真菌来源杂萜类化合物的研究进展

杂萜类化合物是一类含有萜类骨架的杂合型天然产物,具有独特的结构和多样的生物活性,在抗菌、抗炎、抗肿瘤等方面均有所体现,成为天然产物领域的研究热点。笔者综述近5年真菌来源杂萜类化合物的研究进展,基于生源特征归纳了其化学结构和生物活性,将为新型杂萜类药物的开发提供有力支撑。     

Halichondria属软海绵次生代谢产物及其生物活性

Halichondria属软海绵分布广泛,含多种生物活性成分,引起人们的深入研究。近30年来,已从Halichon-dria属软海绵中分离得到了许多结构新颖,有抗菌、抗肿瘤和抗病毒等生物活性的次生代谢产物,如大环内酯、聚醚、生物碱、内酰胺、萜类、甾醇、鞘类脂糖苷等。在调研国内外相关资料的基础上,按化合物的结构类型简要介绍了1978—2003年Halichondria属软海绵次生代谢产物及其生物活性的研究概况,为进一步的研究工作提供参考。     

茜草的化学成分及生物活性研究进展

茜草（Rubia cordifolia L），又名活血草、拉拉藤、地血、血见愁、过山龙、活血丹等。主产于陕西渭南、河南嵩县、安徽、河北邢台、山东等地。味苦，性寒，归肝心经，具有凉血止血，行血祛瘀，止咳祛痰通经之功效。用于吐血，衄血，崩漏下血，外伤出血，经闭瘀阻，关节痹痛，跌打肿痛等。近年来，对其化学成份、药理作用和临床应用研究颇多。     

重度哮喘患儿血浆内皮素水平变化及其临床意义探讨

内皮素(ET)是近年来从血管内皮细胞中分离纯化出的生物活性多肽，由21个氨基酸残基组成。现已证明。ET-1不仅存在于血管内皮细胞，而且气管、支气管黏膜、肺血管及肺泡上皮也含有ET。它不仅具有强烈的缩血管作用，而且是强烈的支气管收缩剂。近年来研究发现ET-1在肺内含量最高，并与某些心肺疾病密切相关。本文测定     

IL－10的研究进展

ＩＬ－１０是近年来发现的细胞素，是由单核巨噬细胞、Ｔ，Ｂ等多种细胞产生和具有多向性生物活性的强的免疫抑制因子，改变机体的免疫应答和ＭＨＣⅡ类抗原的表达，并介导ＴＨｌ和ＴＨ２两类Ｔ细胞之间的相互调节。ＩＬ－１０抑制ＴＨ１介导的ＤＴＨ反应，对临床的器官移植、杭炎症、抗寄生虫病和某些传染病的治疗将有潜在应用前景。     

突变型天花粉蛋白TCSYFF81-83ACS的生物活性及免疫原性分析

目的:构建一种突变型天花粉蛋白(trichosanthin,TCS),并对其生物活性和免疫原性进行分析。方法:选择TCS分子上可能的抗原决定簇位点(YFF81-83)进行定点突变,并将所构建的突变体(TCSYFF81-83ACS)在大肠杆菌中进行表达及纯化。随后与野生型TCS(wTCS)比较,分析其DNA酶活性、致核糖体失活活性、免疫原性和急性毒性。结果:初步检测显示,所构建的突变型TCS活性与wTCS活性几乎相当,而其免疫原性有所降低。结论:通过该方法改造TCS是可行的,有可能为抗HIV治疗提供一种高效、低毒、廉价的药物。     

抗癌生物活性肽对人乳腺癌nm231细胞的增殖抑制作用

 目的 探讨抗癌生物活性肽（ACBP）对人乳腺癌 nm231细胞的作用及其机制。 方法 nm231 细胞经不同浓度（0.05、0.10、0.20、 0.25 µg/ml）ACBP 作用 72 h，以噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖活性。以 0.25 µg/ml 的 ACBP 分别作用于 nm231 细胞 4、6、24、48、72 h，行光镜和透射电镜（作用 48 h 细胞）观察。应用 DNA 凝胶电泳和磷脂结合蛋白 V（Annexin V，AV）/碘化丙啶（PI）双标记染色流式细胞术等方法，观察 0.25 µg/ml 的 ACBP 作用不同时间对nm231 细胞凋亡发生及作用 48 h 对细胞周期的影响。以上各项检测均设以 RPMI 1640 培养液取代 ACBP 的对照组。 结果 浓度为 0.1 µg/ml 的 ACBP 即对 nm231 细胞的增殖有明显抑制作用，抑制率为 10.3%，抑制作用具有浓度依赖性，ACBP 浓度为 0.25 µg/ml 时抑制率达 35.1%。光镜观察显示，经 0.25 µg/ml 的 ACBP 作用 24 h，细胞出现凋亡特征；作用 48 h，光镜及电镜下均可见大量的典型凋亡细胞。DNA 凝胶电泳显示，经 0.25 µg/ml 的ACBP 作用 24 h 的细胞出现 DNA 断裂；作用 48 h 的细胞出现典型的梯形电泳图谱。流式细胞术分析显示，ACBP 作用后AV（+）/ PI（－）细胞和 AV（+）/ PI（+）细胞比例均随培养时间延长而增大；作用 48 h 的 nm231细胞 G0/1 期细胞比例高于对照组（P < 0.01），而细胞增殖指数低于对照组（P < 0.01）。 结论 ACBP 可抑制 nm231 细胞的增殖，其机制与抑制nm231 细胞的 DNA 合成和诱导细胞凋亡相关。     

