重组人β2糖蛋白1第一结构域对抗磷脂抗体综合征患者血清诱导人脐静脉内皮细胞产生ICAM-1、MCP-1的影响

目的：探讨重组人β2糖蛋白1第一结构域（hrβ2GPⅠDⅠ）对抗磷脂抗体综合征（APS）患者血清诱导人脐静脉内皮细胞产生细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的影响。方法：应用hrβ2GPⅠDⅠ二聚体处理前后的APS患者血清分别与人脐静脉内皮细胞（HUVEC）共孵育，细胞EL／SA和RT-PCR方法分析处理前后HUVEC表达ICAM-1、MCP-1的变化。结果：hrβ2GPⅠDⅠ二聚体处理后的APS患者血清较处理前相比，与其孵育的HUVEC表达ICAM-1、MCP-1在蛋白和mRNA水平均明显降低。结论：邮：GPⅠDⅠ可中和APS患者血清中的大部分致病性抗β2GPⅠ抗体（anti-β2 GPⅠ）。     

磷脂双层膜稳定性的理论分析

目的：越来越多磷脂双层膜的原子力显微镜扫描力谱显示溶液离子浓度对磷脂双层膜稳定性有很大影响，本文从理论角度研究溶液离子浓度对磷脂双层膜稳定性的影响，同时解释两个基于不同模型模拟结果差别的原因。方法：主要根据磷脂分子极性端带电特性，将极性端看作偶极子，然后基于偶极-偶极相互作用理论以及泊松-玻尔兹曼理论解决以上问题。结论：随着离子浓度的增加，磷脂双层膜趋于更加稳定；基于两个不同模型模拟结果差别的原因是高浓度溶液的强静电屏蔽作用。     

用糖基化磷脂酰肌醇B7-1锚定肿瘤细胞膜进行免疫治疗

目的 研制抗肿瘤免疫治疗的新疫苗.方法 用蛋白转化法将B7-1锚定在肿瘤细胞膜上,免疫C57BL-6小鼠后,一组小鼠取脾细胞进行T细胞扩增和细胞毒T淋巴细胞(CTL)功能检测,另一组小鼠进行肿瘤细胞接种试验.结果 用GPI-B7-1修饰的肿瘤细胞膜免疫小鼠后诱发了肿瘤特异性T细胞扩增和CTL.且该疫苗有一定的保护小鼠免受肿瘤细胞侵袭的作用.结论 GPI蛋白转化法为人类抗肿瘤免疫治疗提供了新的、有效的修饰肿瘤细胞膜的方法.     

磷脂酰肌醇3激酶对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡和转化生长因子β1表达的影响

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶（PI3-K）对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖、凋亡和转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响.方法 以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及PI3-K特异性抑制剂wortmannin作为工具药,分别将TNF-α、TNF-α＋wortmannin接种ASMC,置37℃,5%CO2培养箱中培养.逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测PI3-Kp85α、TGF-β1 mRNA表达,免疫细胞化学染色法检测PI3-Kp85α、PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位,Sandwich ELISA检测NF-κB活性,四甲基偶氮唑蓝（MTT）微量比色法测定ASMC增殖,AnnexinV/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡,ELISA测定TGF-β1蛋白质含量.结果 （1）培养的ASMC PI3-K p85α的阳性定位在胞浆.TNF-α组ASMC PI3-Kp85α mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）;（2）TNF-α组ASMCNF-κB活性与对照组相比显著增高（P＜0.01）,TNF-α＋wortmannin组NF-κB活性与TNF-α组相比显著降低（P＜0.01）;（3）TNF-α组ASMC的增殖反应与对照组及TNF-α＋wortmannin组相比显著增加（P＜0.01）;TNF-α组细胞凋亡率与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）,TNF-α＋wortmannin组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组（P＜0.01）.（4）TNF-α组ASMC的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）;（5）TNF-α组ASMC的TGF-β1的mRNA表达水平、培养液上清TGF-β1的蛋白质含量均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）.结论 PI3-K可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及TGF-β1的表达和分泌,NF-κB作为PI3-K的下游信号参与此过程.     

丹参对急性缺血后再灌注心肌磷脂肌醇系统变化的影响

本文首镒报道采用大鼠在体心肌缺血后再灌注模型观察丹参对急性短时间缺血后再灌注心肌磷脂肌醇代谢的影响。结果显示：急性缺血１０ｍｉｎ后灌注１０ｍｉｎ，心肌磷脂肌醇信息传递系统功能明显增强，其磷脂酰肌醇－４，５－二磷酸和肌醇－１，４，５－三磷酸水平显著高于非缺血对照组和缺血组；丹参能显著抑制急性缺血后再灌注心肌磷脂肌醇系统的高功能状态，其ＰＩＰ２和ＩＰ３水平明显低于缺血组和缺血再灌注组。     

