少突胶质细胞对PC12细胞JAK2基因表达的影响及其意义

目的 探讨少突胶质细胞对PC12细胞JAK2基因表达的影响及其意义。方法 用分离培养的少突胶质细胞及其细胞碎片分别作用于培养的PC12细胞,于不同作用时相点在观察PC12细胞突起变化的同时检测PC12细胞内JAK2mRNA的表达JAK2蛋白的磷酸化。结果 在给予少突胶质细胞及其细胞碎片处理后10min,JAK2 mRNA表达较对照组有显著增高（P＜0．05）,但处理12h后,其表达虽较处理10min及4h有显著下降,但仍显著高于对照组（P＜0．05）。对照组JAK2蛋白的活性较低,但少突胶质细胞及其细胞碎片加入后,JAK2蛋白很快便被磷酸化而激活,到处理后12h,激活的蛋白呈较处理10min有显著下降,但仍显著高于正常对照组（P＜0．05）。少突胶质细胞及其细胞碎片对其影响差别不显著（P＞0．05）。结论 少突胶质细胞作用于PC12细胞时可调节PC12细胞JAK2的表达与激活,这种表达与激活在一定程度上可能介导少突胶质细胞对PC12细胞突起生长的影响。     

高脂饮食条件下极长链饱和脂肪酸对大鼠认知功能的影响及相关机制

目的:探讨高脂饮食条件下极长链饱和脂肪酸(VLCSFA)对大鼠认知功能的影响及相关机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为5组,每组10只,即空白对照组组(饲喂基础饲料)、低含量对照(L-CON)组(饲喂20%对照用油)、低含量VLCSFA(L-VLC)组(饲喂20%实验用油)、高含量对照(H-CON)组(饲喂30%对照用油)和高含量VLCSFA(H-VLC)组(饲喂30%实验用油),饲喂12周。Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力;气相色谱法检测脑皮质脂肪酸组成及含量;生化法检测脑氧化应激水平;ELISA法检测脑促炎因子水平;Western blot法检测脑中β-分泌酶(BACE1)、α-分泌酶(ADAM10)、磷酸化tau蛋白及细胞凋亡相关蛋白的水平。结果:与L-CON组相比,L-VLC组大鼠穿越平台次数显著减少(P<0.05),脑皮质C21:0、C22:0、C23:0、C24:0、C26:0和ΣVLCSFA含量显著增加(P<0.05或P<0.01),ADAM10蛋白水平显著下降(P<0.01),BACE1和p-tau396蛋白水平显著升高(P<0....     

宫颈分泌物中IGFBP-1与早产的关系

目的　探讨宫颈分泌物中磷酸化胰岛素样生长因子结合蛋白 1(IGFBP 1)对早产的预测价值。方法　选择 2 0 0 1年 1～ 12月在产科住院诊断为先兆早产的孕妇 90例 ,用分娩预测试纸检测宫颈分泌物中磷酸化IGFBP 1,并观察记录分娩情况。结果　检测阳性者 36例 ,1周内分娩率 5 0 % ,检测阴性者5 4例 ,1周内分娩率 7.4% ,两者差异显著 (P <0 .0 5 )。结论　应用分娩预测试纸检测宫颈分泌物中磷酸化IGFBP 1预测先兆早产孕妇 1周内早产危险增加     

紫杉醇诱导视网膜母细胞瘤细胞凋亡及对磷酸化Bcl-2的影响

目的：研究紫杉醇(Tax)抑制视网膜母细胞瘤(Rb)细胞生长并诱导其凋亡及磷酸化Bc-2在其中的作用。方法：应用^3H-胸腺嘧啶掺入分析法观察Tax对细胞生长的抑制作用，以DNA片段凝胶电泳分析细胞凋亡，用Western blot分析Tax对磷酸化Bcl-2的影响，用cDNA细胞转染法观察突变型Bcl-2阻断Tax的作用。结果：Tax可明显地抑制Y79细胞的生长，1μmoL／L Tax处理24小时，^3H-胸腺嘧啶掺入率下降达55．43％，Tax可诱导Y79细胞凋亡。在此过程中，Bcl-2被磷酸化。当Y79细胞被转染突变型Bcl-2后，Tax对Y79细胞的作用被阻断。结论：Tax可抑制Y79细胞生长并诱导其凋亡，磷酸化Bcl-2参与其过程。     

