运用siRNA建立稳定低表达IGF1R基因的肝癌细胞株的实验研究

目的运用siRNA技术在肝癌细胞株中建立稳定低表达人胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)基因的细胞株。方法构建包含封闭IGF1R基因的真核表达载体pSUPER-IGF1R-siRNA,转染SMMC7721和Hep3B细胞,G418筛选表达稳定的细胞株。通过RT-PCR、Western-blot分析与鉴定IGF1R mRNA和蛋白及cyclin D1、cyclinB1蛋白的表达,并绘制细胞生长曲线。结果在SMMC7721和Hep3B细胞中成功建立低表达IGF1R基因的细胞株,其生长明显减慢(P<0.05),且其cyclinD1表达亦明显下降(P<0.05)。结论pSUPER-IGF1R-siRNA能抑制SMMC7721和Hep3B细胞的生长。     

Ⅱ型糖尿病患者何时需用胰岛素？

我今年60岁了，最近被查出患了Ⅱ型糖尿病。在我的周围也有一些“糖友”，他们有的让我用胰岛素治疗，说效果好，也有一些人说我是非胰岛素依赖型糖尿病，根本用不着使用胰岛素。对此，我很迷惑。请问，我到底该不该使用胰岛素呢？     

胰岛素过敏14例护理体会

2001年1月～2006年1月，我院共收治14例胰岛素过敏患者，现将皮试与脱敏治疗的护理体会报告如下。     

美吡哒与胰岛素合用治疗2型糖尿病观察

目的 观察美吡哒与胰岛素联合应用是否利于血糖控制，减少美吡哒用量，改善胰岛β细胞功能。方法 120例2型糖尿病人随机分成治疗组，对照组各60例，对照组在饮食、运动治疗基础上单用美吡哒。治疗组在对照组治疗的基础上加用小剂量短效胰岛素进行为期两周的皮下注射治疗，分析比较其治疗前后空腹血糖、餐后2h血糖水平。进行统计学处理。结果 加外小剂量胰岛素后的空腹血糖、餐后2h血糖均显著下降。结论 对口服美毗哒控制血糖不佳的2型糖尿病患者，短期胰岛素治疗具有快速控制血糖和显著改善胰岛β细胞功能的作用．     

不同麻醉方法对胆囊切除术病人血糖及相关激素的影响

目的观察比较不同麻醉方法对胆囊切除术病人血糖、胰岛素和皮质醇的影响.方法将40例择期行胆囊切除术的病人随机分为全麻复合硬膜外腔阻滞组(Ⅰ组)和全麻组(Ⅱ组),各20例.分别于麻醉前(t0)、切皮后30min(t1)、切皮后90min(t2)和术毕6小时(t3)测定血中血糖(GLU)浓度和胰岛素(INS)、皮质醇(COR)值.结果两组患者术中GLU、INS值较麻醉前升高,Ⅱ组GLU、INS值各个时相较麻醉前升高显著(P＜0.05),术毕6h仍高.Ⅰ组患者GLU、INS值各时相与麻醉前相比变化幅度小,术毕6h基本恢复达麻醉前水平或更低.Ⅰ组GLU浓度和Ins值变化明显小于Ⅱ组(P＜0.01).两组患者于切皮后30min、90min皮质醇(COR)值升高明显(P＜0.05),升高幅度Ⅱ组显著(P＜0.05).结论全麻复合硬膜外腔阻滞麻醉方法用于胆囊切除术,对血中GLU浓度和INS、COR值变化影响最小,控制术中应激反应效果显著,有利于机体较快恢复,明显优于单纯全麻.     

罗格列酮减少T2DM胰岛素用量的临床观察

临床上常见许多2型糖尿病患者(T2DM)在口服降糖药(OHA)失效后，需要用较大剂量的胰岛素才能将血糖控制在满意的范围内。但是皮下注射大剂量外源性胰岛素又会给T2DM带来许多不良的影响^[1]。本研究旨在观察在维持血糖不变的前提下，原来需要用大剂量外源性胰岛素的T2DM在合     

胰岛素抑制突变亨廷顿蛋白的聚积和毒性

目的:探讨胰岛素对细胞内突变亨廷顿蛋白(Huntingtin,htt)聚集物形成及其细胞毒性的影响.方法:利用脂质体转染法在培养的Hela细胞和HEK293细胞瞬时或稳定转染编码正常或突变htt的氨基末端片段的cDNA,检测不同浓度胰岛素刺激对细胞内突变htt聚集物形成以及细胞活力的影响.结果:在瞬时转染的Hela细胞和稳定转染的HEK293细胞中,含20个谷氨酰胺重复序列(20Q)的正常htt氨基末端片段弥散分布在胞浆内,而含150个谷氨酰胺重复序列(150Q)的突变htt氨基末端片段在多数细胞胞浆或核内形成聚集物.150Q的Hela和HEK293细胞经一定浓度的胰岛素刺激后聚集物的形成显著减少,细胞活力也明显提高.而胰岛素的刺激对20Q的细胞内正常htt的表达以及细胞活力无明显影响.结论:胰岛素能有效抑制细胞内突变htt聚集物的形成及其细胞毒性.     

胰岛素样生长因子-1基因转染脂肪间充质干细胞向软骨细胞分化的研究

目的 观察胰岛素样生长因子(IGF)-1基因转染的脂肪间充质干细胞(ADSCs)向软骨细胞分化的效果.方法 原代培养兔ADSCs,免疫荧光法检测细胞表面抗原CD44、CIM9;脂质体介导人IGF-1基因转染兔ADSCs联合低浓度血清培养基向软骨细胞分化诱导,RT-PCR及Western blot方法检测IGF-1的表达,MMT法绘制细胞增殖曲线、甲苯胺蓝染色软骨结节、免疫组织化学检测Ⅱ型胶原的表达.结果 脂肪间充质干细胞CD44、CD109表达阳性,基因转染后细胞IGF-1表达阳性,细胞增殖速度增快,出现软骨结节,Ⅱ型胶原表达增高.结论 从脂肪组织中能够分离出增殖旺盛的ADSCs,IGF-1在ADSCs内获得稳定表达,细胞增殖能力增强,促进其向软骨细胞分化.