链霉菌抗生素生物合成基因的克隆策略

链霉菌具有许多不同于其它原核生物(如大肠杆菌等)的生物学特性,它们在生长过程中常伴有营养菌丝、气生菌丝和顶端结成孢子等形态分化类似霉菌的特性。链霉菌含有一个单环染色体,其基因组大小约10~4kb(近似大肠杆菌的3倍),在DNA组成中G+C含量高达70mol%以上,接近自然界中所观察到的上限。这些生物学上的差异使得链霉菌不能用其它遗传上了解得很清楚的原核系统进行研究,而必须自成研究体系。近年来,链霉菌自身的质粒和噬菌体载体系统的开发进展迅速。利用这些体系统已经分离获得了包括抗生素抗性基因、初级代谢方面的基因、各种输出酶基因、形态分化基因以及许多抗生素(如红霉素、四环素、放线紫红     

Rotor-Gene链融解曲线法甲基化标记筛选技术的建立

目的:建立基于Rotor-Gene的链融解曲线法的甲基化标记筛选技术,分析各种影响因素,评估其实用性.方法:克隆Hela细胞雄激素受体基因外显子-1的Bisulfite-PCR产物,挑出经测序证实的可以代表不同甲基化程度的一组质粒,并以之为模板,在Rotor-Gene 3 000实时定量PCR仪进行扩增和链融解,分析融链温度、链融解曲线与甲基化程度、甲基化模式的相关性及各种影响因素.结果:基于Rotor-Gene 的链融解曲线法,不仅可以区分甲基化与非甲基化,而且能够鉴别片段内细微的甲基化差异;主要的影响因素有升温幅度、缓冲液离子强度、产物浓度等.结论:基于Rotor-Gene 的链融解曲线法,可以集扩增和链融解于一体,是一种经济简便的甲基化分析技术,可用于样品的甲基化筛选.     

纤维蛋白原Bβ链变异基因的体外重组

目的：采用基因重组技术将可能与血栓形成有关的纤维蛋白原Ｂβ链羧基端的ＫＧＤ结构置换为ＥＧＳ结构,提供一种简单方便的构建变异克阡的方法。方法：有含有正常ＢβｃＤＮＡ的ｐＭＬＰ质粒（简称ｐ６８８）的溶液中,加入变异引诱的、筛选引物和ｄＮＴＰ。在Ｔ４聚合酶和Ｔ４连接酶的作用下,合成除变异碱基外,其他碱基均与原正常Ｂβ链互补的变异Ｂβ链,经过两次在不同菌系的大肠杆菌中的表达与筛选,获取变异碱基外,其他碱基     

神经妥乐平对误诊误治的交感神经链综合征疗效观察

目的观察神经妥乐平对误诊误治交感神经链综合征的疗效。方法交感神经链综合征患者60例。应用神经妥乐平注射液6 ml静脉滴注,1次/d,14 d为1个疗程,治疗后进行疗效评估。结果应用神经妥乐平后,总有效率为83.33%。与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论交感神经链综合征诊断时易误诊,症状多种多样,可表现为复杂而带有情感色彩的内脏不适感。神经妥乐平注射液药理作用较广泛,具有多部位、多环节、多靶点的作用特点,对交感神经链综合征疗效显著。     

海洋链霉菌GB-2产抗真菌物质的分离纯化和稳定性研究

目的从海洋链霉菌GB-2的发酵液中分离纯化抗真菌物质,并研究该物质的稳定性。方法采用有机溶剂萃取,硅胶层析和制备型高效液相色谱(HPLC)等分离技术纯化抗真菌物质;通过管碟法,以米曲霉为指示菌研究抗真菌物质的pH、温度和紫外稳定性。结果海洋链霉菌GB-2产的抗真菌物质得到了纯化;该物质在pH1.0、pH13.0、100℃和紫外照射24h条件下抑菌活性几乎不变。结论纯化了海洋链霉菌GB-2抗真菌物质具有很好的稳定性,为其结构鉴定和开发应用提供了理论依据。     

链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病肾病动物模型

随着世界各国社会经济的发展和居民生活水平的提高,糖尿病（DM）已成为继心血管病和肿瘤之后的第三大非传染病,其微血管并发症糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）已成为终末期肾衰竭主要原因之一。由于DN发病机制尚未完全阐明,防治不完善,因此正确建立较理想的动物模型以深入研究是非常重要的。     

内生真菌SEF15927对截短侧耳素的微生物羟化研究

目的 研究植物内生真菌SEF15927对截短侧耳素的转化作用.方法 利用液体培养生长细胞对截短侧耳素进行生物转化.发酵液经乙酸乙酯萃取和硅胶柱层析分离获得一个羟化产物.运用质谱和核磁共振光谱鉴定结构.结果 转化产物为2-羟基截短侧耳素.结论 植物内生真菌SEF15927为一具有高转化率的截短侧耳素羟化菌株,     

镫骨骨质缺损对听力传导影响的有限元分析

目的建立完善的鼓膜-听骨链模型,利用有限元初步探讨镫骨前、后脚骨质缺损对听力传导的影响。方法实验数据源于对一名无中耳病史的成年男性左侧颞骨进行Micro-CT扫描,在医学影像处理软件Mimics上进行三维重建,利用Geomagic形成需要的曲面,最后在SolidWorks上将成型的鼓膜-听骨链模型进行切割组装,建立正常听骨链模型以及镫骨前、后脚骨质缺损模型,利用模型分析骨质缺损对听力传导的影响。结果建立的鼓膜-听骨链模型镫骨足板频振曲线符合相关文献报道,在镫骨前、后脚骨质缺损病理模型下,曲线与正常中耳模型曲线接近。结论利用多软件综合处理,可建立可信度较高的中耳听骨链模型;有限元模拟分析结果显示,镫骨前、后脚缺损部分骨质,未对听力传导产生明显影响。     

喉鳞状细胞癌颈部淋巴结转移关键长链非编码RNA预测模型构建

目的 分析喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)颈部淋巴结转移相关长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)和mRNA表达谱的变化,构建LSCC颈淋巴结转移关键lncRNA预测模型.方法 选取2例LSCC伴颈部淋巴结转移患者和1例LSC...     

片式弹力短服在躯干部烧伤包扎中的应用观察

目的:探讨片式弹力短服应用于躯干部烧伤病人创面包扎固定的效果。方法:将符合拟定条件的躯干部烧伤病人共100例,随机分为实验组和对照组各50例,实验组在创面清创包扎后使用片式弹力短服包扎固定躯干部纱布敷料,对照组使用原始方法即绷带缠绕包扎固定躯干部纱布敷料,待病人创面包括后24h、48h、72h时间段内,针对病人额外包扎敷料的松散次数、材料支出、消耗的药物,医护人员增加工作量,病人的满意度等进行效果评价。结果:实验组的满意率为100%,对照组满意率为76%,X2=10.47,P<0.01,有显著性差异。实验组在72h内包扎敷料的松散次数占4%,对照组占30.67%,X2=52.01,P<0.01,有显著性差异。结论:片式弹力短服包扎固定纱布敷料取得较好效果,值得临床推广。