免疫相关性重复流产的治疗

目的 妊娠丢失是孕20周以前的死胎或流产,约40%～65%与免疫有关.本研究的目的 在于探讨不同免疫因素所致妊娠丢失的有效治疗方法.方法 选择抗磷脂抗体阳性者155例,采用孕前2周开始口服肠溶阿斯匹林,加用强的松5～10mg/日,24周加用肝素12500u/日.对30例原因不明患者,进行输血免疫疗法.结果 治疗155例抗磷脂抗体阳性患者,成功妊娠146例,再次妊娠成功率94.2%,输血免疫治疗30例原因不明妊娠丢失患者,妊娠成功27例,再次妊娠成功率90%.结论 孕前早期干预,小剂量激素、阿斯匹林、潘生丁、肝素联合治疗自身免疫性妊娠丢失,是一种安全、有效、合理的治疗方法;输血免疫疗法治疗原因不明的妊娠丢失患者,是合理、有效的治疗方法.进一步提高了妊娠成功率.     

灵芝多糖调控PI3K/Akt信号通路抑制肝癌细胞恶性表型

目的：观察灵芝多糖对肝癌细胞SK-HEP-1和Huh-7增殖、迁移、细胞周期及凋亡的影响,同时探讨其可能的作用机制。方法：将肝癌细胞SK-HEP-1和Huh-7作为主要研究对象,设立空白组和灵芝多糖低、中、高组（3.5、7、14 g·L-1）。细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测灵芝多糖对肝癌细胞增殖能力的影响;划痕实验检测灵芝多糖对肝癌细胞迁移能力的影响;流式细胞术测定灵芝多糖对肝癌细胞周期的影响;Hoechst33258染色法测定灵芝多糖对肝癌细胞凋亡的影响,通过蛋白免疫印迹法检测灵芝多糖对肝癌细胞磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平的影响。结果：与空白组比较,灵芝多糖低、中、高组SK-HEP-1和Huh-7细胞增殖和迁移能力降低（P<0.05）;灵芝多糖低、中、高组G1期细胞比例升高（P<0.05）,S期和G2期细胞比例降低（P<0.05）;灵芝多糖低、中、高组可以诱导2种肝癌细胞凋亡,并且药物浓度越高作用越明显。与空白组比较,灵芝多糖低、中、高组PI3K和Akt的磷酸...     

抗磷脂抗体综合征1例报告

1　病例介绍患者 :女 ,2 3岁 ,以意识不清 13ｄ为主诉入院。病人于13ｄ前行扁桃体摘除术 ,术后有出血 ,曾肌注立止血 ,术后第2ｄ出现无诱因失语 ,继而昏迷 ,伴有意识不清 ,轻微抽搐 ,测体温高达 40℃ ,血压为 2 4 0 / 12 0ｋＰａ ,测ＦＴ3、ＦＴ4 略高于正常。给予丙基硫氧嘧啶口服 ,给予抗炎、降颅压治疗 ,体温降至37 5℃。既往患者于半年前曾患脑梗死 ,病情好转后出院 ,未遗留有后遗症。患者入院后一直意识不清 ,查体中球结膜轻度水肿 ,双侧瞳孔等大同圆 ,对光反射灵敏 ,双肺呼吸音粗 ,可闻及痰鸣音。颈软 ,心律齐 ,各瓣膜听诊区未闻及杂…     

实验性肺纤维化肺灌洗液磷脂组分分析

对博莱霉素肺纤维化大鼠模型不同时期作支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数与分类、蛋白含量测定和磷脂及其组分测定,并与肺病理变化作对照分析。结果发现BALF细胞计数和分类与肺组织细胞浸润基本一致,BALF蛋白含量增加,磷脂酰甘油(PG)随病变进展而下降,磷脂酰肌醇(PI)和磷脂酰乙醇胺(PE)升高。PG／PI比值下降,PG／PI比值可作为肺纤维化的一种标志。     

人重组钙依赖性磷脂结合蛋白V在大肠杆菌中的高效表达、纯化及细胞凋亡检测

目的：为细胞凋亡研究提供快速可靠的实验方法。方法：利用RT－PCR技术从人外周血单核细胞系U937 cDNA文库中扩增出编码钙依赖性磷脂结合蛋白V（Annexin V) cDNA,并克隆到大肠杆菌表达载体中,在大肠杆菌中表达含凝血酶识别序列的MS2 Annexin V融合蛋白。表达产物经凝血酶消化,可除去MS2细菌蛋白,再经离子交换层板纯化,可得成熟的Annexin V纯品,FITC标记后的Annexin V可用于细胞凋亡的检测。结果：在大肠杆菌表达的人重组Annexin V占菌体蛋白的56％,经纯化获得99％纯度的非融合型Annexin V,FITC标亡的Annexin V能有效地检测凋亡细胞。结论：成功地建立了批量获取Annexin V的技术路线,为推广高效检测凋亡技术提供了基础。