^99Tc^m—survivin mRNA反义肽核酸基因显像在肿瘤与炎性反应模型中的对比研究

目的研究^99Tc^m-survivin mRNA反义肽核酸（PNA）显像在肿瘤特异性诊断中的价值。方法用^99Tc^m标记人工合成的12碱基单链survivin mRNA反义PNA。20只荷瘤（A549）裸鼠按随机数字表法分为4组,每组5只。每只裸鼠经尾静脉注入^99Tc^m-survivin mRNA反义PNA,3组进行体内分布研究,其余进行显像研究。用同样方法对20只炎性反应（金黄色葡萄球菌）小鼠进行分组、体内分布和显像研究。采用SPSS13．0软件进行统计学分析,组间计量资料比较采用t检验。结果^99Tc^m-survivin mRNA反义PNA在肝内分布最高,其次是肾,注射后4h肿瘤组靶／非靶（T／NT）比值明显高于炎性反应组,分别为3．69±1．13,2．03±0．47,差异有统计学意义（t=3．01,P=0．02）。肿瘤组在注射药物后0．5h即可见肿瘤清晰显影,至4h时显影仍较清晰,而炎性反应部位始终未见明显显影。结论^99Tc^m-survivin mRNA反义PNA基因显像可通过其在肿瘤组织中的特异性浓聚区分肿瘤与炎性反应,为肿瘤的特异性诊断提供了一种可能的新方法。     

基于中药核酸的以核酸为靶向的核酸类新药物研究

<正>之前,我们提出了"中药生物化学"的概念,这无疑是一个全新的研究领域和方向。中药生物化学的研究不仅能够引导药物科学家基于新的模式发现全新的药物,而且与以中药次生代谢活性物质研究相比,基于中药生物化学的研究更容易让我们找到那些经典的中药作用理论     

探讨PNA-FISH在组织石蜡切片中应用的技术要点

20世纪80年代末,起源于放射性杂交的荧光原位杂交(FISH)技术开始建立。20多年来,这项技术已经得到了长足的发展,大量商业化探针的出现更使其广泛应用于临床诊断。随着FISH新技术的出现,探针的种类也不断增加,肽核酸探针就是其中一种。     

PNA与DNA探针对漏声表面波传感器特异性的影响

目的探讨以PNA作为杂交探针与普通的DNA探针相比,在漏声表面波生物传感器生物杂交反应中的优越性。方法用巯基固定法将PNA、DNA两种探针分别固定在漏声表面波生物传感器的金膜表面,分别与完全匹配、1个及2个碱基错配的靶序列进行杂交反应,观察两种不同的探针与靶序列反应所引起的相位变化及反应平衡时间。结果与DNA探针相比,PNA探针识别碱基错配的能力显著提高,且杂交平衡时间更短。结论 PNA探针可提高漏声表面波生物传感器的检测特异性。     

肽核酸研究的现状和未来

肽核酸是ＤＮＡ类似物,具有由氨乙基甘氨酸单位组成的假肽骨架,能以高亲和性和高生物稳定性与ＤＮＡ和ＲＮＡ特异性杂交。ＰＮＡ以链侵占方式与ＤＮＡ结合,抑制转录或提供人工强启动子促进转录;与ｍＲＮＡ结合,则阻止蛋白质的合成,此外,ＰＮＡ还能导向核糖核蛋白部分,抑制其酶活性。ＰＮＡ的其他特点如抗核酸酶和蛋白酶作用。方便而灵活的固相合成法等,使之有希望成为一个基因靶向药物。该文综述了肽核酸的化学和生物学特性     

肽核酸在疾病诊疗和分子生物学研究中的应用

肽核酸是一种新型的以多肽为骨架，类似核苷酸且不带电荷的物质。肽核酸在疾病诊疗和分子生物学研究中的反义药物、反基因药物、探针、PCR技术等方面有广泛应用。     

阻断趋化因子受体3途径对结肠癌患者术后局部复发和肝转移影响的研究

目的 探讨趋化因子受体3(CXCR-3)对结肠癌术后局部复发和肝转移的影响.方法 常规培养HT-29细胞,采用RT-PCR、Western-blot方法检测靶向CXCR-3的反义肽核酸(asPNA)对CXCR-3mRNA和蛋白表达水平的变化.建立人结肠癌术后局部复发裸鼠动物模型、人结肠癌术后肝转移动物模型.分别经尾静脉注射asPNA、随机错配肽核酸和生理盐水,分析CXCR-3的asPNA对结肠癌术后局部复发和肝转移的抑制作用.结果 asPNA处理结肠癌细胞后,CXCR-3mRNA和蛋白表达受到明显抑制(P＜0.05).asPNA组与随机错配组和对照组比较,裸鼠结肠癌术后复发率(20%比60%、60%,P＜0.05)、肝转移率(30%比100%、100%,P＜0.05)、平均肝转移瘤数目[(7.6±2.4)比(28.4±9.8)、(26.8±8.6),P＜0.05]均显著降低.结论 CXCR-3的asPNA能够抑制结肠癌术后局部复发和肝转移,其机制可能与其特异性抑制HT-29细胞CXCR-3mRNA和蛋白表达有关.     

肽核酸对大肠癌细胞生长影响的实验研究

研究肽核酸（PNA）对大肠癌细胞端粒酶活性的抑制作用及其对大肠癌细胞生长的影响,探索大肠癌治疗新方法。（1）检测不同浓度PNA对大肠癌LS-174T细胞端粒酶活性的影响;（2）应用脂质体Lipfectamine^TM介导不同浓度PNA-DNA杂交混合物转染LS-174T细胞,观察细胞克隆生长抑制结果,确定PNA对细胞生长的最佳抑制剂量;（3）选用最佳抑制剂量PNA转染LS-174T细胞、Lipfectamine^TM组和空白对照组,并观察其克隆形成率、细胞形态及群体生长差异。结果显示：（1）不同浓度PNA对大肠癌细胞端粒酶活性均有抑制作用,且与PNA浓度呈正相关;（2）细胞克隆形成抑制实验中PNA对LS-174T细胞最佳抑制浓度为200nmol／L;（3）PNA实验组端粒酶活性明显低于脂质体组和空白对照组。结果表明,PNA抑制大肠癌细胞端粒酶活性对大肠癌LS-174T细胞生长具有明显抑制作用,为大肠癌早期诊断与治疗开辟新途径。     

反义肽核酸技术在临床医学中的应用研究现状

肽核酸是-核酸类似物,是核酸中的糖-磷酸主链被-合成的肽链所取代,最终形成一种非手性的、不带电荷的类似物.与核酸分子相比,肽核酸有更高的稳定性、碱基特异性.配体-受体、连接带正电荷基团如赖氨酸或精氨酸残基或核定位信号肽等可以提高肽核酸的通透性.肽核酸在分子生物学和诊断学域有广泛应用.活体外研究显示肽核酸可以抑制目的基因的转录和翻译,因此其反义形式也可应用于临床疾病的治疗.     

基因治疗新前沿:反基因技术

反基因技术是以脱氧寡聚核苷酸与双链DNA分子序列特异性结合形成三链DNA,从而在转录水平上调控基因表达的一种基因治疗策略。本文从三链DNA分子构建的由来、机理、技术关键(专一性、稳定性、摄取与分布)、药物靶研究及体内应用等方面对这项技术的发展和应用前景进行了综述。