衰老对DNA甲基化的影响

衰老的生化影响非常复杂,伴随着发生蛋白质、脂类和核酸的生物学明显改变,这些改变的一个重要方面就是DNA的甲基化,DNA甲基化是基因表达修饰的一种机制,基因调节元件内或附近序列的甲基化能通过DNA结合蛋白和染色质结构抑制基因的表达,依赖组织和基因伴随衰老发生甲基化的升高和降低,这些改变能产生病理效果包括恶性肿瘤发生,与衰老有关的自身免疫性疾病,以及其它可能的疾病.因此,虽然衰老会影响DNA甲基化,但DNA甲基化改变也会影响衰老.本篇综述概述伴随衰老一些特异基因甲基化状态改变的事实以及DNA甲基化型式改变的机制.因为这个领域仍然在发展中,可以预计这一领域的新知识会快速增长.     

原癌基因表达在哮喘气道重塑中的作用

目的观察原癌基因表达在哮喘气道重逆中的作用。方法卵蛋白致敏豚鼠 建立哮喘模型。Dot-blot,North-ern-blot分子杂交及免疫组织化学技术观察豚鼠气道上皮,肺组织中原癌基因c-fos,c-myc,c-jun和c-sis的表达及其与气道重塑的关系。结果：正常豚鼠气道及肺组织中c-fos和c-myc mRNA无或很少表达,哮喘发作后,豚鼠气道上皮及肺组织c-fos和c-mycmRNA的表达明显增加;免疫组织化学染色显示Fos,Myc,Jun及Sis在政党豚鼠低水平表达,4种原癌基因产物表达增,国,阳性反应细胞主要分布于气道上皮细胞胞质、气道及细支气的上皮细胞胞核及浸润的炎症细胞中,病理结果显示气道粘膜及小鼠气管平滑肌周围淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞浸润,气道平滑肌显著增生,结论原部达在气道重逆过程中有重要作用。     

血小板衍生生长因子和转化生长因子—β1在致敏大鼠模型肺泡巨噬细胞中的表达变化

目的：探讨肺泡巨噬细胞在支气管哮喘气道重塑中的作用。方法：16只Wistar大鼠随机分成2组：正常组、哮喘模型组,每组8只,采用鸡卵清白蛋白腹腔致敏和反复雾化吸入复制大鼠过敏性哮喘气道炎症模型。应用免疫组化和原位杂交法观察血小板衍生生长因子－b(PDGF-b)、转化生长因子－β1（TGF－β1）在肺泡巨噬细胞中的表达。结果：2组间肺泡巨噬细胞PDGF－b蛋白表达阳性率和表达强度差异无显著性,而模型组TGF－β1蛋白表达阳性率（P＜0．05）和表达强度计分（P＜0．05）高于正常组。原位杂交法显示,模型组TGF－β1 mRNA的表达阳性率（P＜0．05）亦高于正常组。结论：哮喘肺泡巨噬细胞表达高水平TGF－β1可能参与哮喘气道重塑过程。     

针刺对小白鼠脑染色质非组蛋白质影响的实验研究

本研究以快速老化痴呆模型小白鼠（ＳＡＭ－Ｐ／１０）为材料,分离纯化了其脑染色质非组蛋白质（ＮＨＣＰ）,采用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）,观察了釜刺地ＳＡＭ－Ｐ／１０脑染南非组蛋白质增龄性变化的影响,结果表明,针刺人中、内关穴可以拮抗ＳＡＭ－Ｐ／１０脑染色质非线蛋白中部分功能蛋白脑迁移率非组蛋白质随增龄再现的快速减少,而６月龄蛋白电泳谱带受调节能力,明显优于１２月龄。     

血瘀通合剂预防冠心病经皮腔内冠脉成形术及支架植入术后再狭窄的临床研究

目的 :探讨血瘀通合剂预防冠心病经皮腔内冠状动脉成形术及支架植入术后再狭窄的临床疗效。方法 :将 36例冠脉内成形术及支架植入术成功的冠心病患者随机分为西药常规治疗加血瘀通合剂治疗组 18例和西药常规对照组 18例 ,疗程均为 6个月。追踪观察患者有无心绞痛复发 ,以及患者的血瘀症状和血瘀证候积分的变化 ,并通过心电图活动平板运动试验、冠状动脉造影复查评价再狭窄的发生。结果 :治疗组患者在随访中各项血瘀症状均有明显改善 (P <0 .0 1) ,6个月后血瘀证候积分值明显下降 (P <0 .0 1) ,且与对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1) ;治疗组心绞痛复发率显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;36例患者冠脉造影复查 11例 ,复查率为 30 .5 %。其中治疗组复查 6例 ,再狭窄率为 33.3% ;对照组复查 5例 ,再狭窄率为 4 0 % (P>0 .0 5 )。结论 :血瘀通合剂预防冠脉内成形术及支架植入术后再狭窄有一定作用     

兔颈动脉球囊损伤后内膜增生的实验研究

目的　制作兔颈动脉球囊损伤后再狭窄模型 ,观察兔颈动脉球囊损伤后内膜增生的动态变化 ,探讨再狭窄的可能机制。方法　健康雄性家兔 40只 ,随机分为正常对照组 ( 10只 ) ,实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 ,实验组行右颈总动脉血管成形术 ,并分别于术后第1、2和 4周处死实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 ,第 4周同时处死对照组兔。光镜下观察内膜损伤后形态学变化 ,并进行图像分析。结果　与对照组比 ,实验组内膜面积呈持续性显著增加 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,管腔面积从第 2周开始呈持续性显著减少 (P <0 0 1)。结论　兔颈动脉球囊损伤能较好的模拟再狭窄形成过程 ,球囊损伤后内膜增生是管腔狭窄的主要因素     

