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971.
mGM-CSF重组质粒的构建、表达及活性鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 构建pc—mGM—CSF重组质粒载体,为mGM—CSF基因治疗肿瘤的研究奠定基础。方法 采用RT—PCR方法从小鼠脾脏中获得目的基因mGM—CSF,克隆于pcDNA3.1/Myc-His(-)(A)质粒上,成为pc-mGM-CSF,用PCR、酶切进行鉴定,然后用脂质体转染小鼠骨髓瘤细胞SP2/0,用G418筛选后通过RT—PCR和SDS—PAGE鉴定,将转染SP2/0上清加入NFS-60细胞,检测蛋白活性。结果 重组质粒中含有mGM—CSF基因,在SP2/0中有表达,且表达产物能分泌到肿瘤细胞外,分泌到细胞外的产物用mGM—CSF依赖株NFS-60细胞检测证明具有生物学活性。结论 成功构建含mGM—CSF真核表达重组质粒,有助于进一步研究其抗肿瘤作用。 相似文献
972.
目的 探讨蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO对人骨肉瘤细胞株MG 63的作用 ,并探讨其作用机制。方法 将不同浓度的Z LLL CHO作用于骨肉瘤细胞株MG 63 ,采用荧光显微镜观察细胞形态改变、电镜观察细胞超微结构变化、MTT法检测细胞增殖活力、琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡、流式细胞仪分析细胞凋亡率及细胞周期改变。结果 Z LLL CHO可有效抑制MG 63细胞株的生长 ,并诱导细胞发生凋亡。凋亡细胞表现为浓染致密的颗粒块状荧光 ,胞核固缩、染色质凝聚并边缘化 ,DNA呈“阶梯状”排列的条带。流式细胞仪分析显示 ,Z LLL CHO在 1.0 μmol/L作用 2 4h、3 6h、48h后 ,细胞凋亡率分别为 5 .4%、2 0 .5 %、5 2 .7%。随药物浓度增高及作用时间延长 ,细胞周期被阻滞于G2 /M期。结论 蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO可有效抑制人骨肉瘤MG 63细胞株的生长增殖 ,阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡可能起重要作用。 相似文献
973.
974.
正常肝组织与肝硬化组织差异表达基因的削减cDNA文库的构建及差异基因的初步筛选 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建人正常肝组织与肝硬化组织差异表达基因的削减cDNA文库.方法采用抑制削减杂交技术,以正常肝组织及有肝癌背景的肝硬化组织作为对比材料.分离出mRNA,经反转录后,通过两轮杂交、两次PCR和T/A克隆构建了两种组织间差异表达基因的cDNA削减文库.结果挑取70个克隆进行酶切和PCR鉴定,显示65个克隆有250~2000 bp插入片段.结论用SSH和T/A克隆技术成功构建了正常肝组织与肝硬化组织差异表达基因的削减cDNA文库.该文库的建立为进一步筛选、鉴定出肝癌发生过程中的相关调控基因奠定了基础,也有助于阐明肝硬化在肝癌发生过程中所起的作用. 相似文献
975.
胃癌7号染色体长臂的杂合性缺失分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:检测胃癌患者7号染色体长臂微卫星位点的杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH),以初步确定7号染色体长臂上与胃癌相关基因连锁最密切的微卫星多态位点及LOH的临床意义.方法:在70例原发性胃癌中应用多重PCR技术扩增覆盖整个7号染色体长臂的9个微卫星位点(平均遗传距离为10cm),聚丙烯酰胺凝胶电泳分离PCR产物,用GeneScan、Genotyper软件进行分析.结果:9个微卫星位点的LOH均可发生于原发性胃癌,总的LOH频率为34.3%(24/70),其中D7S486和D7S798位点的LOH频率较高,分别为24.0%(12/50)和19.2%(5/26);总的LOH频率随临床分期而显著增高(P=0.046),D7S486位点的LOH频率在淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者(P=0.015).结论:在7号染色体长臂D7S486和D7S798位点附近,可能存在与胃癌发展相关的抑癌基因. 相似文献
976.
977.
肿瘤候选抑制基因RASSF1A 总被引:1,自引:0,他引:1
新克隆的RASSF1A基因位于3p21.3,是新的肿瘤候选抑制基因,能明显抑制肿瘤细胞生长。RASSF1A失表达见于多种实性肿瘤组织,与RASSF1A启动子甲基化密切相关。RASSF1A启动子甲基化检测可能是很有用的临床指标。 相似文献
978.
王建莉 《国外医药(植物药分册)》2003,18(2):68-68
分布于哥伦比亚南部等地的胡椒属植物P.lanceaefolium 叶的甲醇提取物对白念珠菌显示很强的抗真菌活性。据此作者以生物活性为导向,从该植物中分得4个新的苯甲酸衍生物及3个已知化合物,这3个已知化合物是首次从该植物中获得。将该植物鲜叶风干,粉碎后用丙酮提取, 相似文献
979.
秦爽 《国外医药(植物药分册)》2003,18(3):119-120
作者对蛇根木 Rauvolfia serpentinaBenth.根进行了下述试验:1)用 ELISA 法和蛋白质印迹法测定了该植物煎剂对经抗CD3抗体包被和 IL-2激活的 T-细胞在热休克后的 HSP70表达的作用;2)以乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定该植物煎剂对激活的T-细胞对恶性胶质瘤细胞株 T98G 和淋巴母 相似文献
980.
吉川圭介 《国际中医中药杂志》2003,25(1):53-53
日本药学会第122次年会于2002年3月26~28日在日本千叶市召开。现对本次年会中有关天然药物方面的研究文献摘要予以介绍,供国内研究人员参考。 相似文献