羊膜移植重建术对急性期严重烧伤眼表患者的临床作用研究

目的研究羊膜移植重建术对急性期严重烧伤眼表患者的临床效果。方法 20例(22眼)急性期严重烧伤眼表的患者,将其随机分为观察组11例(12眼),对照组9例(10眼)。对照组实施一般治疗方式,观察组实施羊膜移植重建术治疗。结果经治疗后,观察组上皮再生时间及炎症反应情况均显著低于对照组。羊膜完全被吸收时间显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论羊膜移植重建术治疗急性期严重烧伤眼表患者,能显著减少炎症的发生率,减少上皮再生时间。疗效显著,值得推广。     

糖尿病肛漏创面应用美洲大蠊提取液的lncRNA高通量测序及维恩图分析＊

目的 基于高通量测序及维恩图预测美洲大蠊提取液促进糖尿病肛漏创面愈合的顺、反式lncRNA及Pathway。方法 选取湖南中医药大学第二附属医院收治的糖尿病肛漏患者术后创面12例，利用高通量测序技术检测6例术后创面组（A组）和6例术后创面应用美洲大蠊提取液创面组（B组）中lncRNAs和mRNAs表达，进行GO分析和KEGG通路分析，构建lncRNA-mRNA的共表达网络图，并通过Cis-及Trans-预测与创面愈合相关lncRNA。结果 实验组差异表达的lncRNAs2242个（上调649个，下调1593个），mRNAs有13186个（上调5162个，下调8024个）。GO分析发现差异表达的lncRNA-cis主要富集在表皮细胞分化、上皮细胞分化、细胞代谢过程的调节等；差异表达的lncRNA-trans主要富集在细胞代谢过程、蛋白质结合、细胞内部分等。通过KEGG通路分析，筛选出与本研究相关的3条通路：IBD、MAPK signaling pathway、AMPK signaling pathway；lncRNA靶标基因预测中最终筛选出3个lncRNA（ENST00000443364、ENST00000576797、ENST00000620167），进行PCR验证，lncRNAENST00000443364、ENST00000576797与芯片结果一致。结论 美洲大蠊提取液可能通过lncRNAENST00000443364、ENST00000576797顺式及反式调控靶标基因，影响表皮细胞分化、上皮细胞分化、细胞代谢过程的调节等功能以及影响IBD、MAPK signaling pathway、AMPK signaling pathway促进糖尿病肛漏创面愈合。     

匀浆膳在不能经口进食患者治疗中的应用

目的：探讨不能经口进食患者应用匀浆膳治疗及护理的效果。方法选取2011年8月至2013年8月我院收治的不能经口进食的卧床患者50例，依据随机数字表法分为研究组和对照组各25例。给予研究组患者自制匀浆膳治疗，给予对照组患者商品匀浆膳治疗，然后对两组患者的营养状况和生化指标及不良反应发生情况进行统计分析。结果研究组患者的Na＋水平明显高于对照组（P＜0．05），但两组患者的TSF、MAMC、TP、ALB、TG、Cr、BUN、STB、CB、Ca2＋、P2＋、K＋水平比较差异均无统计学意义（P＞0．05）；研究组和对照组患者的不良反应发生率分别为8％和12％，差异无统计学意义（P＞0．05）。结论临床要想对不能经口进食患者进行有效的肠内营养支持，就应该保证匀浆膳具有合理的配比，可以配合使用自制匀浆膳和商品匀浆膳。     

人羊膜间充质干细胞膜片的构建及其成软骨诱导的实验研究

目的:探讨应用一种简单的方法构建人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,HAMSCs)膜片,并研究其向成软骨细胞分化的潜能,探索利用HAMSCs膜片构建组织工程软骨的可行性。方法:取产妇胎盘通过酶消化法获得HAMSCs,通过流式细胞术鉴定其表型特征;通过免疫荧光检测细胞波形蛋白和CK-19的表达。取第3代HAMSCs通过CCK-8检测细胞增殖活性;取第3代HAMSCs加入成膜片培养基培养以构建HAMSCs膜片;取第3代HAMSCs加入成膜片培养基培养7天,再换用成软骨诱导培养基培养以构建成软骨诱导的HAMSCs膜片。通过流式细胞术检测成膜片诱导后HAMSCs表型分子的表达;扫描电镜(SEM)观察细胞形态和细胞外基质的分泌。RT-PCR定量分析成软骨分化相关基因(SOX9、ACAN、COLⅡ)的表达;HE染色观察细胞形态、分布;甲苯胺蓝和番红染色检测蛋白聚糖的分泌,Ⅱ型胶原免疫组化检测Ⅱ型胶原的表达。结果:流式细胞术结果表明HAMSCs表达间充质干细胞(MSCs)表型。免疫荧光检测结果示:波形蛋白阳性表达,CK-19阴性表达。CCK-8检测结果示:细胞生长曲线呈S型,第3天进入对数生长期,第7天达到顶峰。HAMSCs成膜片诱导后流式结果表明干细胞特性分子CD44、CD73、CD90、CD105仍高表达。SEM结果示:HAMSCs膜片呈复层结构,梭形的细胞分泌大量细胞外基质,细胞被细胞外基质所包埋并逐渐融合。RT-PCR结果显示:与HAMSCs膜片组相比,成软骨诱导的膜片组Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA的表达量显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果示:成软骨诱导的HAMSCs膜片可见分布均匀的类圆形细胞并被大量细胞外基质包围;甲苯胺蓝染色结果显示:椭圆形细胞分泌大量细胞胞外基质,成铺路石样排列;番红染色结果示:成软骨诱导的膜片有大量蛋白聚糖分泌;Ⅱ型胶原免疫组化结果示:成软骨诱导的膜片高表达Ⅱ型胶原。结论:本实验应用一种简单的方法在普通培养皿上成功构建了HAMSCs膜片,体外研究证实HAMSCs膜片具有良好的成软骨分化潜能。因此,HAMSCs膜片可以作为软骨组织工程的种子细胞之一,HAMSCs膜片的应用将为软骨缺损修复提供一种新思路。     

羊膜移植治疗翼状胬肉手术的临床观察

目的 观察羊膜移植术在翼状胬肉手术中的作用。方法 39例（41只）眼，翼状胬肉手术切除加羊膜移植，术后随访3—18个月，平均12个月。结果 39例（41只眼），术后临床上均未见羊膜植入有排斥反应，全部存活。随访期内无翼状胬肉复发。结论 羊膜移植治疗翼状胬肉简单，疗效可靠。     

化学烧伤及热烧伤角膜疾病的羊膜移植治疗及临床观察

目的探讨羊膜移植重建眼表组织的可行性和控制化学烧伤重症角结膜疾病的价值及其手术方法。方法对62例(85眼)化学烧伤角结膜疾病患者施行了羊膜移植术。62例(85眼)中,78眼表面重建成功,7￣30d角膜上皮愈合,炎症得到控制,睑球粘连得已改善或解除,观察3￣12个月仍保持稳定。83眼视力均有不同程度的提高,最佳裸眼视力0.1￣0.8之间43眼,手动￣0.06之间40眼。28眼角膜透明;10眼角膜半透明;9眼形成了足够的穹窿部,且恢复了眼球外形及运动功能,随访未见睑球粘连。1例(1眼)植片溶解,1例1个月后炎症复发。结果羊膜移植术可有效的控制化学烧伤角膜疾病的炎症反应,使眼表得到重建。结论羊膜移植术为化学烧伤等角膜疾病拓宽了一条新的治疗途径。