辛伐他汀对人鼠心肌梗死后TNF-α及Ⅰ型胶原的影响

目的研究辛伐他汀对大鼠急性梗死（AMI）后肿瘤坏死因子（TNF）-α及Ⅰ型胶原的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支（LAD）制成急性心肌梗死模型，随机分3组：分别为辛伐他汀干预组（MI-S）、心肌梗死对照组（MI-C）和假手术组（sham）。4周后，RT-PCR法检测左心室非梗死心肌TNF-α蛋白及mRNA表达，Western blot测定左心室非梗死区心肌TNF-α蛋白表达，免疫组化测定左心室非梗死区心肌Ⅰ型胶原合成量。结果大鼠心肌梗死4周后心脏重量、左心室心肌Ⅰ型胶原合成量、TNF-α蛋白及mRNA表达较sham组明显升高（p〈0．05），MI-S组心脏重量、Ⅰ型胶原合成量、TNF-α蛋白及mRNA表达均较MI-C组显著降低（P〈0．05），但仍高于sham组（P〈0.05），三组血脂无显著性差异。结论辛伐他汀减少大鼠心肌梗死4周后Ⅰ型胶原合成量，改善心室重塑，此改变不依赖其降脂作用，可能与其抑制心肌表达TNF-α有关。     

用Feulgen方法检测凋亡细胞的实验研究

细胞凋亡是生物体内的一个重要生命现象,发生在正常生理或疾病过程中.许多疾病特别是恶性肿瘤的发生和发展与细胞洲亡异常有关,所以对细胞凋亡的研究受到广泛关注.但目前常用于检测凋亡细胞的方法、设备和试剂要求比较高,在普通实验室较难开展.本文应用传统的DNA染色法检测凋亡细胞,取得较好的实验结果.现将研究结果报告如下.     

美托洛尔干预在心肌梗死大鼠细胞外基质重塑中的作用

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP-2)及其生理性抑制剂(TIMP-2)和转化生长因子β1(TGF-β1)在心肌梗死后大鼠细胞外基质重塑中的作用及美托洛尔干预的效果.方法:结扎左前降支建立大鼠急性心肌梗死模型,梗死后存活24 h者随机分为两组:美托洛尔组(MI-B)给予美托洛尔(Metoprolol)50 mg/(kg·d),心肌梗死对照组(MI)仅给予相同体积的生理盐水15 mL/(kg·d),此外仅穿针不结扎左前降支作为假手术组(SH),给予生理盐水,Bid,均经灌胃给药.观察各组4周末血流动力学、心室重塑指标以及MMP-2,TIMP-2和TGF-β1蛋白的免疫组化检测结果.结果:与假手术组比较,4周末心肌梗死组大鼠心肌组织MMP-2,TIMP-2,TCF-β1和MMP-2/TIMP-2比值均明显增高(P均为＜0.01),另外心肌梗死组的左室舒张末压(LVEDP)、相对左心室重量(LVRW)、相对右心室重量(RVRW)和左室胶原容积分数(CVF)均显著增加(P均为＜0.01),左室内压最大上升和下降速率(±dp/dt)均显著降低(P均为＜0.01),表明发生了心室重塑和心功能下降.与心肌梗死组相比,美托洛尔治疗组MMP-2、TGF-β1和MMP-2/TIMP-2比值均明显下降,分别从美托洛尔干预前的0.281,0.253和1.836下降至0.153,0.128和1.006(P均为＜0.01),而TIMP-2无显著变化,由0.153降至0.151(P＞0.05)伴LVEDP、LVRW、RVRW、CVF,-dp/dt和 dp/dt的显著改善,LVEDP、LVRW、RVRW、CVF分别比美托洛尔干预前下降36.13%,9.56%,9.95%和29.06%,-dp/dt和 dp/dt分别比美托洛尔干预前增加8.90%和9.64%(P均为＜0.01).结论:美托洛尔能有效地防治心肌梗死后细胞外基质重塑,其改善心室重塑这一效应与其降低心肌中高表达的MMP-2、TGF-β1和调节MMP-2/TIMP-2比值平衡有关.     

白三烯受体拮抗剂对哮喘小鼠气道重塑及细胞周期蛋白D1的表达影响

目的：研究应用白三烯受体拈抗剂（孟鲁司特钠）对哮喘小鼠肺组织中细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）的表达影响及对支气管哮喘气道重塑的作用，探讨白三烯受体拮抗剂在哮喘治疗中的作用。方法：将30只BALB／c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、孟鲁司特钠组3组，每组10只；卵蛋白致敏和激发建立哮喘小鼠模型；HE染色观察各组气道炎症发生及气道结构改变情况；免疫组化观察肺组织中Cyclin D1的表达及定位；RT-PCR及Western-blot测定各组小鼠肺组织中Cyclin D1的mRNA和蛋白表达变化。结果：HE染色提示哮喘组与对照组相比出现嗜酸性粒细胞浸润增多、纤毛脱失、平滑肌细胞层增厚等改变．而治疗组上述改变较哮喘组为轻；免疫组化显示Cyclin D1在哮喘小鼠气道平滑肌细胞、内皮细胞、成纤维细胞中皆有表达而在对照组中表达减弱（P〈0．05），而治疗组表达量较哮喘组低（P〈0．05）；RT-PCR及Western blot检测发现Cyclin D1在哮喘组表达较对照组为高（P〈0．01），而治疗组表达量低于哮喘组（P〈0．01）。结论：哮喘小鼠肺组织中Cyclin D1表达量较正常组为高；白三烯受体拮抗剂能够抑制Cyclin D1表达，减轻气道炎症反应、延缓气道重塑进程。