骨唾液酸蛋白与肿瘤

骨唾液酸蛋白(BSP)是存在于细胞外基质中的一种高度磷酸化和糖基化的分泌性非胶原蛋白，主要分布在矿化组织中，参与骨骼的矿化、转换、分化以及骨吸收等生理病理过程。近年来，BSP在骨转移瘤中的高表达提示它在肿瘤的生长、浸润和转移中发挥重要作用。现主要综述BSP的结构功能、调节机制及其与肿瘤的关系。     

人参皂苷R_d及其C_(12)手性异构体对缺氧/再复氧后蛋白酪氨酸磷酸化的抑制作用

目的　探讨人参皂苷Rd C12 手性碳构型改变与其药理活性的关系。方法　建立牛主动脉内皮细胞 (BAEC)缺氧 /再复氧 (H/R)损伤模型 ;MTT法研究Rd 及Rd C12 手性异构体 (12 epi Rd)对H/R损伤BAEC的保护作用 ;Western印迹法检测蛋白酪氨酸磷酸化 (TPP)水平 ,研究二者对H/R损伤BAEC的TPP水平的影响。结果　 0 .5～ 6 4μmol·L- 1的Rd 及12 epi Rd 能浓度依赖性的保护H/R损伤的BAEC ,二者所能达到的最大存活率分别为 (72 .7± 1.5 ) %和 (70 .0± 1.5 ) % ,EC50 分别为 (1.0 6± 0 .19)和 (1.88±0 .5 5 ) μmol·L- 1(P <0 .0 5 )。Rd 及 12 epi Rd 均可抑制H/R引起的TPP水平的提高 ,浓度为 1,4 ,16μmol·L- 1时 ,Rd 的抑制率分别可达 (2 4 .3± 6 .8) % ,(5 2 .6± 8.7) %及 (73.4± 11.4 ) % ;而 12 epi Rd 的抑制率分别可达 (12 .8± 4 .4 ) % ,(2 4 .1± 10 .3) %及(4 2 .5± 13.0 ) % ,二者在三个浓度点的抑制率均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　人参皂苷Rd C12 手性碳构型的改变对其保护H/R损伤BAEC的作用及抑制H/R诱导的TPP水平增强的作用有一定的影响。RdC12 手性碳构型改变明显降低其抑制TPP增强的作用可能是其保护作用下降的重要原因之一。     

去磷酸化RB蛋白表达对阿霉素诱导MCF-7/S细胞凋亡的影响

目的检测经阿霉素(ADR)处理的人乳腺癌MCF-7/S细胞的凋亡率(AR)及去磷酸化RB蛋白表达的变化,以探讨ADR诱导细胞凋亡的可能机理。方法将体外培养的MCF-7/S细胞分为实验组(以不同浓度ADR处理细胞)及对照组(以等体积的生理盐水处理细胞);应用MTT比色法检测ADR对MCF-7/S细胞的抑制率(IR);应用流式细胞术检测实验组和对照组细胞的AR;采用S-P免疫组化染色法检测ADR作用后去磷酸化RB蛋白表达的变化。结果ADR抑制MCF-7/S细胞增殖,呈剂量依赖性,IC50为0.128mg/L;0.25、2、5μg/mlADR处理的MCF-7/S细胞的AR分别为0.171、0.184、0.259,而对照组MCF-7/S细胞的AR为0.045,两者比较,有非常显著性差异(P<0.01);5μg/mlADR实验组MCF-7/S细胞的去磷酸化RB蛋白的表达量为986.8±207.4,而对照组为131.7±31.9,两者比较,有非常显著性差异(P<0.01);5μg/mlADR实验组MCF-7/S细胞的AR与其去磷酸化RB蛋白的表达量呈正相关(γ=0.998,P=0.037)。结论ADR能抑制MCF-7/S细胞增殖并诱导其凋亡,其机理可能与去磷酸化RB蛋白表达水平上调有关。     

