三七不同变异类型中皂苷的差异研究

目的 三七的根部颜色、茎杆颜色、复叶柄弯曲程度、复叶数、根形、叶形、茎数存在不同的变异类型,分析它们对皂苷量的影响,为三七育种确定选育目标。 方法 在云南文山的6个三七产区采样289份,逐一标记植株变异类型,用HPLC法测定人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1共3个单体皂苷,在同一立地条件、同一栽培措施的基础上,对比分析7种不同变异类型对三七皂苷量的影响。 结果 紫根、复叶柄平展型、长形根、宽叶等4种变异类型三七的皂苷量高,双茎三七的皂苷量低于单茎三七,三七的茎杆颜色及复叶数的多少对皂苷积累无规律性。 结论 紫根三七、复叶柄平展型三七、长形根三七、宽叶三七4种变异类型三七可以作为优质三七品种选育的目标。     

重组共表达载体pSNAV2.0 HSV1tkIREShIL1Ra的构建及其在滑膜细胞中的表达

   目的引入内部核糖体进入位点（IRES）,构建HSV1 tk与hIL 1Ra双基因共表达AAV重组载体并检测其在滑膜细胞中的表达。方法PCR扩增HSV1 tk、IRES及hIL 1Ra基因片段,分别与pMD18 T simple载体连接,测序后,hIL 1Ra与HSV1 tk先后插入pMD IRES,构建重组质粒pMD HSV1 tk IRES hIL 1Ra,酶切出HSV1 tk IRES hIL 1Ra片段,克隆至AAV载体质粒pSNAV2.0上,构建成重组共表达质粒pSNAV2.0 HSV1 tk IRES hIL 1Ra,酶切鉴定后,用脂质体转染上述质粒至原代骨关节炎（OA）滑膜细胞,RT PCR法鉴定共表达质粒在滑膜细胞中的表达。结果酶切鉴定证实重组共表达质粒构建正确;RT PCR检测到转染后的OA滑膜细胞中表达HSV1 tk与hIL 1Ra。结论成功构建了重组共表达质粒pSNAV2.0 HSV1 tk IRES hIL 1Ra;重组质粒转染OA滑膜细胞后,能表达HSV1 tk与hIL 1Ra。这为OA的基因治疗研究提供了理论依据。     

基于7次跨膜受体的药物发现基本方法——细胞检测

随着检测技术进步,含7个跨膜α螺旋结构的受体性质已渐为人们所了解。7次跨膜（7TM）受体不仅具有开关功能,更类似于信息微处理器;特定配体只能参与特定受体介导的部分信号机制,这就为药物发现开拓了一个新领域。为进一步发现7TM受体与配体间的新行为并量化评价药物对这一复杂系统的作用效能,进而指导药物化学研究,药理学检测已成为关注焦点。本文阐述从还原重组体到整体系统测定方法的回归,讨论药物效价与评价其效应的特定检测方法间的联系,强调新的检测方法在药物发现过程中的价值。     

鱼藤酮致PC12细胞凋亡中Par-4蛋白的表达

 目的   探讨鱼藤酮致大鼠多巴胺能嗜铬细胞瘤（PC12）细胞凋亡中前列腺凋亡反应蛋白（Par-4）表达变化,为帕金森病（PD）的基因治疗提供新的靶点 方法 以1、5、10 μmol/L的鱼藤酮分别作用于PC12细胞6、24 h,采用MTT比色法检测细胞存活率;采用Western blot法筛选出Par-4表达改变明显的鱼藤酮浓度和作用时间,给予信号转导抑制剂,检测Par-4表达量的变化。  结果 1、5、10 μmol/L鱼藤酮干预后,PC12细胞出现同程度的受毒形态改变,6h后,10μmol/L组光密度比值显著升高（P＝0.029?646）;20μmol/L c jun氨基末端激酶（JNK）信号通路抑制剂Ginestin预处理1h,光密度比值与单纯鱼藤酮作用组比较显著降低（P=0.0131）;24h后,PC12细胞的存活率降低显著,1、5μmol/L 2组光密度值均升高,与对照组差异有统计学意义(P=0.018461, P=0.043?415)。 结论〓〖HTK〗 鱼藤酮可诱导PC12细胞Par-4凋亡蛋白表达升高,具有时间和浓度依赖性,JNK通路参与其信号转导途径。     

竹根化学成分的研究(Ⅱ)

目的 研究竹根的化学成分。方法 采用色谱方法分离化学成分,根据波谱数据及理化常数分析进行结构鉴定。结果 分离鉴定了9个化合物,分别为3-(p-羟基苯) (2,3)环氧-1-丙酸(Ⅰ)、2,3-二羟基-1-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1-丙酮(Ⅱ)、(+)-鹅掌揪树脂醇B(Ⅲ)、原儿茶醛(Ⅳ)、原儿茶酸(Ⅴ)、荭草苷(Ⅵ)、牡荆苷(Ⅶ )、异荭草苷(Ⅷ)、异牡荆苷(Ⅸ)。结论 化合物Ⅰ为新化合物,命名为环氧香豆酸(epoxy coumaric acid)。     

