刺激是时间和浓度依赖的,而氢化可的松的刺激对GR影响不大。（5）脂蛋白脂肪酶（LPL）、脂肪酸合成酶（FAS）、脂肪酸结合蛋白（aP2）在分化过程中明显上升,前脂肪细胞因子-1（Pref-1）在分化早期升高,在分化后期明显下调。结论 11β-HSDl通过受体前调节作用促进前脂肪细胞分化,参与肥胖的发生。     

骨髓诱导成骨成脂分化机制研究进展

骨髓间充质干细胞(MSC)有分化为多种细胞的潜能,在无任何条件干预下可自然分化为成骨细胞系和脂肪细胞系,两者分化存在相互制约的平衡关系.细胞分化方向的调节通过一些复杂信号通路,如骨形态发生蛋白、Wnt蛋白、脂联素以及脂肪细胞、成骨细胞分化转录调节因子PPAR-γ、Runx2等之间相互作用实现,药物、年龄、微重力作用等因...