复能剂在治疗有机磷中毒中的应用

急性有机磷中毒的治疗除消除毒物外,解毒包括2个方面,一是治标(抗乙酰胆碱),二是治本(应用胆碱酯酶复活剂),有机磷农药属于有机磷酸酯类化合物,大量进入人体后与胆碱酯酶溶解部位的丝氨酸以共价建结合,形成中毒酶一磷酸化胆碱酯酶,不易水解,临床出现中毒症状。 1 中毒表现大体分3方面的症状:(1)中枢神经系统症状如头痛、头     

球形脂联素、葡萄糖和游离脂肪酸对胰岛β细胞单磷酸腺苷激活的蛋白激酶和乙酰辅酶A羧化酶磷酸化的影响

目的:探讨不同浓度的葡萄糖和游离脂肪酸对胰岛β细胞内单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(adenosine-5'-monophosphate activated protein kinase,AMPK)和乙酰辅酶A羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC)磷酸化的影响,以及球形脂联素对AMPK和ACC磷酸化的作用.方法:培养INS-1胰岛细胞系,用5 mmol/L葡萄糖和0.25 mmol/L游离脂肪酸处理,确定在不同时间对AMPK和ACC磷酸化的影响;观察不同浓度葡萄糖和游离脂肪酸对AMPK和ACC磷酸化的影响;在葡萄糖和游离脂肪酸存在的条件下观察AMPK的药理激活剂氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(AICAR)和球形脂联素对AMPK和ACC磷酸化的影响.结果:不同浓度的葡萄糖和游离脂肪酸都能够在60 min时抑制AMPK和ACC的磷酸化水平,采用AMPK的药理激动剂AICAR能够明显升高AMPK和ACC的磷酸化水平.2.5 mg/L球形脂联素可以使基础状态的AMPK和ACC磷酸化水平分别增加23%(P＜0.05)和50%(P＜0.05).在5 mmol/L葡萄糖的基础上加用球形脂联素使AMPK和ACC磷酸化水平分别增加1.4倍(P＜0.05)和3倍(P＜0.01),在0.25 mmol/L游离脂肪酸的基础上加用球形脂联素使AMPK和ACC磷酸化水平分别增加3倍(P＜0.05)和5倍(P＜0.01).结论:在体外培养的胰岛INS-1细胞中,不同浓度的葡萄糖和游离脂肪酸能够降低AMPK和ACC的磷酸化水平,而AMPK的药理激动剂氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(5'-aminoimidazole-4-carboxamide riboside,AICAR)和2.5 mg/L球形脂联素可以提高AMPK和ACC的磷酸化水平,此作用可以进一步增强胰岛β细胞内的脂肪酸氧化水平,减轻甘油三酯聚集,保护胰岛β细胞功能.     

有机磷类杀虫剂存在其他作用靶分子

目的：研究有机磷类杀虫剂对大鼠脑G蛋白偶联受体激酶2介导的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体磷酸化的影响,揭示有机磷类杀虫剂存在的其他作用靶分子或作用途径.方法：制备亲和层析柱;利用亲和层析方法从大鼠脑中纯化毒蕈碱乙酰胆碱m2受体;将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体或β-肾上腺素受体,G蛋白偶联受体激酶-2,[γ-p32]ATP与对氧磷（PO）、氧毒死蜱（CPO）共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,放射性自显影检测m2受体磷酸化结果.结果：氧毒死蜱完全抑制大鼠脑m2受体的磷酸化,其半数抑制浓度为（IC50）70μmol/L;对氧磷不抑制m2受体的磷酸化;氧毒死蜱和对氧磷都不抑制β-肾上腺素受体的磷酸化.结论：氧毒死蜱有选择性地抑制大鼠脑m2受体的磷酸化,说明某些有机磷杀虫剂的毒性作用存在其他靶分子或作用途径.