胶体金免疫层析法在产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌检测 中的应用评价

摘要:目的评估胶体金免疫 层析法在产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌(CPE)中的应用价值。方法收集福建医科大学附属第一医院分离的65株肠杆菌目细菌,包括41株碳青霉烯类耐药肠杆菌目细茵(CRE)和24株非CRE菌株。采用PCR法检测5种 碳青霉烯类耐药基因( blaxc、blamp、blavw bax._s.m. .blaxmw),改良碳青霉烯类失活法(mCIM)与EDTA碳青霉烯类失活法(eCIM)以及胶体金免疫层析法检测碳青霉烯酶并分型,以PCR结果为参考,评估各方法的检测性能;挑取其中29株CRE与 24株非CRE构建模拟阳性血培养瓶,报阳后以胶体金免疫层析法进行分型检测并评估其性能。结果PCR 结果发现25株菌携带blarc基因.7株携带blasow基因.4株携带blamp基因.4株同时携帶blaxpc.Nou基因 .1株同时携带barc.NM..基因,另. 外24株未检出相应耐药基因。41株CRE的mCIM试验结果均为阳性,其中11株eCIM试验结果阳性。24株非CRE菌株的mCIM试验结果均为阴性。mCIM 试验与eCIM联合试验检测丝氨酸酶的敏感性与特异性均为100.00%, Kappa 值为1.000;检 测金属酶的敏感性为68.75%、特异性为100.00%,Kappa值为0.725。胶体金免疫层析法均能准确检出临床分离株与血培养阳性标本中的碳青霉烯酶,与PCR法的分型结果一致,因此其敏感性与特异性均为100.00%, Kappa值为1.000。结论胶体金 . 免疫层析法操作简便、用时较短,具有较高的敏感性与特异性,同时可大大缩短CPE血流感染的诊断时间,适合临床的推广应用。     

血流感染金黄色葡萄球菌毒力基因、agr分型及生物膜形成能力调查*

摘要:目的探讨血液 来源金黃色葡萄球菌耐药性、毒力基因、agr 分型、生物膜形成能力,并比较甲氧西林敏感株与耐药株间的差异。方法收集2019年1月一2020年12月102株血液分离非重复金黃色葡萄球菌茵株,采用全自动微生物鉴定药敏分 析系统进行药物敏感性检测;采用PCR及多重PCR分析菌株毒力基因携带情况及agr基因多态性;采用96孔板结晶紫染色法检测生物膜形成能力。采用卡方检验和Fisher 精确概率法比较分析甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏 感金黃色葡萄球菌(MSSA)菌株间耐药性、毒力基因、agr 分型及生物膜形成能力的差异。结果102 株金黄色葡萄球菌中,43株为MRSA,59株为MSSA。毒力基因普遍表达葡萄黃质蛋白基因crtN(99.0%)、溶血素基因(hla 97. 1%、hlb 98. 0%、hld 96.1%),其次为表面因子CP8合成酶基因cap8H(34.3%)、中毒性休克综合征毒素-1基因tst( 21.6%),其中携带crtN/hla/hlb/hld 4种毒力基因组合的菌株最多(48株)。agr分型阳性率为97.1%,其中agr I型占56.9% ,agr I型占36.3%,agr I型占 4.9%,未检测出agt IV型,agr 未获分型3株。生物膜形成阳性共28株,其中12株可形成强生物膜。MRSA菌株对环丙沙星、四环素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、莫西沙星的耐药率高于MSSA菌株(P<0.05) ;MRSA菌株tst基因携带率高于MSSA (P<0.01) ,cap8H基因携带率低于MSSA(P<0.05),差异有统计学意义;MRSA菌株中agr I和agr I型各占46.51 %和48.84% ;MRSA菌株更倾向形成中等或弱生物膜,与MSSA菌株相比在生物膜形成能力上差异无统计学意义。结论临床分 离血流感 染金黄色葡萄球菌存在多种毒力基因、agr分型、生物膜形成能力,需加强监测。     

中国福氏志贺菌前噬菌体分布与基因组进化研究

目的 前噬菌体是细菌基因组中重要可移动原件,在细菌毒力和宿主适应性方面发挥着重要作用。由噬菌体介导的福氏志贺菌血清型转化频繁发生,给志贺菌的监测、诊断和预防工作带来不便。为了探究我国福氏志贺菌基因组进化与其前噬菌体相关的血清型别转换之间的关系,利用生物信息学方法将前噬菌体在福氏志贺菌基因组中的分布与进化进行关联分析。方法 在中国17省（市、自治区）选取的294株福氏志贺菌具有丰富的血清型多态性。通过比较不同血清型福氏志贺菌基因组中原噬菌体及血清型转换噬菌体的覆盖度,统计分析其分布规律。结果 部分菌株可携带多种前噬菌体,同一种前噬菌体也可分布在不同血清型菌株中;部分菌株虽携带血清型转换噬菌体却并未发生血清型转换事件。不同血清型转换噬菌体在福氏志贺菌进化树中成簇出现,表明该部分菌株出现了血清型集中转换现象。结论 本研究有助于揭示前噬菌体的遗传多样性及与福氏志贺菌进化和血清型变异之间的关系,对预防和控制志贺菌的感染具有重要意义。     