左金丸胃漂浮缓释片的制剂配方研究

目的 优选左金丸胃内漂浮缓释片的制剂配方。 方法 以辅料羟丙基甲基纤维素(HPMC K4MCR)、卡泊姆(Carbopol)934P、十八醇和NaHCO3为L9(34)正交试验4个因素,干法压片,优化左金丸体外漂浮性能,在此基础上设计F1～F5 5个方案,对处方体外释药性能进行优选;并研究左金丸胃漂浮缓释片体外评价方法。 结果 选择以A3B3C3D3和F4作为左金丸胃漂浮缓释片处方的最优制剂配方组合。初步建立了左金丸胃漂浮缓释片体外评价方法。结论 该剂型符合该药物药理作用特点,有助于延长药物在胃内的治疗作用时间,且制剂配方稳定可靠,可为左金丸新剂型的开发和应用提供参考。     

乙肝病毒X基因对肝癌细胞表达RhoC的影响

目的：探讨X基因对肝癌细胞表达RhoC基因的影响。方法：用定向克隆的方法构建X基因的真核表达载体pcDNA3.1-X，脂质体转染HEPG2细胞;潮霉素选择培养稳定表达X基因的HEPG2-X细胞;免疫组化鉴定HEPG2-X细胞RhoC蛋白表达。结果：构建的真核表达载体pcDNA3.1-X在HEPG2细胞中有稳定表达，HEPG2-X细胞表达RhoC蛋白增强。结论：体外条件下，X基因可促进肝癌HEPG2细胞RhoC表达增强。这可能与肝癌的侵袭、转移有关。     

双歧四联活菌片辅助复方消化酶胶囊治疗小儿厌食症的效果及对其胃肠激素的影响

目的:探究双歧四联活菌片辅助复方消化酶胶囊治疗小儿厌食症的效果及对胃肠激素的影响.方法:选取2018年3月 2019年9月门诊收治的126例厌食症患儿,通过随机数表分为试验组和常规组,每组63例.常规组服用复方消化酶胶囊,试验组在常规组基础上增加双歧四联活菌片辅助治疗.对比2组患儿治疗前后日摄食量、体质量及血浆血红蛋白...     

浙江省柯萨奇病毒A16 VP1基因特征分析及B细胞抗原表位预测

目的了解浙江省柯萨奇病毒A16(CA16)VP1基因特征及其变迁规律并预测VP1蛋白上B细胞抗原表位。方法在Gen Bank检索并下载35个浙江省CA16流行株及69个已知基因型CA16参考株的VP1基因序列,使用MEGA 6.0软件进行比对分析和构建种系进化树,确定浙江省CA16流行株的基因型,并分析VP1核苷酸和氨基酸同源性及氨基酸变异;运用DNA Star中的Protean模块预测VP1上可能的线性B淋巴细胞抗原表位。结果浙江省CA16病毒基因型为B1基因型(34株)和A基因型(1株)。B1型中以B1b亚型(24株)占绝对优势,其次为B1a亚型(10株)。浙江省CA16流行株VP1核苷酸和氨基酸同源性分别为75.5%~100%和89.5%~100%;VP1区氨基酸序列高度保守,但也存在部分变异。VP1中可能的B细胞抗原表位(氨基酸肽段)有13个,分别为10-20、30-38、57-62、73-79、98-106、118-123、159-168、173-177、184-189、240-246、265-273、274-284和289-295。结论浙江省CA16流行株存在A、B1 2个基因型,B1b和B1a为主要基因型,其VP1区氨基酸变异程度较低,VP1中13个预测的B细胞抗原表位可为CA16疫苗的研制提供科学依据。     

复方樟柳碱治疗AION的微视野研究

目的:探讨复方樟柳碱(compound anisodine hydrobromide injection)治疗前部缺血性神经病变(anterior ischemic optic neuropathy,AION)的微视野的临床疗效。方法:AION患者66例107眼,采用患侧颞浅动脉旁皮下注射2mL,1次/d,10d一个疗程,基础疗程为四个,依照病情可增加1~2个疗程,观察眼底视盘形态与视功能改变,以反映其疗效的临床价值。结果:采用患侧颞浅动脉旁皮下注射四个疗程后,视力恢复有显著疗效者约55%,治疗第三、四疗程与第一、二疗程比较,视野缺损度改善有显著性差异(P<0.05),且患侧颞浅动脉旁皮下注射第四疗程视功能恢复最佳。结论:复方樟柳碱可以有效改善AION患者的视力和视野缺损度,是一种治疗AION方便、快捷、安全的方法。