胰腺癌黏蛋白4基因修饰的树突状细胞疫苗构建及对胰腺癌细胞的免疫效应

Objective To obtain the dendritic cells ( DC)-based vaccine modified by adenovirus containing MUC4 gene , and evaluate the anti-tumor efficacy of DC vaccine to pancreatic tumor cells. Meth-ods The mRNA sequence of tumor associated antigen, MUC4, was obtained from NCBI, and MUC4 se-quence was acquired through the restriction enzyme sites and over lap PCR, then subcloned into adenovirus plasmid to create recombinant adenovirus ( rAd-MUC4) . The DCs were infected by rAd-MUC4 virus and then stimulated the lymph cells from the same donor to induce MUC4 specific cytotoxicity T lympbocytes ( CTL) . The efficacy of CTL was analyzed by LDH releasing assay. Elispot was used to detect the IFN-γ release. Results The recombinant adenovirus containing MUC4 ( sv12) gene was obtained. The MUC4-induced CTL could specifically kill the Capan-1 pancreatic tumor cells [ ( 13. 7±6.0)% , ( 21.4± 4. 7)% , (36.1±9. 5)% at ratios of 10: ,20: ,40: ] , higher than MCF-7 and Bxpc-3 cells respectively, P < 0. 05. The spots number of CTL induced by rAd-MUC4 was ( 139.1±23.3) , more than GFP and PBS control group,P<0.05. Conclusion The Muc4 gene modified DC vaccine could induce the proliferation of CTL, which provided a significant cytotoxicity to HLA-matched MUC4 positive tumor cell lines in vitro.     

用固相微萃取和气-质联用技术分析菘蓝叶中的挥发性成分

异硫腈酸盐是芥属蔬菜中典型的成分,具有化学防癌作用。由于菘蓝Isatis tinctoria L.叶中可能存在挥发性异硫腈酸盐,且对该植物中挥发性成分的研究鲜有报道,因此作者采用顶空固相微萃取(HS-SPME)和气-质(GC-MS)联用技术分析菘蓝叶中的挥发性成分。将3.5g样品溶于含5mL水的管形瓶中,平衡30min,在750r/min条件下搅拌萃取25min,萃取温度30℃。用于分析物热解吸的固定相纤维保持在260℃,共3min,观察多项参数对萃取最佳化的影响。在GC-MS分析中,采用带有Varian2000离子阱质谱仪的Varian3800气相色谱仪。使用2种不同的溶凝硅石毛细管柱:1)…     

65例脑性瘫痪患儿血清蛋白质分析

中枢神经系统的各种病变均可引致血清蛋白成分异常。长期慢性神经系统疾患时r—球蛋白明显降低。由妊娠后期中毒而致的新生儿窒息,可以发现其血清γ—球蛋白降低;颅内产伤的小儿表现为血清总蛋白减少,白蛋白明显减少和所有球蛋白增高。脑瘫患儿的血清蛋白代谢情况,国内尚无报道,国外虽有报道,但结果不     

辐射调控自杀基因的腺病毒载体在胰腺癌细胞中的表达

早期生长反应基因-1(Egr-1)启动子可由电离辐射诱导,使得转导基因的表达可从时间与空间上进行调控,由此驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(TK)在胰腺癌细胞中高效表达,提高杀伤胰腺癌细胞的效率,本研究旨在观察辐射调控下的自杀基因的腺病毒载体在胰腺癌细胞中的表达。     

气郁质相关影响因素的流行病学调查分析

目的:探索气郁质的相关影响因素.方法:以标准化的中医体质量表采用现况调查筛选气郁质与非气郁质,以气郁质(0=非气郁质,1=气郁质)为因变量,以单因素分析有显著意义的因素为自变量进行二项分类Logistic回归分析.结果:小学学历、喜甘甜、喜辛辣、无既往病史进入回归模型.结论:"因病致郁"是形成气郁质的重要机制.     

外加磁场对半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在大鼠体内分布影响的研究

目的观察半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒(ADR-GHMN)在正常肝脏中的靶向性,并观察ADR-GHMN在全身各脏器的分布特征及外加磁场对其分布的影响.方法大鼠正中开腹,肝动脉插管并固定,肝动脉注射125I-ADR-GHMN(相当于阿霉素0.5 mg/kg),左外叶加磁场,磁场应用30 min,移去磁场后,动物立即处死;对照组:肝动脉注射ADR-GHMN,左外叶不加磁场,30min后,移去磁场后,动物立即处死,立即取靶区肝、非靶区肝、肾、心、肺、小肠、脾及周围血作γ计数.肝组织作病理切片.结果注入的纳米粒75～85%分布于肝脏,其它脏器极少.病理切片显示磁区小动脉见大量纳米粒存在,对照组及非磁区肝中纳米粒很少见.结论ADR-GHMN在正常肝组织中有明显的磁靶向性;在磁场作用下,ADR-GHMN主要分布于肝脏,其它脏器含量很少;试验组肾、心、肺、小肠、脾及外周血于对照组的放射活性比较明显降低,表明磁性物质的存在使这些脏器的相对药物暴露明显减少.     

携带HuIL—3基因的人肝癌特异性逆转录病毒转体的构建

构建携带人白细胞介素ｃＤＮＡ的人肝癌特异性闻生转录病毒载体。将ＨｕＩＬ－３ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ的ＰＬ位点，构建ＳＶ４０早期启动子驱动的载体ｐＭＮＳ－ＩＬ－３；从质粒ｐＧＥＭ，７Ｚｆ－ＡＦＰｅ中游离人甲胎蛋白增强子核心序列，先克隆 到ｐＭＮＳＭ的ＰＬ位点上，     

大鼠肝细胞的微载体粘附培养

为探讨简便、实用、长期培养肝细胞的有效方法，以Ｃｙｔｏｄｅｘ ３为材料，对Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝细胞进行微载体粘附培养。