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鸡柔嫩艾美耳球虫疫苗候选基因在大肠杆菌中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的构建柔嫩艾美耳球虫子孢子表面抗原原核表达载体,并且在大肠杆菌中表达。方法将本室构建的pMD-Mz5-7克隆质粒酶切回收目的片段定向亚克隆到pET-28b( )载体上,构建成原核表达载体pET-28b-Mz5-7,酶切鉴定正确后,在Escherichia coli BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,并经SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果成功构建了目的抗原基因的原核重组表达质粒pET-28b-Mz5-7,IPTG诱导表达该融合蛋白,SDS-PAGE电泳表明,其能表达一分子质量约为37ku的融合蛋白,与预测分子质量相符,最佳反应条件为1mol/LIPTG诱导4h后表达量最高。薄层扫描显示表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的18%,Western blotting结果显示,表达产物可被抗柔嫩艾美尔球虫的多克隆抗体识别,说明该融合蛋白具有很好的反应原性。结论在原核细胞融合表达Mz5-7成功,为鸡球虫病重组苗的研究奠定了基础。 相似文献
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梅毒螺旋体外膜蛋白Gpd的基因型分析及其重组蛋白的免疫原性鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 构建梅毒螺旋体 (Treponemapallidum ,Tp)外膜蛋白Gpd基因的原核表达载体 ,检测其表达产物的免疫原性 ,并比较梅毒螺旋体各菌株Gpd基因序列的同源度。方法 从TpNichols株基因组模板中PCR扩增Gpd基因 ,与GenBank登录的序列做blast比较 ,定向克隆构建原核表达重组体pET2 8b( + ) -Gpd ,转入大肠杆菌ril表达菌 ,SDS -PAGE分析重组蛋白的表达 ,Western -blot检测重组蛋白的免疫原性。结果 载体上所连目的基因片段序列与GenBank登录的Nichols株Gpd基因序列完全一致 ,同其他病原性密螺旋体菌株登陆序列比较同源度为 98%~ 1 0 0 %。SDS -PAGE检测诱导产物显示有一Mr约为 41kDa的特异蛋白带 ,免疫印迹技术检测其能与梅毒阳性标准血清反应。结论 Tp原核表达重组体pET2 8b( + ) -Gpd成功构建 ,且能够在ril表达菌中融合表达 ,为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了一定的实验基础。 相似文献
45.
生物医学知识整合论(X) 总被引:3,自引:3,他引:0
本文从联结度演化的角度描述了人工智能各种知识表达的关系。还讨论了人工智能领域(AI)和数学领域旷日持久的哲学争论与生物医学知识整合论(BMKI)在生物医学知识属性探讨中发现、提出和得出的一系列讨论或结论的同源性、对应性、互析(晰)性。并首次提出如下新概念:准无穷概念及其在理性与非理性相互转化中的作用;准物理性知识概念及其对物理系统的开放性、不可确定性的依附性;“大或空闻”概念及其与科学联想的关系等。笔者相信在生物医学信息学(BMI)的知识工程学的发展中,将不可避免地会遇到这些新概念。 相似文献
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目的 研究胃癌根治术病人围手术期异体输血外周血单核细胞(PBMCs)白细胞分化抗原40配体(CD40L)表达的变化。方法 胃癌根治术病人30例,随机分为3组,每组10例。A组围术期不输血,B组围术期输入去白细胞的全血,C组围术期输入异体全血。另选10例健康人作为对照。分别在手术前、术后2、5、10 d采外周静脉血5 ml,用Ficoll分离液梯度离心法分离出PBMCs和血浆,将PBMCs置于自身血浆环境中,并在植物血凝素(PHA,20 mg/L)的刺激下进行培养,48 h后收获细胞,用流式细胞术检测CD40L表达。结果 健康人外周血未受PHA刺激时检测不到CD40L的表达,经PHA刺激后CD40L 细胞占CD4 T细胞的百分数为1.7%±0.4%,与三组胃癌病人术前比较差异无显著性(P>0.05)。与术前比较,B组术后2 d PBMCs CD40L表达升高(P<0.05),C组术后各时点升高(P<0.05);与A组比较,B组术后2 d升高(P<0.05),C组术后各时点升高(P<0.05);与B组比较,C组术后各时点升高(P<0.05)。结论 围手术期异体输血可造成免疫抑制,输异体血后CD40L表达增加,且输全血比输去白细胞的全血更明显。围手术期成分输血优于输注全血。 相似文献
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胡文华 《牡丹江医学院学报》2003,24(5):64-64
校园文化对于陶冶学生心灵、培养审美情趣、提高品德修养起着很重要的作用 ,而载体是这一作用得以实现的基本物质手段。1 载体价值的主要体现1.1 生动多样的形式———直观感染性强 校园文化的载体是多种多样的 ,如板报、艺术节、运动会等都可以作为载体形式出现 ,这些形式正是根据学生的身心发育、成长特点而运用的 ,符合他们的需要 ,并以其直观的感受、强烈的渲染力为他们所乐意接受。且许多载体是要求学生参与的 ,在参与的过程中对校园文化会有更深的体验 ,能在一定程度上受到来自校园文化所预定的主题的影响。1.2 时效快捷的内容—… 相似文献
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