人λ-干扰素在BHK-21中的表达及生物学活性的研究

目的:研究HuIFN-λ1和HuIFN-λ2真核细胞重组表达及其生物学活性.方法:用水疱性口炎病毒(VSV)刺激人宫颈癌HeLa细胞, 用RT-PCR克隆HuIFN-λ1和HuIFN-λ2基因, 与PCAGG-EGFP真核表达载体连接, 构建重组体PCAGG-HuIFN-λ1和PCAGG-HuIFN-λ2并进行鉴定, 后在BHK-21细胞进行表达, 采用VSV*GFP于人肺腺癌A549上进行表达产物抗病毒活性测定;并通过已构建的MDBK-Mxp-Luc细胞系对HuIFN-λ1和HuIFN-λ2诱导MxA抗病毒蛋白产生的特性进行研究.结果:HuIFN-λ1-PMD18-T Vector和HuIFN-λ2-PMD18-T Vector的SacⅠ、XhoⅠ和SacⅠ和SalⅠ双酶切鉴定, 均出现610 bp大小的带, 测序示与GenBank上报道的序列完全一致.PCAGG-HuIFN-λ1活性104 IU/mL, PCAGG-HuIFN-λ2活性为102 IU/mL, 且PCAGG-HuIFN-λ1诱导Mx抗病毒蛋白的表达一定时间内随时间延长表达不断增强, 9～12 h达高峰, 24 h后消失(P＜0.05).结论:成功构建了PCAGG-HuIFN-λ1PCAGG-HuIFN-λ2 的真核表达载体并在BHK-21细胞中得到表达, 其抗病毒活性与诱导Mx抗病毒蛋白密切相关.     

HIV-1整合酶单链抗体对整合酶生物学活性抑制作用的研究

从抗ＨＩＶ１ 整合酶（ｉｎｔｅｇｒａｓｅ ,ＩＮ） 单链抗体（ｓｉｎｇｌｅ ｃｈａｉｎ ｆｒａｇ ｍｅｎｔ ｖａｒｉａｂｌｅ ,ＳｃＦｖ） 的ＨＢ２１５１ 表达菌中选取３ 个克隆,进行ＳｃＦｖ 的可溶性表达与纯化,并观察ＳｃＦｖ 对ＩＮ 体外生物学活性的影响。结果显示,在ＳｃＦｖ ：ＩＮ摩尔浓度为８ ∶１ 时,３ 个克隆的ＳｃＦｖ 可明显抑制ＩＮ 的３′端加工、链转移及去整合活性; 而相同浓度的ＢＳＡ 及抗人交联纤维的ＳｃＦｖ 对ＩＮ 活性无明显影响。测序结果表明,此３ 个克隆的ＳｃＦｖ 基因序列完全相同,符合鼠抗体可变区序列。完全抑制３′端加工及去整合反应所需ＳｃＦｖ 的浓度高于链转移反应。研究结果提示,抗ＩＮ 的ＳｃＦｖ 可抑制ＩＮ 的体外生物学活性,此结论为进一步研究此类ＳｃＦｖ 对ＨＩＶ 在细胞内复制的影响及其机制奠定了基础。     

硅纳米颗粒诱导小鼠间充质干细胞成骨分化和迁移的体外研究*

目的 通过溶胶-凝胶法合成纳米尺径的硅基生物活性颗粒（SBPs）,检测其对间充质干细胞（MSCs）成骨分化和迁移的作用。方法 通过溶胶-凝胶法合成SBPs,通过扫描电镜和ZATA电位分析仪检测颗粒的物理特征。在培养基中添加SBPs配置成系列浓度的条件培养基,检测不同浓度的SBPs对小鼠MSCs增殖、成骨分化和迁移的影响。结果 SBPs的平均直径为134.3 nm,并且呈均匀分散球形颗粒。不同浓度的SBPs对MSCs增殖无影响;但4 µg/mL的SBPs对细胞成骨分化有明显的促进作用;高浓度（>16 µg/mL）的SBPs抑制MSCs的成骨分化;4 µg/mL的SBPs对MSCs有明显的促进迁移的作用。结论 在适宜浓度范围内（1 ～ 4 μg/mL）,SBPs具有促成骨作用和诱导MSCs迁移,未来可能被用来与其他生物材料复合制备新型的骨移植材料。