医院感染相关细菌耐药的现状与对策

细菌耐药发展迅猛,严重威胁患者的健康和生命,是全球抗感染领域关注的重点问题.在外科领域,高危患者尤应密切关注.消化道屏障功能不全,条件致病菌异常增多;免疫功能低下或障碍,以致条件致病菌毒性和患者易感性相对增强;重症患者（尤其ICU患者）接受多种医疗护理措施,使得耐药菌易感机会增多;医务人员由于知识不足和对病情严重度的顾虑,不合理应用抗生素等均可导致耐药菌感染性增强,需引起高度关注.应通过对相关知识的认真学习,严格按照各项规定科学用药,杜绝抗生素的滥用,保护患者尤其是危重患者的消化道屏障和免疫功能;注重运用精细手术、通畅引流等专科技术,及时检测、发现感染致病菌给予靶向治疗;加强各项医疗护理技术的无菌操作等综合措施的监控,最大限度地防治、控制耐药菌的产生和传播,促进患者康复.     

我院2008-2012年临床分离细菌分布和耐药性监测

目的:了解医院细菌耐药趋势,指导临床合理使用抗菌药物。方法:监测我院2008-2012年临床分离细菌的耐药状况,用Kirby-Bauer纸片扩散法检测细菌耐药性,参照2008-2012版美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准判定药敏结果,并用WHONET5.4软件统计分析。结果:5年收集该院临床分离菌共10 653株,革兰阳性菌感染呈上升趋势,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率在30.8%⁷4.1%之间,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率在60.7%74.1%之间,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率在60.7%⁷4.0%之间。未发现对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺耐药的葡萄球菌属。革兰阴性菌对青霉素类、头孢菌素类耐药率高;在革兰阴性杆菌中肠杆菌科以大肠埃希菌最多见,非发酵菌科以铜绿假单胞菌多见。肠杆菌科细菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌占42.3%74.0%之间。未发现对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺耐药的葡萄球菌属。革兰阴性菌对青霉素类、头孢菌素类耐药率高;在革兰阴性杆菌中肠杆菌科以大肠埃希菌最多见,非发酵菌科以铜绿假单胞菌多见。肠杆菌科细菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌占42.3%⁶5.2%;肺炎克雷伯菌占40.9%65.2%;肺炎克雷伯菌占40.9%⁷0.1%。结论:细菌耐药性仍呈增长趋势,定期对医院细菌耐药性进行监测有助于了解细菌耐药性变迁,为临床经验应用抗菌药提供依据。     

注射用尤瑞克林细菌内毒素检查方法的建立

目的:建立注射用尤瑞克林细菌内毒素的检查方法。方法:按照2010年版《中国药典》(二部)附录细菌内毒素检查法的要求,用2个厂家的鲎试剂对3个批号的注射用尤瑞克林进行干扰试验和细菌内毒素检查。结果:样品的浓度≤0.000 75 PNA/ml时对细菌内毒素检查无干扰。结论:细菌内毒素检查法可以用于注射用尤瑞克林细菌内毒素的限量检查。     

注射用兰索拉唑细菌内毒素检查法的建立

目的:建立注射用兰索拉唑的细菌内毒素检查法。方法:按照2010年版《中国药典》(二部)附录细菌内毒素检查法,采用2个厂家的鲎试剂对5个厂家的5批样品,通过预干扰和干扰试验确定样品最大无干扰质量浓度,并进行细菌内毒素检查。结果:将供试品溶液稀释到质量浓度为0.1 mg/ml时,不干扰细菌内毒素试验,其细菌内毒素限值为5 EU/mg。结论:采用细菌内毒素检查法检查注射用兰索拉唑中的细菌内毒素方法可行。     

注射用单磷酸阿糖腺苷细菌内毒素检查法的建立

目的:建立注射用单磷酸阿糖腺苷的细菌内毒素检查方法。方法:按照2010年版《中国药典》(二部)附录细菌内毒素检查法,采用2个厂家的鲎试剂对5个厂家的5批样品,通过预干扰和干扰试验确定样品最大无干扰质量浓度,并进行细菌内毒素检查。结果:将供试品溶液稀释至质量浓度为50 mg/ml时,不干扰细菌内毒素试验;确定其细菌内毒素限值为0.5 EU/mg。结论:采用细菌内毒素检查法检查注射用单磷酸阿糖腺苷中的细菌内毒素是可行的。     

注射用心肌肽细菌内毒素检查法的研究

目的建立注射用心肌肽细菌内毒素检查方法。方法根据《中国药典》2010年版二部附录XIX M＂化学药品注射剂安全性检查法应用指导原则＂和附录XI E＂细菌内毒素检查法＂的要求进行试验。结果注射用心肌肽最大不干扰浓度为0.125mg·mL-1。结论可采用凝胶法对注射用心肌肽进行细菌内毒素检查。     

阿魏酸钠氯化钠注射液细菌内毒素检查法研究

目的建立阿魏酸钠氯化钠注射液细菌内毒素检查法。方法采用2010年版《中国药典(二部)》附录中细菌内毒素检查法,对不同批号的样品进行干扰试验和细菌内毒素检查。结果阿魏酸钠氯化钠注射液稀释2倍时,不干扰细菌内毒素试验,其细菌内毒素限值可定为0.5 EU/mL。结论采用细菌内毒素检查法代替热原检查法控制阿魏酸钠氯化钠注射液质量可行。